sul dosaggio delle sostanze amare nelle droghe vegetali
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sul dosaggio delle sostanze amare nelle droghe vegetali
Proni. Mr. 2650 Studio sul delle sostanze dosaggio nelle amare droghe vegetali TESI PRESENTATA ALLA SCUOLA POLITECNICA FEDERALE DI ZURIGO PER OTTENERE IL TITOLO DI DOTTORE IN SCIENZE NATURALI DA FRANCESCO MUGGINI FARMACISTA DIPLOMATO DI GIUBIASCO (TICINO) Referente Correferente Stampato dalla Tipografìa Giuseppe Maggiori Via Madre Cabrini, 11 1957 Sig. Prof. Dr. H. Flùck : Milano (Italia) : Sig. Prof. Dr. J. Buchi AI MIEI CARI GENITORI I Al Prof. consigli e Dr. Hans Fliick uno speciale ringraziamento per l'interesse dimostrato durante lo svolgimento i per preziosi di questo mio lavoro. Al miei Prof. più Dr. Arthur Linder sentiti ringraziamenti farmacia, ringrazio gli che si sono al Suo assistente Ing. dpi. Karl Abt per l'aiuto prestato nel stabilire i eseguire gli esperimenti biologici Inoltre e e assistenti piani i per per i calcoli statistici. e il gruppo di studenti dell'Istituto di gentilmente prestati II per le determinazioni biologiche. INDICE pag. INTRODUZIONE E PRESENTAZIONE DEL PROBLEMA . . PARTE GENERALE I. 4 AMARI 4 1. Introduzione 2. Definizione 3. Vista 4 4 d'assieme nenti sostanze delle amare principali piante delle e medicinali sostanze amare che conte¬ esse con¬ 5 tengono 4. Tabella secondo sistema botanico delle un medicinali contenenti che 1 esse sostanze amare e principali piante delle sostanze amare 5 contengono 5. Farmacologia degli 6. 7. Uso terapeutico Suddivisione degli amari 12 8. Gusto 13 9. Chimica delle e Tabella di 11. Altre cui 12 costituzione 10. a 11 amari esse sostanze alcune 14 amare sostanze amare e delle classi chimiche 15 appartengono 16 sostanze amare A) Descrizione generale delle cinque droghe a) Herba Absinthii a') Definizione della Pharm. Helv. V 6') Composizione chimica e) Farmacologia e uso terapeutico b) Radix Gentianae a) Definizione della Pharm. Helv. è') Composizione chimica e') Farmacologia e uso terapeutico e) Definizione della Pharm. Helv. V Composizione Farmacologia '. 17 17 18 18 19 20 Definizione della Pharm. Helv. V Composizione chimica e') Farmacologia e uso terapeutico d) Folium Menyanthidis a) b') e') 16 16 18 V Herba Centaurii a) 6') 16 chimica e uso 20 20 21 21 21 21 terapeutico IH 21 e) Flavedo Aurantii amari a') 6') e') 22 Definizione della Pharm. Helv. V Composizione Farmacologia 22 chimica e uso 22 22 terapeutico PARTE SPECIALE METODI CROMATOGRAFICI IN MODO PARTICOLARE CRO¬ MATOGRAFIA SU CARTA Isolazione e 23 cromatografia delle sostanze amare generali sulla cromatografia su carta Considerazioni 23 .... 1) Scopo di queste ricerche cromatografiche 2) Metodo pratico per sviluppare un cromatogramma ... 3) Fase mobile 4) Condizioni di sviluppo 5) Reattivi 28 29 .... A) Radix Gentianae a) b) Estrazione della ricerche fin e reperibili ora genzipicrina nella bibliografia dalla radice fresca di 30 31 e) Cromatografia della genziopicrina d) Reattivi per la genziopicrina a') Reattivo 6') Reattivo e') Reattivo 32 alla benzidina 32 al naftoresorcinolo 32 33 al cloruro di tetrazolio Estrazione delle sostanze amare dalla radice secca di gen¬ ziana 33 Cromatografia genziana dell'estratto g) Estrazione delle ottenuto dalla radice secca di 33 sostanze amare dalla radice fresca di gen¬ ziana 34 h) Cromatografia dell'estratto della radice fresca di genziana 6) Herba Centaurii a) cenno storico e lavori fin'ora reperibili nella biblio¬ 35 b) Estrazione delle taurea 34 35 grafia e) 29 gen¬ ziana Breve 29 29 Cenni storici /) 26 28 CROMATOGRAFIA DELLE SINGOLE DROGHE e) 23 26 sostanze amare contenute nell'erba di cen- minore Cromatografia dell'estratto 35 ottenuto minore dall'erba di centaurea 36 IV pag. C) Folium Menyanthidis 37 a) Cenni storici e lavori fin'ora reperibili nella bibliografia b) Estrazione della sostanza amara dalle foglie di trifoglio . 38 fibrino e) Cromatografia di trifoglio della secche sostanza ottenuta amara dalle foglie 38 fibrino D) Flavedo Aurantii amarii a) Breve cenno storico 39 e lavori fin'ora reperibili nella biblio¬ grafia 39 b) Metodo per l'estrazione delle sostanze di arancio amaro e) Cromatografia cio 37 dell'estratto ottenuto amare dalla dalla scorza 40 scorza di aran¬ 40 amaro d) Reattivo 41 E) Herba Absinthii 41 a) Cenni storici e lavori fin'ora reperibili nella bibliografia 6) Sviluppo del metodo per estrarre le sostanze amare dal¬ . l'erba di assenzio maggiore a') Scelta del solvente 6') Difficoltà incontrate e) Micrometodo per isolare quantitativamente le sostanze ama¬ di assenzio maggiore re contenute nell'erba d) Cromatografia della polvere bianca ottenuta dall'erba di assenzio maggiore .... 41 43 43 44 44 45 e) Reattivo 45 /) Visibilizzazione delle macchie g) Considerazioni proprie sul metodo 45 46 PARTE PRIMA METODO BIOLOGICO I. 48 48 Parte teorica A) Introduzione al metodo biologico 48 B) Fisiologia del gusto 48 a) Localizzazione del gusto b) Le condizioni affinchè una percentuale gustativa e) Differenti speci d) Altri fattori 48 avvenga di gusto 49 49 che possono influenzare il gusto V .... 50 pag. C) Principali lavori un'ora reperibili nella bibliografia ... D) Osservazioni riguardanti la determinazione del grado di ama¬ 51 rezza E) Proposta di un metodo per la determinazione del grado di rezza agli scopi della Pharm. Helv. VI ama¬ 52 53 a) Prescrizioni generali ò) Determinazione della sensibilità gustativa e) Determinazione del grado di amarezza della droga 53 o del medicamento 54 a') Assaggio preliminare b') Determinazione principale 54 II. Parte 54 55 sperimentale delle due serie di 55 esperimenti A) Principii a) Esperimento primo b) Esperimento secondo e) Droghe studiate 55 55 56 56 B) Risultati a) Risultati del primo esperimento b) Risultati del secondo esperimento C) Considerazioni sui risultati dei due esperimenti a) Primo esperimento ò) Secondo esperimento D) Dispersione del metodo per la determinazione 56 58 .... 62 delle sostanze 65 Considerazioni sul metodo e 68 conclusione F) Risultati di diverse determinazioni delle unità di amarezza da me eseguite, con alcuni campioni delle cinque droghe trattate a) Herba Absinthii a') Risultati con la droga secca b') Risultato con la droga fresca essicata da noi ratura d'ambiente b) Radix Gentianae a') Risultati con la droga b') Risultato con la droga e) Risultati con la droga a') Risultato Folium con 69 a tempe¬ secca 70 fresca 70 70 secca 70 70 la droga secca 70 droga secca 71 Menyanthidis a') Risultato 69 69 d) Herba Centaurii e) 68 70 Flavedo Aurantii amari a') 62 63 amare E) 50 per la 71 VI pag. PARTE SECONDA I. Determinazione dell'olio essenziale nell'erba di assenzio, nella scorza di arancio amaro e nella radice di genziana ... A) Scelta II. del metodo 72 a) Metodo volumetrico 72 6) Metodo ossidimetrico 72 e) Metodo 73 gravimetrico Determinazione dell'olio essenziale nell'assenzio maggiore A) Lavori fin'ora reperibili nella . bibliografia 78 Considerazioni generali b) Quantità della droga da a) 78 adoperare per la determinazione distillazione (con diagramma) e) Durata della d) Risultati per il raccolto 1954 e) /) .... 79 80 conclusioni 80 III. Determinazione dell'olio essenziale nella radice di genziana . A) Lavori fin'ora reperibili nella bibliografia 81 Scelta del metodo di determinazione a) b) Quantità da adoperare per ogni determinazione e) Durata della distillazione d) Risultati dell'olio essenziale nella scorza di 81 ... 82 arancio 83 A) Lavori fin'ora reperibili nella bibliografia 83 B) Lavori propri Quantità di droga 85 da ogni determinazione (con diagramma) adoperare ò) Durata della distillazione e) 81 82 amaro a) 81 81 B) Lavori propri Determinazione 78 maggiore raccolto di fresco e 78 79 Risultati per il raccolto 1955 Ricerche su un campione di erba di assenzio g) Osservazioni 74 74 B) Lavori propri IV. 72 per .... Risultati 85 85 85 RIASSUNTO 87 Bibliografia 90 VII INTRODUZIONE E PRESENTAZIONE DEL PROBLEMA Alcune piante, farmacopee di amari, sia non In però contenenti sostanze amare, quasi gli Stati, benché, tutti ancora differenti; contenuto di analisi nuto farmacopee, metodo per determinare Sul mercato esistono e quantitativo, sono ancora vero valore nelle annoverate terapeutico degli ben studiato. di queste nessuna un il quindi di queste utile si trova sappiamo, amari. questi campioni è per quanto noi per eliminare le piante medicinali, necessario e droghe con purezza un sistema escogitare che mostrassero conte¬ un troppo basso in sostanza attiva. Una grande importanza ha assunto in questi ultimi tempi il metodo biologico; al presente già adoperato nella Pharm. Helv. V determinazione della digitale, delle saponine, della vitamina A e della di determinazione per la vitamina D la via precisi, che Tutti i A mio ecc. migliore per tale con avviso, però, metodo chimico con esso rappresenterebbe si otterrebbero risultati più altro metodo. qualsiasi processi un ricerca, perchè per la determinazione delle sostanze attive nelle droghe avvengono in tre fasi differenti: 1) In un 2) In un 3) Da ultimo, si primo tempo provvede si all'estrazione della sostanza secondo tempo si isola la sostanza attiva dalle dalla sostanze droga. che l'ac¬ compagnano. via procede alla vera determinazione quantitativa, sia gravimetrica, titrimetrica o per altre vie a seconda dei casi. La fase delle è sostanze amare, per ficoltà: cole, più difficile prima di tutto in secondo luogo, perchè luogo quasi sempre la l'isolamento delle perchè sono per la loro seconda, specialmente nel quali presenti in si relativamente già sperimentata instabilità, non è ancora Infatti la maggior parte delle sostanze amare se non speciali precauzioni all'aria subisce facilmente trasformazioni, dazione che per l'estrazione. Per gusto altri processi chimici che esempio l'absintina manifestano all'aria diventa amaro. — si 1 — caso presentano grandi dif¬ quantità la loro costituzione chimica in parte per si in pic¬ terzo conosciuta. prendono sia per ossi¬ già durante gialla perdendo il suo In alcune pubblicazioni fin'ora esistenti in questo campo, si è cercato possibilmente a freddo e il più rapidamente possibile. Oggigiorno è molto usato il metodo cromatografico, sia di assorbi¬ mento che di ripartizione. Le 5 droghe seguenti rimarranno nella Pharm. Helv. VI per la deter¬ di estrarre minazione delle sostanze amare metodo che servirà vare un Enumerazione delle in esse contenute; abbiamo cercato di agli scopi della tro¬ stessa. cinque droghe 1) Herba Absinthii 2) Radix Gentianae 3) Flavedo Aurantii amari 4) Herba Centaurii 5) Folium Menyanthidis. Le altre piante medicinali, Pharm. Helv. V, non contenenti sostanze le abbiamo trattate, perchè amare esistono nella che sono già dei metodi per la loro determinazione. Per esempio la In mezzo condurangina nella corteccia di condurango (1). parte speciale del mio lavoro ho analizzato qualitativamente, per della cromatografia su carta le suddette droghe; ho cercato anche una di vedere se questi cromatogrammi danno la possibilità di una valutazione quantitativa; infine ho tentato di isolare in piccola scala alcune di queste sostanze amare. Numerose scartato perchè: 1) una In 2) amare che due campioni, palmente sul gusto nel trovano pur mostrando degli amari, secondo una le per l'amaro. Stewart Wolf and Marian quantitati¬ il metodo chimico è stato da droga; attiva, possono possedere L'azione nato dalla pianta medicinale dove si capitare stanza le difficoltà che si incontrano nell'isolare sono le sostanze vamente più un sostanze ugual amare contenuto in differente azione me può so¬ amara. si basa princi¬ Quando questo lavoro era già termi¬ Mack (169) pubblicarono un lavoro cognizioni odierne, quale dicono di dubitare che, le sostanze amare, se bocca, provochino un'azione secretoria nello stomaco, però non è ancora stata detta l'ultima parola. introdotte nella su questo argo¬ mento Perciò sembra, per il momento, zione di queste droghe un metodo — per la determina¬ Per i motivi elencati sopra, più logico fisiologico, 2 -. attuare siamo passati tuisce la La alla determinazione prima « biologica contengono oltre le » tanto il loro potere curativo è aumentato. sono avere passato a una sostanze determinazione amare, ciò costi¬ « Flavedo Aurantii anche olio essenziale, per¬ quantitativa completa di queste droghe, determinare l'olio essenziale in chè nella Pharm. Helv. VI. è un sostanze amare, e Radix Gentianae », P« Herba Absinthii », il amari Per delle parte del mio lavoro. previsto a esse contenuto, anche per¬ questo riguardo l'introduzione di metodo. Ho di quindi analizzato, con questo metodo, il maggior numero possibile droghe, per poter creare le basi su cui stabilire il contenuto minimo in sostanza attiva che la Parm. Helv. VI dovrà parte del mio lavoro. — 3 — esigere. Ciò costituirà la seconda PARTE AMARI I. 1. Introduzione Gli amari hanno avuto fin dai tempi più popoli. parte i poteri farmacologici, remoti grande impor¬ una per i tanza A l'idea, che medicine sempre valsa voli al gusto. che amare dipendono siano dal gusto gli amari amaro, è più efficaci, di altre grade¬ idea da molto tempo diffusa nei Questa Korte (2) dice, troviamo cora. 2. GENERALE già descritti popoli persiste an¬ nei libri del 1500. Definizione Mi sembra questo punto utile dare a una definizione alle sostanze amare. Gli amari posseggono Nella stanze gusto gusto in e un senso molto largo, tutte sono le sostanze che amaro. bibliografia con spiegata, presi moderna il concetto di amaro, si limita gusto amaro, la cui costituzione la cui azione farmacologica è chimica dovuta non è a quelle ancora principalmente so¬ stata al loro amaro. Come per niantina nelle esempio, l'absintina nell'erba di Assenzio maggiore, la mefoglie di trifoglio fibrino, la genziopicrina nella radice di Genziana, (però la costituzione chimica di quest'ultima da due anni è cono¬ sciuta) (3). Da ciò che è amare, col stato detto sopra risulta che il nel concetto moderno della progredire va sempre delle sostanze più restringendosi delle ricerche chimiche. In questa parte moderno di parola, numero amaro, generale del soltanto le mio lavoro tratterò, secondo il concetto sostanze amare — 4 — (che chiamerò coi nomi di amari, sostanze amaro, prese nella definizione sopra citata Alla fine di questo che stanze amare non Qui espongo amare un vista d'assieme che quel botanico, sistema Genzianacee, delle seconda dei a nelle un droghe cenno su casi) com¬ studiate alcune altre principali piante medicinali quadro generale sono delle state comprende costituzione chimica fin'ora Per contenute farò anche delle sostanze e che per il loro gusto Questa e amara so¬ comprese nella definizione. sono sostanze amare, ze capitolo Vista d'assieme delle 3. sostanza amare, è non riguarda che amare piante medicinali adoperate e delle sostan¬ da alcuni secoli ad oggi. in gran parte ancora contenenti contengono esse quelle sostanze la cui stata trovata. la distribuzione di tali piante medicinali nel specialmente frequenti nelle famiglie delle le troviamo Loganiacee, delle Composite, delle Simarubacee ecc. principali amari nella tabella seguente, che di completezza. Ho cercato di riunire i però ha alcuna pretesa non Per l'allestimento di questa tabella mi pubblicato 4. da Korte Tabella secondo esse un lavoro (2). un sistema botanico medicinali contenenti che servito molto di sono sostanze delle amare e principali piante delle sostanze amare contengono Pianta medicinale Famiglia e droga Sostanza Formula Biblio¬ amara bruta grafia C19H22O4 (5) * Parmeliaceae (appartenente l'unità Cetraria islandica Ach. al¬ Cetrarina Lichesterina. Lichen islandicus Acido botanica Cetraria islandica Ach. Juniperus protoli- chesterinico Cryptogamae) Cupressaceae (4) Juniperina communis L. (6) Fructus Juniperi Abietaceae (appartenenti l'unità Picea excelsa Poir. al¬ botanica Pix liquida Phanerogamae, divisione Gymnospermae) Piceina C14H180- (6) Coniferina C16H22O8 (7) Larix Mill. Abies L. Balsamum canadense — 5 — Pianta medicinale Famiglia Araceae e * droga Acorus calamus L. Sostanza Formula Biblio¬ amara bruta grafia Acorina (6) Rhizoma Calami Liliaceae * Aloe ferox L. Aloina CatHaoOs (6,8) Clerico? (9) Aloe Veratrum album L. Veratramarina Rhizoma Veratri Crocus sativus L. * Iridaceae Picrocrocina Crocus * botanica appartengono all'unità delle Monocotyledoneae. Queste famiglie spermae, Le classe famiglie che seguono, nella divisione Angiospermae, classe Piperaceae Phanarogamae, divisione Angio¬ tabella, appartengono all'unità botanica Phanerogamae, Dicotyledonae. Kavaina Piper methysticum Forst. CuHuOs (10) Radix Kava-Kava Salicaceae Salix spec. div. Urticaceae Humulus Ranunculceae Salicoside CiaHiaO? (6) Umulolo CmHaoOs (11,12) Lupulinum Lupulolo C»Has04 div. Ranunculus Anemonina div. Anemone Protoanemonina lupulus L. (13) (14) CioHsO* (14) CassHseOs (15,16) Herba Anemonis Berberidaceae * Podophyllum peltatum L. Menispermaceae Chondodendron sum Podofillotossina Picropodofillina Podophyllinum (6) Bebeerina tomento- (17) R. P. Radix Pareirae br. Picrotossina CsoHwOi» (18) Jatrorrhiza palmata Lam. Miers. Jatrorrhizina G20H32O7 (6) Radix Colombo Colombamina CaoHaaOe (6) Bergenia crassifolia Moench. Bergenina CuHwOtt (19) Bonducina CaoHsaOs (20) Anamirta cocculus Wight e Arnott. Semen cocculi indici Saxifragaceae Radix Bergeniae Leguminoseae Caesalpina bonducella Flem. Semen Bonducellae Adoperato maggiormente come lassativo. — 6 — Pianta medicinale Famiglia Rntaceae e Sostanza droga amara Evodia rutaecarpa Hook. Cortex Evodiae Cusparia Cortex Biblio¬ grafia Evodina (21) Cusparina (22) rut. H. B. K. Angosturae Galipea officinalis Hancock. Cortex Galipeae Citrus Formula bruta vulgaris Risso, species sub¬ Flavedo Aurantii amari subspecies et Semen Citri Citrus bergamia Risso. Fructus et Auranziamarina (6) (6) (23) Isoesperidina li- (R.) Hoocker. monum Fructus C&H12O5 Esperidina amara Citrus medica Angosturina (6) Limonina Isolimonina C22H27O7 (24) (24) Citrolimonina CaoHaoOg (25) Bergamottina CaiHaaO* (26) Quassina C^tlsoVJc Semen Citri ber¬ gamia Simarubaceae Quassia amara L. Lignum Quassiae Neoquassina Picrasma excelsa Planchon Picrasmina (27) (27) CisHa^Oe (6) (28) Lignum Quassiae Simaruba Simarubina CsiHmOt Cortex Simarubae Simarubeina C82H64O10 Simaba Cedron Cedrina Aubl. amara Planchon (28) (29) Semen Cedronis Ailanthus glandulosa Desf. Flos Ailantina CaeHsoOio (30) Samaderina Gì&HmOh (31) Cortex ailanti et Samadera indica Gartn. Cortex Samaderae Polygalaeeae Polygala Radix amara et Jacq. e P. Polygalae Poligalina (32) Herba amarae Euphorbiaceae Phyllantus niruri L. Fillantina CaoH370s (6) Cortex Cascarillae Cascarillina CisHisO* (6) Aesculus hippocastanum L. Flores, Fructus, Cortex Hip- Aescolina CinHieO» (33) (6) (6) Herba Phyllanti n. Croton eluteria Benn. Hippocastanaceae pocastani Afrodescina Argirescina Famiglia Tiliaceae Pianta medicinale e droga Sostanza Formula Biblio¬ amara bruta grafia Tilia ulmifolia Scop. Tiliadina Flores Tiliae Tìliacina Corchorus capsularis L. Corchoretina C12H18O3 (34) Seselina C14H12O3 (35) Athamantina CatHsoU7 (36) Umbelliferone CsHcOs (37) Angelicina CiiHeOa (38) Ammoresinolo C24H28O8 (37) C21I182O2 Fructus Capsularis Umbelliferae Seseli indicum D. C. e S. Fructus Seseli indici Athamanta oreoselinum L. Herba Oreoselini Ferula spec. div. A sa foetida Angelica arcangelica Radix Herba et L. Angelicae Dorema ammoniacum Don. Ammoniacum Peucedanum officinale Koch Radix Peucedani Peucedanina CisH^Oa (39) Imperatorium ostruthium L. Imperatorina C16XI14O4 (40) Radix Imperatoriae Peucenina CisHieO* (41) Pimpinellina C13H10O5 (42) CisHioOb (42) Heracleum Oleaceae sphondylium L. Radix Heraclei sph. Isopimpinellina Pimpinella saxifraga Pimpinellina Radix Pimpinellae Isopimpinellina Fraxinus excelsior L. Frassina CieHisOio (431 Siringina C17H24O9 (44) Folium Oleaceae off. et Cortex Fraxini Syringa vulgaris L. Llores Syringae vulgaris Ligustrum vulgare L. Folium Siringopicrina (6) Jasmopicrina (6) Ligustri Jasminum odoratissimum L. Flos Jasmini odor. Loganiaceae Strychnos nux vomica L. Semen Strychni Loganina CnHaiOio (45) Pianta medicinale Famiglia Gentianaceae e droga Gentiana lutea L. Sostanza Formula Biblio¬ amara bruta grafia Genziopicrina CieHsoOg Radix Gentianae (46) (49) Gentiana purpurea L. Genziina C25H36O14 (47) Radix Gentianae pur. e altre speci Erythrea centaurium Eritramarina Per- (48) (48) Eritaurina soon Herba Centaurii Genziopicrina Swertia chirata Ham. Chiratina Radix Swertiae eh. Genziopicrina Swertia Swerziamarma perennis Ham. C16H20O9 (49) C10H20O9 (49) (50) (51) Radix Swertiae per. Genziopicrina C101Ì20O9 (49) Chlora perfoliata Wild. Genziopicrina C10H2OUB (49) Menyanthes trifoliata Folium Menyanthìdis Meniantina Ci-iHaeOio (52) Marsdenia Condurango Reichenbach fil. Condurangina OoHeoOie (53) Radix Chlorae perf. Asclepiadaceae Cortex Condurango Vincetoxicum officinale Vincetossina (54) Moench. Radix Vincetoxici Cuscutoideae Verbenaceae Cuscuta europea L. Cuscutina Herba Cuscutae Cuscutalina CisHioOj (55) Verbenalina C171124O10 (56) Clerodina CisHisOs (57) Marrubina CaoHasO* (58) eur. Verbena officinalìs L. Herba Verbenae off. Clerodendron infortunatum L. Lignum Clerodendri Labiatae Marrubium vulgare L. Herba Marrubii Vul. Scrophulariaceae Euphrasia offic. L. Scrophularia spec. (6) div. Herba Scrophul. off. Rubiaceae Cinchona succirubra e altre speci Cortex Cinchonae _ 9 _ Antirrina (6) Cimballarina (6) Chinovina CaoH^sOs (59) Famiglia Cucurbitaeeae Pianta medicinale e Ecballium elaterium Rich. a-Elaterina CasHiaO? (60) grafia P-Elaterina Fructus Ecbtdli Citrullus Formula bruta Biblio¬ amara Sostanza droga colocyntidis P-Elaterina L. Schade. Fructus Colocyntidis Composi tae Achillea millefolium (61) Herba Mille foli Achilleina Achillea moschata Achilleina (62) altre e speci Herba Achill. mosch. Isoalantolattone, Inula helenium L. Diidroisoalanto- CisHaoOs (63,64) Artemisina CisHisO* (65) Artemisia maritima L. Santonina OsHisOa (66) Artemisia absinthii L. Absintina C15H20O4 (6) Herba Absinthii Anabsintina C18II24O4 (6) Radix Helenii lattone, alanto- lattone Artemisia cinae Flos Cinae Berg. Artemisia pontica Willd, A. genipi Weber, A. laxa Lam. Fr., A. glacialis L., etc. Arnica montana L. Arnicina (6) Cnicina (6) Tarassina (6) Flos Arnicae Cnicus benedictus L. Herba Carditi benedicti Taraxacum officin. With. Radix Taraxaci Lactuca virosa L. Lattucina, Herba Lactucae virosae Lactucopicrina Cichorium intybus L. Cicorina Radix Cichor. Intubina Tanacetum off. Tanacetina Herba Tanaceti — 10 — CisHioOs (67) (68,69) CisHieO» (6) 5. Farmacologia degli Prima in 1) di alla passare le che ipotesi, generale. ancora amari descrizione dei state emesse sono singoli amari, voglio spiegare l'azione degli per Seguo qui l'esposizione di Ramms (70). Traube (70) pensa che gli amari aumentino la citare amari pressione sanguigna, favorendo così la secrezione gastrica. 2) Secondo Buchheim tazione 3) di e Hofmeister l'eliminazione dei processi di fermen¬ dell'intestino. contenuto (70) credono che gli amari abbiano il potere di Pohl e amari modificano i del globuli bianchi trattenere i 4) (70) gli putrefazione pareti dell'intestino, aiutando sulle ritenuti peptoni, velenosi, Ludwig crede in un'azione diretta degli per mezzo così dei leucociti. amari sui nervi secretori, che innervano il tessuto glandulare (70). (70) questa ipotesi, può essere riconosciuta soltanto, Traube sia stata dimostrata sperimentalmente sbagliata; poi¬ Secondo Kohler se l'ipotesi di ché secondo Traube l'aumento dell'attività delle tre Ludwig, l'azione secondo ghiandole è indiretta, men¬ è diretta. Moorhead (71) dimostrò coi suoi di Ludwig bolimento sbagliata. generale per mezzo si trovavano in In questi quantità Per esperimenti sui cani, che l'ipotesi eseguire questi esperimenti, provocò un inde¬ di prelevamenti di sangue, così che gli animali inappetenza. agiscono in modo tale che, aumentano sia la Per era uno casi stato di gli amari di acido cloridrico libero nel ottenere della bocca, questo risultato provocando gli gusto un amaro attraverso riflesso, un è quindi vengono Se gli amari vengono mali sani, provocano solo un'esperienza digitale agisce Si tratta di menti: la piretici influenzano ministrati all'uomo parole l'organo la ammalato come l'acidità totale. però agire sulle mucose stomaco causa si ottiene non per cui le ghiandole nessun dello risul¬ stomaco, in funzione. messe sperimentati introducendoli nella bocca di un piccolo che si è aumento secretorio già potuta nello constatare con stomaco gli temperatura dell'uomo normale, i diuretici solo ani¬ (73). altri medica¬ poco sulla circolazione dell'uomo sano, poco la sano gastrico, amaro. Se introdotti direttamente nello tato; il gusto succo amari devono diuresi: anti¬ som¬ piccola poche reagisce più energicamente ai medicamenti del- provocano — 11 — una in l'organo sano. Gli esperimenti riguardanti risultati; peristaltici i movimenti (72) sembra che nei cani secondo Heubner hanno dato buoni piccole quantità di amari facilitino il passaggio del contenuto dello stomaco nell'intestino tenue, grande quantità agisce in modo contrario. Conteggi di corpuscoli sanguigni eseguiti su persone sane e su persone anemiche, prima e dopo aver ingerito piccole dosi di sostanze amare, hanno dimostrato che una piccola quantità di amari introdotti nella bocca provocano nei due casi un'aumento sia dei globuli bianchi che dei globuli mentre una (73) rossi. Osservazioni Giova considerare che questi risultati, che talvolta si contradicono, rittura con estratti nel loro valore farmacologico, sostanze pure amare terapeutico 6. Uso delle sia nel loro valore prima di poter piante formulare contenenti sostanze di dispepsia, in caso piante giudizio sicuro sul valore amare. medicinali contenenti sostanze dove l'attività motrice di anemie e amare giova in caso secretoria dello stomaco è diminuita; di convalescenza e dopo malattie che indeboliscono lo generale. Le indicazioni cliniche pressione e amari sono: mancanza in sono quindi adoperati è molte volte la generale L'indebolimento casi, poiché degli d'appetito, op¬ stitichezza. attività dello stomaco, gli grado di direttamente Suddivisione degli causa di una insufficiente amari vengono usati in modo efficace in migliorare combinati o anemie. 7. un clinico, attendendosi alle terapeutico L'uso delle stato sono maggior parte dei casi con sostanze non pure o addi¬ di droghe. Occorrerà quindi controllare questi dati, sia stati ottenuti nella amari Esistono quattro categorie di amari. — 12 — la digestione, con possono questi essere ferro per combattere le 1) Gli amari puri: Per tina), l'erba di 2) sostanza centauro Gli amari aromatici: amare di foglie le esempio: piante medicinali sono tuito soltanto dalla dalle o il cui fibrino trifoglio (sostanza (sostanza amara: genziopicrina). amara: delle stesse. esempio : l'erba di assenzio maggiore, e la scorza Gli amari mucilaginosi: sono piante medicinali che amare, contengono anche sostanze mucilaginose. di arancio Per Gli amari acri: piante medicinali, sono contengono olii essenziali 8. Gusto e amaro; conoscere amaro in merito poco Dolce, acido, salato, l'uomo, hanno maggior parte delle costituzione chimica processi e fisico chimici che sperimentali molti lavori si più facilmente il dolce e mettere in relazione l'amaro. di gusto: amaro. 9.000 cellule gustative, che si contano ben determinate della nel¬ lingua; parti specifica per i quattro tipi di gusto. Così si spiega quattro gusti si percepiscono nelle differenti parti della lingua. esse sensibilità il fatto che i Gusto non si trovano distribuite in una tra (74). acido si possono e distinguono quattro speci La siano i nonostante ma la costituzione chimica, che Si piccante. rapporto un quindi quali (74); ancora Il gusto salato con amare costituzione destano il gusto può dire sostanze zenzero. Interessante sarebbe stabilire gusto che oltre alle gusto molto con il rizoma di esempio: Per amaro. oltre alle sostanze il lichene islandico. esempio: Per 4) menian- piante medicinali, che oltre alle sostanze essenziali, che aumentano l'azione farma¬ sono contegono anche olii cologica 3) attivo è costi¬ principio sostanze amare. amaro. Il gusto amaro si trova nelle Nel campo dei sali anorganici, si passa dal gusto salato all'amaro. Cohn stabilisce simili relazioni nel campo delle sostanze amare. svariate classi di sostanze. più con (75) Spesso — 13 l'aumentare del peso molecolare, tra il gusto dolce così — e il gusto amaro gli omologhi superiori delle dolci sostanze amare, per sono La valerobetaina Pacido e aminopentadecilico la è esempio: caprobetaina La costituzione chimica di molte natura, pon è La ancora sono dolci, mentre la betaina del- (76). amaro sostanze amare, che si trovano in conosciuta. più parte però sembra di lattone, terpene carattere avere simili o alla naftalina. Curioso è il fatto che molti amari in soluzione alcalina loro gusto amaro; poiché sembra che il gusto in queste condizioni perdono il anello lattonico si apre, un dipenda dall'esistenza dello stesso. Se consideriamo l'intensità con la quale i quattro gusti vengono per¬ cepiti, troviamo che il gusto amaro è di gran lunga il meglio sentito, come si vede dai seguenti quattro esempi. amaro Gusto salato : il cloruro di sodio lascia 1 zione : Gusto acido: l'acido idroclorico lascia luizione 1 : Gusto dolce: la saccarina lascia : 100 000. 1 : 4 500 000. Gusto amaro: la brucina lascia Chimica delle La prive sostanze maggior parte delle di azoto, hanno rale e se sono sono sotto petrolio La prova una di¬ gusto dolce in una diluizione in una diluizione gusto sostanze amaro contengono amare reazione neutra, forma di glucosidi, e sono incolori e in si ossigeno e ottenere allo sciolgono nell'acqua. cloroformio, sono però e sono all'aria facil¬ stato cri¬ In gene¬ poco solubili facilmente il carbone le assorbe. biologica gustativa gustativo, ancora ancora è in minare la concentrazione delle loro metodo una amare molto solubili in alcool nell'etere di gusto acido in ancora Sono anche molto difficili da mente si trasformano. stallino dilui¬ una 50 000. 1 9. gusto salato in ancora 5 000. generale soluzioni; introdotto da Wasicky mativamente il contenuto in sostanza — 14 (77), amara. — il solo metodo per deter¬ nonostante si ciò con questo può calcolare approssi¬ 10. Tabella di alcune esse a delle classi chimiche a cui appartengono La tabella seguente miche sostanze amare e cui le sostanze Sostanza amara serve amare a dare un'idea della varietà delle classi chi¬ appartengono. Classe chimica Formula bruta Piceina CuHmOt Coniferina CioHaaOg Siringina CkHbiOb Umulolo CaiHsoOs Lupulolo CasHasO* Podofillotossina C23H23O6 Picropodofillìna CsaHaaOs (6) Alcool aromatico (6) (44) (12,12) Phenilchetone (13) (6) Derivati della (15,16) tetraidronaftalina Alantolattone (64) Isoalantolattone CisHaoOa Limonina C32H27O7 Derivati della 1,2,5-tri Isolimonina C22H27O7 metilnaphtalina Colombamina CajHaaOe Elaterina CsMliasO? Santonina CiisHisOa Artemisina CisHisO* (24) (6) 1,4 dimetil-naftalina (60) (66) Sesquiterpeni (65) (6) Picrocrocina CieHaeOi Picrotossina CsoHwOia Aloina CaoHaoOs Ossimetilantrachi- Barbaloina CaoHigOs nonglucosidi Terpeni (18 ) (6,8) (8) (6) Acorina Genzjopicrina Bibliografia (49) CieHaoOs (6) Tiliacina Glucosidi ni diversi agluco- (43) Frassina CieHisOlo Condurangina C»HeoOi6 Loganina Ci7H»Oii) (45) Meniantina CitHjbOw (52) — 15 — con (53) 11. Altre 1) sostanze Sostanze amare che oltre alla loro azione amare anche gono usate Tre caratteristici come amari più tengono la strichnina hanno netta azione secrezione propriamente caratteristica di questo alcaloide è eupeptica, come un sapore fortemente amaro, esercitano una gli amari, provocando un'aumento della tutti gastrica. La chinina: altro alcaloide che viene E' quella preparati galenici che con¬ centrale. Le soluzioni ed i nervoso ven¬ detti. esempi: La strichnina: l'azione sul sistema farmacologica specifica, sostanza una che un'azione come amaro. come gli amari, agisce tutti possiede an¬ la chinina presa per bocca nei suoi pre¬ antipiretica; però parati galenici, usato molto efficace per combattere la malaria, come eupeptico. Ciò giustifica la presenza della chinina in stomachici e aperitivi. frangulaemodina Antrachinoni: la reoemodina, la che esercitano un'azione prettamente Oltre all'azione azione eupeptica queste sostanze 2) Sostanze purgativa, negli aperitivi, amare sostanze » giustifica una la presenza di liquori. farmacologica propria specifica, però adoperate gli alcaloidi troviamo: Tra i sono quadro farmacogiloco Ciò che amaro. Bitter come La brucina, la narcotina, e che non amari. l'atropina ecc. glucosidi: Tutti i differenti della Tra « azione con vengono Tra fa parte del loro dovuta al sapore ecc. purgativa. gli digitale. antibiotici: la chloromicetina possiede un gusto molto amaro. A) DESCRIZIONE GENERALE DELLE CINQUE DROGHE. In questo capitolo sizione chimica Per una vata a) quel diamo la descrizione delle farmacologia. riguarda le sostanze droghe, la loro compo¬ la loro che descrizione alla e più vasta cromatografia delle su amare singole droghe carta. Herba Absinthii a') Definizione della Pharm. Helv. — V 16 — in esse contenute, daremo nella parte introduttiva riser¬ Le foglie sinthium L. essiccate le sommità fiorite e degli steli dell'Artemisia Ab- (Compositae). In commercio esiste in tre forme: droga composta droga composta droga composta La La La b') Composizione soltanto dalle foglie. soltanto dalle sommità dalle foglie e l'anabsintina, che e Olio essenziale : nelle due sostanze si trovano diffuse in tutta la nei caratteristici speciale fiorite. chimica L'erba di Assenzio maggiore contiene tina fiorite. dalle sommità peli che si pianta, ma in modo forma di T. a trova ghiandole epidermiche, l'absin- amare, « immagazzinato » per la maggior parte in canali secretori diffusi in tutta la pianta. Thujolo (libero o esterificato) in quantità del 25 % Thujone (un chetone che si trova anche nella Salvia e nel e Esso è composto dal al 70 % dal e Tanaceto). Accanto e') Farmacologia La sostanza presenta la l'assenzio queste a e uso attiva maggiore; terpeni sesquiterpeni. e terapeutico. è Vabsintina. Nel principale delle somma si trovano sostanze sostanze più amare fu farmacologicamente o presente capitolo rap¬ pure contenute nel¬ meno studiata sperimentata e da Roux (78). Questi sostiene che non è velenosa. La somministrò a galline in dosi grammi, senza notare alcun effetto nocivo e continuò a sommini¬ strarla in piccole dosi per lungo tempo, senza constatare reazioni secon¬ di due darie nocive, osservò soltanto che Nella medicina ca. a umana 1/4 d'ora prima dei pasti causa del gusto anemie, aneroxie amaro. prima pasti 0,1 0,1 a giorno 0,25 in capsule di gelatina Ottenne buoni risultati in casi di costipazione di convalescenti. Wiesner (79) raccomandò per dei peristaltici. sui movimenti il medicamento due volte al in dosi da estremamente e agiva prescriveva a gli stessi scopi, due o tre volte al giorno 0,2 grammi in capsule di gelatina. Secondo Fawitzki (80) l'absintina, se prima presa poco dei pasti, ha il potere di aumentare la secrezione dell'acido cloridrico. Il valore in altre malattie è nessun valore pratico. Se mintico, i risultati ottenuti ne. Thujolo), e una ancora erano all'artemisina, incerto; come antelmintico volta l'assenzio veniva usato dovuti sicuramente all'olio sostanza — 17 etereo simile alla santonina. — non come ha antel¬ (Thujo¬ (81) ha ordinato Cazin tina, da 30 Azione della farmacologica Uno con speciale droga amari aperitivi, L'intossicazione persone mal nutrite ogni mat¬ totale di cui si fa ecc. a') Definizione droga non merita la mai nei manca uso. più che altro prese scopo a di absintismo. Esso è caratterizzato da nome nervoso centrale, crisi maniache: tale azione è dovuta al Radix Gentianae largo bevande, da tali forte eccitamento del sistema b) importanza pratica, per il fatto che la prodotta voluttuario, ha preso il e a accenno, che ha notevole elevata tossicità dell'assenzio, comuni successo 100 gr di infuso di assenzio. a con Thujolo allucinazioni vertigini, contenuto un nell'olio etereo. della Pharm. Helv. V La radice di Genziana lutea (Gentianaceae - Gentianoideae), raccolta rizoma, liberata dai resti dello stelo in autunno munita del e delle foglie, rapidamente senza preventiva fermentazione, a 50°/60°. La radice di genziana in commercio si presenta tagliata in frammenti più o meno lunghi, irregolari e contorti. essiccata Il colore grigio-giallastro dello stato fresco, si mantiene se droga la prescrizioni della Pharm. Helv. V, o se distrutti prima dell'essiccamento. Se la radice è stata essiccata secondo le menti già sono essiccata invece cata stati dopo questo punto mentazione una viene tinta bruna spesso ricer¬ trovo utile dare una spiegazione alla parola « fer¬ ». La radice di La radice di in secondo Questo fermentata è genziana trice dei fermenti ha processo Composizione quella nella quale l'azione distrut¬ già agito. primo luogo la radice fresca sono già stati distrutti. quale di distruzione dei fermenti nella terminologia della genziana luogo quella non fermentata è in i fermenti nella droghe, conservazione delle b') assume dal compratore. A e fermentazione i fer¬ si chiama stabilizzazione. chimica Glucosidi Fino tenesse tre a un paio di anni fa si credeva, che la radice di glucosidi: — 18 — genziana con¬ La genziopicrina, la genziina Due anni riuscito Korte (82), in orsono dimostrare che la a la e genziamarina genziamarina. scriveva di pubblicazione, una è altro che la non esser genziopicrina impura. Zuccheri Diversi zuccheri fruttosio, xilosio, gentianosio un con gusto isolato allo Olio genziana: glucosio, gentiobiosio (quest'ultimo è uno zucchero e leggermente amaro, Bourquelot cristallino). L'olio etereo si trova nella radice di diffuso in tutti i tessuti, genziana. chimicamente, Brack (84) che lo studiò di colore bruno componenti Altri di e acidi La genziana, Sette anni dalla un e odore penetrante; in un sciolto nell'olio grasso e lo descrive esso un'olio di come isolò dal 15 % al 17 % chetolattone. (85), da una specie più tardi Steinegger fu isolata per la genziana che Weibel (86) riuscirono e sostanza una (C10H12--13O2N) bruta prima e basica con volta in Russia. cresce a non isolarla ancora punto di fu¬ un 161°/162°. La radice di sterina, sostanze Col nome meno da notarsi contiene inoltre la genziana mucilaginose, Farmacologia 0 di essi isolarono anche genziana lutea; sione (Ci0H9O2N), alcaloide un conosciuta dalla formola più (83) l'hanno componenti da Proskurnina e') HÉRISSEY e stato etereo contenuto un di contenuti nella radice sono di ed uso gentisina genzianina gli che questa loide isolato dalla radice di autori di una volta intendevano non della radice di è da confondersi colla amari in un estratto genziana; genzianina, è alca¬ genziana. A questo punto conviene ricordare ciò che ho farmacologia degli questi risultati sono estratti di droghe. colorante, fito- terapeutico puro contenente le sostanze amare quindi un (invertina, emulsina, ossidasi). frementi generale, stati ottenuti con — a pagina già detto, parlando della 15. Giova considerare che sostanze non 19 — pure o addirittura con Bradsley (87) somministrava la diversi disturbi genzianina La il venne sperimentarla a constatò che la Egli malarica, adoperata in questo Azione nei sia sotto forma di digestione lenta, anche in nuovo genzianina poteva la somministrò e pillole, 30) che di sciroppo (88). : genzianina primo forma di digestivi. Magendie la ordinava in casi di goccie (0,3 sotto farmacologica della uso droga di febbre intermittente; terapeutico fu Konings (89). sostituire la chinina forma di sotto caso nella febbre capsule. totale osservato che la radice di genziana, somministrata infuso, combatte efficacemente la malaria, come pure le ma¬ Chabasse (90) ha forma di sotto nifestazioni iniziali, malesseri attacchi febbrili, che leggeri, ralmente la malattia stessa. In tali casi la febbre Era dell'opinione che la radice di periodo di convalescenza tati anche nel Ordinò anche (15 vino + 1000), prescrivendo tonificante del sistema come Oggi la radice di bricazione di l'olio tintura di una etereo. le sostanze un genziana genziana avrebbe dato dopo bicchierino da gialla. la fece diluire e due volte al una a e come mezzo gene¬ buoni risul¬ attacchi di febbre genziana (1+4), nervoso precedono si manifesta neppure. non con giorno, per attivare il ricambio. è molto usata nelle distillerie per la fab¬ spiritosi; però come sostanza attiva, in essi si trova solo Quasi tutti gli aperitivi a base di genziana contengono anche amare. e) Herba Centaurii a') Definizione La parte della Pharm. Helv. V essiccata del Centaurium umbellatum Gilbert aerea Centaurium Persoon) In commercio la (Gentianaceae droga - (Erytraea Gentianoideae). esiste in due forme: 1) La droga completa, che comprende le parti aeree, come lo esige la Pharm. Helv. V. 2) La b') droga composta Composizione soltanto dalle sotto le senza foglie. chimica L'erba di centauro contiene rina, che parti fiorite, un glucoside con l'influsso dell'emulsina, si scinde in — 20 — gusto una amaro, sostanza l'eritau- isolata da Méhu (93), l'eritrocentaurina, Altri Farmacologia come gli riusciti sono a genziana; inoltre isolare la sono genzianina, ancora contenuti terapeutico uso amari in e le proprietà generale; terapeutici, che ho già adoperata nella medicina popo¬ e è molto gli usi amaro-tonico. Menyanthidis Folium a') Definizione della Pharm. Helv. V essiccata di foglia thoideae). La la e stomachico dì Composizione Le nella radice di pianta valgono Per questa b') genziopicrina. zuccheri. e descritto per Bankowskij (94) e contenuto cere, resine lare, di¬ componenti Feofilaktow alcaloide e') glucosio. Ultimamente Korte (82) ha e l'identità dell'eritaurina colla mostrato foglie Menyanthes trifoliata L. chimica di trifolio Sbrino contengono meniantina, che (Gentianaceae-Menyan- sotto un glicoside con gusto amaro, l'influsso dell'emulsione si scinde in meniantolo e glucosio. Altri componenti Steinegger stessa sostanza c'| e Weibel nella radice di tenuto e uso trifoglio fibrino anni nella medicina amaro, e le è una coliche; e sostanza con carattere con¬ basico; la pianta medicinale già impiegata da (95) questa pianta è anche molti viene somministrato sotto forma di infuso. un sostanza agiscono sul simpatico. — serve per combattere l'enterite, antiscorbutico. Cazin (81) la cita tonico, febbrifugo, antiscorbutico Secondo Junkmann (96) la brino una terapeutico popolare Secondo LÉMERY l'idropisia e già isolata dalla radice di genziana. Farmacologia Il (86) hanno isolato la genzianina, alcaloide genziana, 21 — e come emenagogo. amara contenuta nel trifolio fi¬ e) Flavedo Arantii amari a') Definizione della Pharm. Helv. periferico Lo strato staccato in tium L. un subsp. nastro amara In commercio la a V libero in gran parte dal sottostante spirale tessuto bianco, dal frutto fresco maturo del Citrus Auron- (Citrus vulgaris Risso) (Rutaceae-Aurantioideae). L. droga si trova lo richiede la Pharm. Helv. V, o forma di nastri sotto oppure spirale, a in forma di striscie più o come meno sottili. b') chimica Composizione Sostanze amare: la corteccia di arancio (91), l'esperidina marina germente e l'isoesperidina; Olio leg¬ gusto con e studiata da Dehn (92) che riconobbe ne etereo glandule oleifere; Esso è contenuto nelle ca. contiene l'auranzia- amaro. L'esperidina è stata isolata suo carattere glucosidico. il amaro due sostanze 90 %-97 %, linalolo si compone di 1,3 %-2,7 %, piccole quantità ca. di d-limonene terpineolo e di aldeide decilica. e') Farmacologia Forse accenni e uso terapeutico perchè l'azione amara di questa droga reperibili nella bibliografia. Con le buccie di arancio roppo e pochi amaro si prepara l'estratto fluido, lo sci¬ la tintura. L'estratto fluido alla preparazione vino di boldo, il preparazioni E' molto e è molto debole solo sono serve a preparare l'elisir di china di alcuni vini medicati, vino con terapia nell'industria per la 22 cascara la tintura serve condurango, il sagrada. Queste eupeptici. preparazione di aperitivi, come liquori. — e il vino al rabarbaro, il vino alla vengono usate in usato come — « Bitter » SPECIALE PARTE CROMATOGRAFICI IN METODI PARTICOLARE MODO CROMATOGRAFIA SU CARTA Isolazione e cromatografia Considerazioni generali sulla delle sostanze amare: cromatografia Fra i numerosi metodi di analisi per la apprezzato, della ai cromatografia ripartizone. primi lavori del biologo Tswett. Dall'analisi (98) CoNSDEN una e capillare molti altri e realizzazione foglio di carta separare da quali Runge, Freundlich, metodo moderno di al geniale trovata, ne permettono semplice, sostituendo alla colonna e da filtro. quel metodo che permette di componenti, basandosi sulla differenza in un sistema a due fasi liquide, una è inteso di solubilità delle diverse sostanze, delle recente si possono far risalire di giunti è è molto una pratica miscela i diversi una si con partizione cromatografica Per origini lavori ricercatori, estremamente sue dai (97), (99), che collaboratori a disposizione degli studiosi elegante realizzazione, quello Le di Trey un ed rapidità sua carta. su è mobile l'altra è fissa ad e un supporto che, nel nostro caso, è la cellulosa della carta. Da un quale, della foglio con contenente Per carta da filtro si ricava carta opportuni accorgimenti, delle sostanze da piente di analizzare, e estremità una piccola quantità una questa estremità è fatta pescare in un reci¬ dato solvente. un capillarità e striscia ad una viene posta per forza di sopra la miscela applicata, gravitazione, il solvente trascinando nel passa lungo la cammino le diverse suo sostanze. si Ora poiché le sostanze vengono dispongono lungo tutta la striscia; tamente occuperà così un dalla carta velocità differenti, viaggiato più esse len¬ occupato da un'altra, quello maggiore cammino. partizione delle l'acqua trattenuta avviene in base ai coefficienti di Questa separazione sostanze, a posto differente da che ha percorso nello stesso tempo, tra trascinate la sostanza che ha il solvente che passa la carta attraverso e stessa. Conseguentemente nell'acqua più è logico dedurre, sarà lento il suo che spostamento, — 23 — più una mentre sostanza le sostanze è solubile più lipofili più lontano. trascinate saranno La distanza percorsa da da differenti dipende sostanza una fattori, principalmente : a) dal coefficiente di ripartizione a; b) dal volume di acqua dalla trattenuto e) dal volume del solvente da rata quel dal coefficiente di Se le condizioni sperimentali il comportamento di mero che superficie superficie; della il volume del solvente e identificarla dalla caso la mantenute è praticamente della posizione incolore, sua macchia sia sua sono la pra¬ è l'unità variabile che ripartizione. sono sostanza una carta rigorosamente uguali, costante risulta così e macchia. come avviene nel maggior sua posizione viene rilevata per mezzo di reazioni opportuni reattivi, che visibilizzano la macchia colorandola, delle volte, la con irro¬ carta sperimentali corrispondenti, costanti, la distanza percorsa sulla dipende appunto Nel condizioni di acqua trattenuta dalla carta ticamente possibile per unità di per unità di solvente. Tenendo presente che, in quantità carta nu¬ chimi¬ o con altri mezzi. Il coefficiente di sostanza in la grammi in sciolta in posizione della zone Consden e esiste che è il rapporto tra la quindi quantità di la quantità costante fisica da cui dipende a, e la disposizione reciproca mi. della fase stazionaria un sulla sostanza a, mobile, è per mi. della fase grammi delle varie ripartizione carta. una Fra e relazione. una (99) hanno stabilito che il coefficiente di collaboratori riparazione: A, a uguale gramma, za e Rf è la sostanza Dj As Quindi misurata dal le sostanze A Rf che che caratterizza ogni costante percorsa dal solvente dei loro in cui al rapporto dei valori della fase solvente ed acqua nel Per determinarla basta dalla 1) Rf As è A, 1 ( = sono e conoscere centro del sostanza. la distanza d percorsa due valori: suo punto di partenza e la distan¬ fase mobile dall'ordine al fronte finale. o B sono caratterizzate e individuate per rispettivamente: d, d, Rf (A) cromato¬ R, (B) = — 24 — = mezzo Per poter calcolare il valore R( è necessario che il flusso del solvente prima venga arrestato che il fronte tocchi l'estremità della striscia della carta. Una volta Per noto maggiore Rt si può calcolare il valore del coefficiente esattezza sicurezza, e nei incerti, si casi a. possono ese¬ guire dei controlli per convalidare i dati trovati. Il cromatogramma del confrontato con miscuglio da ottenuto uno pure che si presumono essere cromatogramma deve essere delle sostanze in esame, miscela una può essere analoga prima. Naturalmente il secondo nella presenti fatta fatto in condizioni con sostanze sperimentali uguali i e valori ottenuti devono coincidere. Per messe una sicurezza sullo stesso ancora le maggiore di carta che il foglio sostanze miscuglio Diversi fattori possono influenzare lo la temperatura, la qualità della il carta pure possono delle sostanze in sviluppo pH ecc. di un esser esame. cromatogramma; Analisi quantitativa Molto più complessa della separazione qualitativa, si presenta la de¬ quantitativa delle sostanze presenti nella miscela cromatografata (100). terminazione Un'idea approssimativamente quantitativa vando l'intesità quella colorazione lavorando soluzione in rivelare la una guida, esame delle posizione determinazione al secondo non confusioni, L'attenzione e una uno macchie, ci essere e ricavata la sua certa da con si può osser¬ confrontandola una l'appropriato con soluzione stessa reattivo per servire dell'altro per effet¬ quantitativa. Il primo cromatogramma servirà da trattato col primo. Le reattivo, si ritagliano le porzioni e zone corrispon¬ di carta, numerate per evitare su le soluzioni così ottenute si microdosaggi (103). degli area studiosi si è pure fermata sulla estensione della è stata misurata strato infatti che esiste di può macchie condizioni vengono eluite separatamente, possono effettuare macchia in spruzzandone e denti alle macchie del della delle ottenuta, identiche, campoine (101, 102). Sviluppando due cromatogrammi della tarata tuare della sostanza sostanza stessa e una il con un planimetro. E' stato dimo¬ correlazione lineare tra l'area della macchia logaritmo della concentrazione della soluzione (104-105). — 25 — Facendo passare le macchie di luminosa del 5 al 15 errore con un 1) Scopo bile di ricerche sulle trovare ricavare un sorgente una quantitativo hanno lo scopo di fare nelle contenute Soltanto per l'erba di assenzio droghe maggiore degli che tratto, metolo per la loro determinazione un tra dato cromatografiche cromatografiche sostanze cromatogramma può % (106). di queste ricerche Queste preliminari un cellula fotoelettrica si una e studi possi¬ se quantitativa. riuscito sono e a studiare un quantitativamente le sostanze amare in essa contenute e a determinare approssimativamente la quantità per mezzo della cromatografia su carta. Questo metodo verrà descritto nei suoi partico¬ micrometodo, isolare per lari trattando dell'erba di assenzio. 2) Metodo pratico Con la frase per « sviluppare sviluppare dimento di far passare per conseguente trascinamento un cromatogramma un cromatogramma capillarità direzione del flusso della fase mobile. Ora fatta all'aria avvenire il normale andamento E' inutilizzabili. l'inevitabile e che ciò di vetro di adatte dimensioni vaschetta contenente il sostegno di Per saturare di altererebbe dati di satura lunghe carta lo si quanto il per la consistente in una d'aria entro cui si trova tenuta sviluppatore, sospesa ad un'apposito si versa usa camera generalmente direttamente ove acqua avviene lo svi¬ del sol¬ formando uno costante. Dai saturata nell'apparecchio cm. un Duprante di solvente un'apparecchio con di vapori l'atmosfera della che si impiegato strato nose stesso, un'atmosfera in la del solvente è corsa avrebbero alla fine dei si con lungo sostanze vetro. del cromatogramma, luppo fogli questa avvenga Ciò è facilmente ottenibile usando camera vente proce¬ del solvente. vapori una se delle o evaporazione dello di conseguenza necessario il il solvente attraverso la carta dislocazione della e s'intende », corsa sviluppo è ricavano foglio, indispensabile delle evitando striscie, in temperatura generale larghe 10 cm e slabbrature che possono risultare dan¬ del solvente. — una 26 — A sette distanza, che dipende dall'apparecchio una da cm lunghezza, pipetta leggera riga. una un La estremità, si traccia una di poco Su questa che e solito è di di matita, perpendicolarmente alla verrà posto riga con una micro- da analizzare. liquido soluzione da analizzare si macchia rotonda una a applica generalmente (ugualmente intervallata a 3 ca. forma sotto di di distanza cm. dall'altra). l'una assolutamente necessario che il E' Deposta utile di la liquido occupi in quantità procede all'evaporazione del liquido che può sostanza il minimo spazio. nel punto voluto, si esame effettuata essere con aria calda. Così striscia operando viene La striscia a si le ottengono strisce pronte matita deve venire porsi a Indi si aspetta che la carta assorba la Con tore, e caso una per La di quantità a e non sopra. necessario. La vapori solvente, e verrà quindi caso. pipetta s'introduce poi si chiude il sostegno sotto durata di questa climatizzazione varia da solvente indicata sviluppo. lo per posta nella vaschetta. ora nella vaschetta il solvente sviluppa¬ l'apparecchio. Si lascia che la fase mobile faccia la sua lungo la striscia, corsa così il cromatogramma, fino a qualche cm. dalla estremità opposta. Si apre allora l'apparecchio, si toglie la vaschetta con le striscie sviluppando e, prima che il solvente abbia tempo di matita il punto che ha raggiunto (fronte Le striscie vengono fatte o di evaporare, si segna del all'aria seccare con un tratto solvente). a temperatura d'ambiente in stufa. II cromatogramma mento con lizzatore sviluppato seccato e opportuno reattivo scelto viene per caso ora caso, sottoposto al e un comune tratta¬ nebu¬ benissimo allo scopo. serve La carta, uniformemente inumidita, viene lasciata asciugare in stufa o a temperatura d'ambiente a seconda dei casi, così si rivelano le macchie variamente colorate delle sostanze e si procede Un elemento di identificazione oltre la velocità scono con e certe cui le macchie si colorano: subito anche riscaldamento a un a al loro riconoscimento. sfumature di tinta, è pure infatti alcune bassa temperatura, mentre per altre tempo più lungo per vederle apparire. — 27 — sostanze occorre reagi¬ maggior Come mezzo pada ai determinare la per fluorescenza una esposti se di mercurio vapori delle sostanze che danno posizione U. V., ci si raggi ai può servire di lam¬ una (caso tipico la chinina). Fase mobile 3| La risoluzione analizzare delle cromatografica solubilità nenti che formano la fase mobile. I solventi nici poco o miscibili non con in contenuto amaro, foglie sostanze contengono diversi compo¬ quelli sono orga¬ di usati, purché il loro venire troppo elevato. La radice di genziana, risulti non acqua l'erba di centauro, le preferibili da miscela una relative dei acqua. miscibili possono Quelli completamente in sostanze differenti dipende dalle trifoglio fibrino, la corteccia di arancio e attive relativamente solubili in acqua. E' quindi spiegabile, come i tentativi di cromatografia con benzolo, di etile e miscugli di essi, non abbiano dato buoni risultati. Gli esperimenti cromatografici sulla radice di genziana, sulle foglie etere e acetato di sull'erba di centauro, trifoglio fibrino, vennero eseguiti concentrato Questa acqua nel rapporto del solvente saturata della durata di Per i miei ho pure usato Queste presentano L'etere con agitata in 1 : fasi mobili abbastanza saturata imbuto acqua servirà per lo sulla radice di solvente butanolo come di arancio amaro Bunatolo, acido acetico 5). : un scorza si lascia agitatore; dei due sviluppo strati; e ripo¬ la parte del cromatogramma ore. esperimenti due (4 sulla e mobile: completa separazione a 18 ca. fase seguente miscela viene miscuglio fino il sare e la con hanno rotonde con acqua dato ben e genziana saturato buoni separate centauro risultati, le macchie l'una adoperato venne l'erba di e acqua. con si dall'altra. per la cromatografia dell'erba di assenzio. 4) Condizioni di Lo vetro sviluppo dei cromatogrammi delle seguenti dimensioni: ghezza sempre sei sviluppo 32 cm; usata la carta venne altezza 55 effettuato in cm, profondità temperatura duarante lo svilupo Whatman N° 1 e 28 era di camera 40 cm, ca. 20°. di lar¬ Fu il tempo di climatizzazione fu di ore. — una — Reattivi 5) Essendo quindi gusto che le sostanze pochi la delle separazione vale sostanze, ritagliato di carta, in ghezza lembo di circa 1 Per rendere ai cm. non ritagliai Lo del nel ogni dalla striscia pezzettini pezzetto nel suo della lun¬ gusto. intensa la colorazione delle macchie nei più trattati coi cromatogrammi lampada circa 2 ed esaminai cm ancora matogrammi già nei largo avendo dal punto dire a di partenza fino al fronte del cromatogramma, ho un non nel modo seguente: procedendo avvenne e primo luogo loro posizione queste sostanze, per determinare la cromatogramma, Dove parte conosciute in ho dovuto servirmi in specifici, reattivi di amaro solo amare reattivi, reattivi, ho fatto coi trattate ancora cro¬ per rendere visibili le macchie come uso della di mercurio. vapori CROMATOGRAFIA DELLE DROGHE SINGOLE A) Radix Gentianae a) Cenni storici I a un primi certo riuscirono nina; colorante stanza sostanza renti, isolare si mai radice Dulk che amara, chiamarono ma della (110), genzia- gentisina, genziana. Ottennero di amorfa massa e gialla la il so¬ giallognola. riuscirono a isolare la nella radice di genziana, in due maniere diffe¬ allo stato cristallino. però (111) riusci una (109) contenuta amara sostanza nella trova forma di Baumert Kromeyer picrina, bibliografia. nella reperibili cristallina massa però della che si sotto tardi che una trattava giallo non ora genziana e che arrivarono Henry Caventou (108). Essi furono e (107) risultato, qual amara Più fin che si occuparono della radice di a non ricerche e ottenne poi a dalla radice cristallizzare e fresca a di genziana riconoscerne la la sua genzionatura glucosidica. Bourquelot genziana, e Tanret (113) più di di genziana. Scoprì la genziamarina e la (112) da 22 kg. di radice fresca di collaboratori ricavarono 250 gr. di genziopicrina tutti si oltre alla pura. occupò di analizzare genziopicrina genziina. — 29 — due nuove a fondo la radice sostanze amare: Y. Asahina, J. Asano (114) studiando la il rono carattere genziopicrina, dimostra¬ intorno alla radice di gen¬ (115) fece diverse pubblicazioni BÉGUIN ne saturo. non ziana, in modo speciale per quel che riguarda i metodi biochimici sulle ricerche degli zuccheri nella Ma soltanto chimica della stessa. Korte recentemente * (49) scoprì la costituzione vera genziopicrina. OH H OH H OH H -CH20H ^ CH 5 r. H ?.' ... H CH„ 7a ^C—. CH 2Ai CH ,'/"\'/ CH, 3-Glucosilossi-2-osso-6-isopropenil-2-7a-diidro-6H-f urano (2,3-b)pirano. Inoltre dimostrò crina che (51), swertiamarina la Cirrca un nome di ancora stata ancora amarogenzina Estrazione e 180°, i gusto della in ancora gusto * la cui ottenere la e 1/10 nuova sostanza la (93), la genziopi¬ sostanza che composizione amara, possiede chimica un non dalla perde la sua amarezza e : 58.000.000; la genzio¬ n, in amaro genziopicrina tempo da Bourquelot suo una (116), diluizione una L'estrazione di questa sostanza è che per e sciolta in NaOH amaro picrina invece, lascia a con studiata). L'amarogenzina, lascia isolare riuscì ad dopo anno punto di fusione tra i 178° b) identificano si (82). che chiamò col è (50), l'eritaurina (113), genziamarina chiratina la 1 una radice legata diluizione 1 : 15.000. fresca di genziana grandi difficoltà già descritte collaboratori (112). Korte (49) scrive genziopicrina pura è a necessario partire dalla droga Uno speciale ringraziamento vada al Sig. Dr. Korte per l'invio di campioni delle amare da lui isolate. sostanze — 30 — fresca, poiché Scrive 10 ho metodo se tentativi suoi anche zione subito rare i di dalla genziopicrina la estrarre droga fallirono. secca che la radice difficoltà parecchie il secondo proceduto ho e da Korte (49). Per l'estrazione si deve lavo¬ recentemente più rapido possibile, poiché nel modo all'estra¬ sottoposta essere la raccolta. dopo incontrato usato deve fresca genziopicrina, specialmente la accompagnata da impurità, all'aria degenera facilmente assumendo una colorazione bruna. Esecuzione dell'estrazione Subito niente dopo la raccolta 1 kg. di radice fresca da Giesbach, Oberland bernese, viene tagliato in pallone un Si minuti. ad volta La di vetro filtra, uguale di metanolo con solfato di sodio, si sciropposa clorofilla Ho e con dalle altre così ottenuto acqua, ho La ratura. massa di resa bastava, e) non ancora una a serve il tutto da me delUa 5 vuoto sino a genzio¬ con 150 mi di acetato ripetuta 10 volte). etile, si asciuga con in acetato di L'estrazione della soluzione secco. la separare a genziopicrina dalla averlo sciolto in in gr. acetato ambiente e di a di un etile bassa colore libero tempe¬ ottenuta, si presenta sotto forma di colorata in giallo. Da 1 kg. una di radice fresca genziopicrina. Korte ottenne una scopi cromatografici, questa quantità 500 mg. di ca. proceduto Si sciolgono goccia di questa agitato che viene cristallizzare Dato che per i miei Cromatografia e l'accompagnano. impurità prodotto del peso di ca. 2 leggermente ca. nel che ho ottenuto ho tira si e di etile, genziopicrina del 1 % prove¬ %. un lasciato cristallina genziana sottoposto concentrata 80 ca. genziopicrina filtra acetato a (operazione leggermente bruno, che, dopo di a e la buona solubilità della viene filtrato acqua soluzione di poi notare nel metanolo e liquido sciropposo di etile saturato Questa spremuto viene Devo far sciropposa. picrina nell'acqua 11 metanolo con genziana pezzettini, messo bagno maria per 30 in trattamento. soluzione consistenza trattato e residuo viene il e di a una ulteriore estrazione. genziopicrina mgr. soluzione di genziopicrina in 1 corrisponde a ca. 20 — 31 — mi. a di metanolo; una 25 y. Se il cromato- sviluppa gramma si siede valore di un Korte Rf (49) butanolo con Rf = la con con ha mobile fase stessa macchia pos¬ la acqua, ottenuto un valore di 0,39. = acetico (4 acqua e : 1 allora 5), : colla sviluppa Se il cromatogramma si R, saturato 0,43.. fase mobile butanolo, acido macchia la possiede valore il di 0,6. = Janot (117) nei suoi lavori cromatografici sulla genziopicrina, lavo¬ rando colla ha ottenuto stessa un fase mobile, butanolo, acido acetico Rf valore di d) Reattivi per la a') Reattivo alia benzidina =: e (118). 0,5 gr. conc Etanolo assoluto sulla 125), genziopicrina Acido acetico reattivo : 0,56. Benzidina Questo (4 acqua venne già adoperato 20,0 » 80,0 » (117) nei suoi lavori da Janot genziopicrina. Il cromatogramma si tratta col reattivo usando zatore e si fa essiccare in stufa alla temperatura di La benzidina con la genziopicrina prende una un ca. comune nebuliz¬ 105°. colorazione di un rosso bruno. b') Reattivo al naftoresorcinolo (119) Si prepara una sciolgono soluzione al naftoresorcinolo al 0,2 prima dell'uso si mescolano le due soluzioni In seguito il cromatogramma si nebulizzatore; lo si fa essiccare temperatura di 100° a tratta a volumi distillata; poi uguali. Col reattivo usando parzialmente, poi si un comune lo si pone in stufa alla 105°. Il cromatogramma così trattato presenta una macchia ai osservata sotto — 32 — gialla molto di mercurio. una lampada se vapori Questo reattivo venne già adoperato da Janot (117) cromatografici sulla genziopicrina. intensa in etanolo ; c/c 2 gr. di acido tricloracetico in 100 gr. di acqua nei suoi lavori e') Reattivo al cloruro di tetrazolio usò (49) nei suoi lavori cromatografici sulla genziopicrina Korte questo reattivo. Si mescolano parti uguali butanolo tetrazolio in di saturato una soluzione del 0,2 acqua con Si riscalda la carta così tratta in acqueo e) 20 minuti ha Estrazione delle di 100 gr. polvere secca da Messmer di di con vapore rosso oscura, secca di genziana genziana ho proceduto secondo di (120). di etile acetato macchia una dalla radice sostanze amare adoperato Con 500 mi. come la massima intensità della colorazione. raggiunto Per l'estrazione della radice il metodo ambiente saturato un 80°, la genziopicrina si rivela a dopo idrato di di normale in metanolo. potassio e di cloruro di fo soluzione una e saturato al genziana passata con si acqua estraggono della Pharm. No V. setaccio Helv. V. Si amare adopera della avviene in operazione a acetato radice di riflusso, a bagno Poi si filtra, e di etile perchè è un buon solvente per le sostanze genziana e non scioglie troppe impurità. Questa 30 minuti in un pallone di vetro con refrigerante maria. il residuo viene sottoposto questa volta operazione, però con acqua. 11 filtrato viene lasciato attraverso ratura non un L'estratto così ottenuto contiene nare secco. e Questo serve di radice per aggiunge si e volta alla stessa schiarimento, poi a distillato nel ancora grassi 10 gr. di bolus alba estratto contiene le secca mie di colore bruno, delle f) una e vuoto ad con versato una tempe¬ gentisina. Per elimi¬ queste impurità, lo si scioglie in 150 mi. di acqua calda; lo si lascia raffreddare, e fino depositare palloned i vetro, 50 gradi. ai superiore filtro in ancora 250 mi. di acetato di etile saturato analisi genziana colla la si e filtra, poi si tira della radice di amare cromatografìa ho ottenuto 2,3 su di gr. carta. un Da a genziana 100 miscuglio, gr. di un sostanze amare in essa contenute. Cromatografia dell'estratto Per le sostanze cromatografia ottenuto della radice dalla radice secca di secca genziana, di genziana si sciolgono 100 mgr. dell'estratto sopra ottenuto in 5 mi. di metanolo. Per ottenere delle macchie sufficientemente — 33 — grandi bastano due o tre di gocce questa soluzione, versate con una pipetta del contenuto totale butanolo acido di 1 mi. Il ai solvente La visibili prima la terza ha fluorescenza blu chiara; la seconda possiede fluorescenza una ultima macchia si presenta Tutta la striscia ca. lo possiede stesso possiede ne leggermente giallognola; quest'a 2 sulla cm. gusto molto un valore di Rf Il cromatogramma stesse la separa¬ avvenuta alcuno. La terza macchia ha le è a pezzettini, e ogni singolo pezzetino Dopo questo esame si giunge alla conclu¬ possiede un gusto amaro, la terza macchia più forte della seconda, mentre la prima La seconda macchia ha senta quale tagliata gusto. suo che la seconda macchia sione: non larga fluorescenza una po' allungata. un viene viene analizzato nel ed esposto viene ai tre una zione delle sostanze mobile (4:1:5), asciugato vapori di mercurio. Per tutto il percorso del macchie, che vengono poi segnate a matita. lampada una sono fase la con acqua nel rapporto e conc. raggi di blu; sviluppato cromatogramma, acetico macchie un valore di sviluppato con Rf = 0,8 = 0,6 ca. ca. butanolo saturato La seconda macchia però possiede un valore di Rf 0,7 ca. possiede un valore di Rf La terza macchia Se si trattano con acqua = 0,4 ca. = gli stessi cromatogrammi coi genziopi- la reattivi per crina, la seconda macchia presenta le colorazioni tipiche della una tinta però non 0,8, seconda della fase Korte g) mobile, è data Estrazione delle L'estratto sostanze ottenuto Cromatografia è di ai Rf rispettivamente 0,7 dall''amarogenzina già e isolata da il un che per colore molto sviluppato sia con butanolo acido acetico miscuglio raggi di una lampada ai vapori di — fresca di genziana dalla radice amare dell'estratto della radice Il cromatogramma con di (116). procede nello stesso modo partendo però dalla droga concisa. sia il valore di possiede Si h) stessa così chiara. La terza macchia che a pre¬ la stessa fluorescenza. con la radice più di secca chiaro. fresca di genziana. butanolo saturato conc. e acqua, se con viene mercurio presenta le stesse 34 — genziana, acqua, esposto macchie, però con fluorescenza una l'estratto della radice Se gli si coi trattano ottenute reattivi con genzio- la per dalla colorazioni identiche date la seconda macchia presenta le picrina, quelle di genziana. cromatogrammi stessi più debole molto di secca genziopicrina. Osservazioni Dai cromatogrammi fin ai di mercurio, si vapori ottenuti, esposti ai raggi di ora può che constatare una lampada l'estratto è puro, più meno la fluorescenza delle macchie è intensa. Infatti il cromatogramma genziana, se delle macchie senta raggi ai una secca di vapori di mercurio, pre¬ con l'estratto della radice fluorescenza. gera Da ciò si la dall'estratto della radice ottenuto di lampada fluorescenza molto intensa; quello ottenuto dal¬ fresca di genziana presenta delle macchie con leg¬ esposto ai può dedurre che la è data dalle genziopicrina, fluorescenza impurità die macchie, almeno delle per l'accompagnano. B) Herba Centaurii Breve a) e lavori MÉHU (93) riuscì per primo amara cenno storico nell'erba contenuta di Per estrarre la sostanza (121) foglie con gusto Già lo estremamente dissi eritaurina colla b) stesso amara e le il diede nome di adoperato ha una l'estrazione per massa resinosa delle giallognola amaro. Korte che dall'erba di centaurea minore Lederich che ottenendo così (82) è riuscito a dimostrare l'identità della genziopicrina. Estrazione delle sostanze Per questa estrazione ho e minore, centaurea metodo trifoglio fibrino, di isolare allo stato cristallino la sostanza a (punto di fusione 136°). eritrocentaurina usava finora reperibili nella bibliografia amare contenute adoperato nell'erba di il metodo già centaurea minore usato da HÉRISSEY Boudier (122). S'introduce 1 kgr. di erba di centaurea (setaccio III della Pharm. Helv. V.) in alcool a 80°. L'estrazione dura fino — a 35 un che — minore percolatore non polverizzata e si siano grossa la si estrae con raccolti 5 lt. di percolato, poi la necessari affinchè la aggiunge si droga non lasci più gusto amaro. percolatore, il liquido ottenuto Si spreme umida rimasta el massa al si filtra e si filtra e percolato. Si distilla poi a bagno si concentra nel vuoto di etile saturato maria per levare l'alcool, il residuo L'estratto viene parziale. quindi acqua, per estrarre la sostanza con trattato amara acetato con dalla soluzione gran parte delle cosi dalla separarla più impurità. Questa operazione viene eseguita 10 volte in un imbuto agitatore, adoperando ogni volta 1 lt. di acetato di etile. I liquidi cosi ottenuti vengono riuniti e tirati a secco, l'estratto è ripreso in 300 mi. di acqua distillata, e questa soluzione acquosa, che è acquosa e piuttosto colorata, ancora Essa viene poi le ultime traccie di Alla soluzione distillata, filtra, si 5 lt. di si tira imbuto un fin che questa aggiunge una II residuo così ottenuto viene allora esaurito in di 250 mi. per quantità sostanza 5 amara volta, per refrigerante riflusso. a I diversi un deposito filtrata e costituito Cromatografia Per ottenere Si tre sciolgono acqua, presenta 0,42 e un e se delle una 100 mgr. del prodotto sviluppato, acqua nel rapporto esposto macchia di raggi un di etile anidro possibilmente pallone di dalle soltanto la Si vetro singole eseguono munito di estrazioni prime due estrazioni, si forma leggermente colorata, che gr. ottenuto ai acetato con ottenuti dall'erba di di sia (4 una 1 e 0,6. — 36 minore — sono necessarie da due pipetta della capacità di 1 mi. la fase mobile butanolo, acido : 5), che lampada una blu chiaro grandi con : centaurea cristallino in 5 mi. di metanolo. delle macchie sufficientemente conc. acqua cristallina gocce di questa soluzione, versati da acetico di lasciati raffreddare. e massa 0,8 ca. in liquidi liquidi una quantità uguale cristallizzazione. sua dell'estratto Il cromatogramma con da essiccata pesa e) a la filtrati in differenti matracci Nei matracci contenenti i estrarre per facilitarne operando all'ebollizione, estrazioni sono e più, (per questo nel vuoto. secco a non per levare agitatore, si colori etere). si acquosa, e in etere con clorofilla, adoperare occorre scopo viene filtrata. trattata con ai butanolo saturato di mercurio, vapori rispettivamente del valore di Rf Tutta la striscia larga ca. zione delle sostanze, viene tagliata viene analizzato nel suo due I sentano a) Cenni storici I trattati alla conclu¬ e amaro, 0,6). genziopicrina, pre¬ Menyanthidis e primi lavori fin lavori sul ora principio reperibili amaro delle sostanze rigenerate con più bibliografia nel Egli fibrino trifoglio sono la meniantina sfruttando estrasse essere alcool bollente. seguente formula bruta: Trent'anni di amare nella contenuto la ottenuta giunge stessa. (123). Più tardi Kromeyer essere ogni singolo pezzettino e esame, si reattivi per la coi tipiche della di Brandes proprietà è avvenuta la separa¬ fluorescenza blu chiara lascia gusto con cromatogrammi Folium pezzettini a rispettivamente 0,42 le colorazioni C) lungo la quale cm Dopo questo gusto. sione, che solo la macchia (il valore di Rf è di 2 assorbite dal carbone, per studiò le proprietà e ne poi diede la CsoBUoO^ (124). tardi Lederrich (125) descrisse la meniantina da lui giallognola vitrea e fece notare che questa sostanza gli alcaloidi da delle reazioni. Molto caratteristica è come una massa coi reattivi tipici per col molibdato fosforico di sodio, che colla meniantina forma quella un precipitato giallo. Una ventina d'anni allo tava stato un dopo cristallino dalle Bridel punto di fusione tra i 217° Dieci dopo anni isolata da Bridel con a isolare la meniantina trifoglio fibrino; essa presen¬ i 223°. e Rosenthaler la (126) riuscì fresche di foglie dimostrò l'identità della loganina (127). F. Korte, dopo meniantina essere riuscito a dimostrare l'identità della swertiamarina, della eritaurina, della chiratina, riuscì a isolare la la Blackstonia Lo stesso il Prof. H. e genziopicrina da altre speci Lomatogonium (82). come per esempio la Cicendia, il Korte in una corrispondenza (che potei sua Fluck, comunicava di essere riuscito a dalla consultare dimostrare che con tutte le della genzianacee sono genziopicrina. Egli presenza conclude, che secondo la sistematica di Wettstein si deve considerare la caratterizzate famiglia delle Meniantacee sostanza amara, come la meniaritina, una ma non famiglia contiene picrina. — 37 — a sé, poiché contiene nessuna traccia di una genzio¬ b) Estrazione della sostanza amara Questo di modo R. Cajes (128) foglie e di e trifoglio estrazione dalle foglie basa si di sul trifoglio fibrino. metodo si basa sul fatto che la sostanza fibrino è solubile a adoperato nell'acqua, nell'alcool, caldo da contenuta nelle amara etere cloroformio. La e droga polverizzata viene gusto estratta con passata al setaccio IV della Pharm. Helv. V. è distillata acqua bollente fino alla perdita del suo una temperatura non amaro. Gli estratti acquosi si superiore ai finché 35°, concentrano nel vuoto abbiano preso non una ad consistenza sciropposa; si con alcool al 95 % a 60°-70°, poi si filtrano. poi distillato e il residuo mescolato bene con sabbia facilitarne l'estrazione, indi essiccato perfettamente nel vuoto e estratto poi gli trattano stessi L'alcool viene per nel soxlet cloroformio. con Si eliminano così bassa, a e le tutte Il cloroformio viene poi il rimanente si tratta che il residuo La non soluzione serve evaporato ad lascia più gusto L'estratto acquoso, tirato a una nel un e a a 50°-60°, fino amaro. viene nel vuoto 50°, ca. a e trattata con filtrata; l'idrato impurità. temperatura normale si lascia e durante tutta la refrigerante. Durante questo tempo si separano le impurità, si filtra e si aggiunge ugual volume di etere assoluto. Il solvente si lascia riposare, si filtra distilla. si tirato massa di Il rimanente si nuovo a Da 1 una secco, massa scioglie ottiene la giallognola amorfa, forma di che Cromotografia della trifoglio fibrino trifoglio fibrino, amara libero sotto si di acqua, forma di presenta e una sotto vitrea. grammi 100 mgr. del in cloroformio sostanza asciugata nell'essiccatore kg. di polvere di foglie questo modo 2 e) acqua gran parte delle secco il residuo sciolto in alcool assoluto notte temperatura possibilmente fresco, agitata bene di precipitato in cloroformio. leggermente torbida e ad assorbire una piccole porzioni di con giallognola idrato di alluminio di alluminio impurità insolubili secche di di sostanza sostanza prodotto finale trifoglio fibrino amara. amara ottenuta ottenuto dalle 38 — foglie dall'estrazione dalle vengono sciolti in 5 mi. di metanolo. — si ottiene in secche di foglie di Da due gocce di questa soluzione, versati mi., bastano per contenuto totale di 1 mente micropipetta del una delle macchie sufficiente¬ grandi. Ho eseguito diversi ottenuta dalle foglie di etere acetato e cromatografia della di tentativi secche di fibrino trifoglio Acetato di etile saturato scugli con ottenere sostanza le fasi mobili acqua, etere saturata con di etile con in etere e diversi con amara seguenti: acqua rapporti e saturati mi¬ con acqua. Questi tentativi non nuti ottimi risultati nel rapporto (4 con 1 : hanno dato la miscela però buoni risultati, butanolo, vapori due con mente e conc. acqua 5). : raggi di Il cromatogramma asciutto viene esposto ai mercurio, così di ho otte¬ mentre acido acetico lungo molto fluorescenza il percorso tutto intensa, la e sono terza una visibili lampada tre macchie; fluorescenza con ai legger¬ viola. Tutta la striscia larga suo lungo cm. tagliata delle sostanze, viene analizzato nel 2 a quale la pezzettini e è avvenuta la separazione ogni singolo pezzettino viene gusto. Dopo questo esame gustativo si giunge alla conclusione, che terza macchia possiede gusto amaro il cui valore di Rf è di 0,7. solo la con una soluzione all'i % di molible due macchie colorate di un sodio, prime presenta fosforico di valori cui molto intenso i e sono Rf rispettivamente di 0,5 e giallo Lo stesso cromatogramma trattato di dato di 0,65, però queste due lato dalle foglie con di trifoglio librila basico carattere D) Flavedo 'Aurantii a) Breve cenno non lasciano alcun gusto voglio ricordare che Steinegger A questo punto stanza sostanze storico un alcaloide (la e amaro. Weibel hanno iso¬ genzianina) e una so¬ (86). amari e lavori fin ora reperibili nella bibliografia ora pubblicato a questo proposito. primi lavori risalgono a Tanret (129) che riuscì a isolare le amare contenute in questa droga: l'esperidina e l'isoesperidina. Poco è stato fin I a DelPesperidina Berna, egli riuscì si occupò Wander (130) nel suo lavoro di tesi fatto ad isolarla in molte speci di limone — 39 — sostanze e in altre piante della famiglia delle rutacee. Diversi autori si occuparono invece delle nei semi di alcune varietà di aranci riuscirono a isolare, dai semi di Più tardi Koller nina e una amara Schmidt (131) limoni, la limonina. di isolare a contenute amare e dagli stessi la limo¬ la isolimonina. Metodo per l'estrazione delle b) varietà Czerny (132) riuscirono e sostanze di limoni. Bernay e sostanze dalla amare scorza di arancio amaro Per questo metodo mi nella contenute di 200 gr. scorza Si amaro, di arancio setaccio IV della Pharm. Helv. V di basato sul fatto che le sono di arancio scorza filtra, polvere in amaro trattati e una il residuo sostanze amare, solubili in acqua. sono vengono volta prima passati al con ca. di 500 mi. con petrolio. La fatta viene così essiccare; polvere petrolio. sgrassata l'etere di petrolio viene evaporato e il residuo controllato nel suo gusto. Dato che il residuo non lascia praticamente alcun gusto amara, si può esser certi che le sostanze amare contenute nella droga, sono rimaste nella polvere sgrassata. La polvere, così previamente trattata, si estrae con alcool al 95° nel soxlet finché essa non lascia più gusto amaro. di etere e viene trattato nuovo 200 mi. di etere di L'estratto alcoolico si mi.), 100 acetone. e a concentra nel vuoto questa soluzione alcoolica si Si forma così precipitato un filtra, il piccolo un a aggiunge un volume ugual bianco voluminoso che filtrato viene (ca. volume di non lascia piccolo volume ca. 15 mi. Questo estratto fluido concentrato, rappresenta un liquido sciropposo giallognolo, che servirà per le mie ricerche colla cromatografia più gusto su si amaro; e concentrato a un carta. e) Cromatografia dell'estratto ottenuto Due gocce dell'estratto ottenuto, tenuto totale di 1 mi., bastano per dalla versate ottenere scorza da una di arancio amaro micropipetta del con¬ delle macchie sufficientemente grandi. Come fase mobile ho provato l'acetato di etile non sono arrivato a Risultati soddisfacenti li ho ottenuti invece nolo, acido acetico saturato con acqua, ma buoni risultati. conc. e acqua nel rapporto (4 — 40 — con : 1 la fase mobile buta: 5). Il cromatogramma asciugato osservato sotto la e di mercurio presenta due macchie vapori lampada raggi di ai fluorescenza viola. con larga 2 cm. sulla quale è avvenuta la sepa¬ tagliata a pezzettini e ogni singolo pezzettino Tutta la striscia di carta razione delle sostanze, viene analizzato nel Dopo questo seconda macchia d) gusto. suo gustativo si giunge alla conclusione, che solo possiede gusto amaro, il cui valore di /?/ è di 0,68. esame la Reattivo Il cromatogramma trattato senta due macchie in pada di quarzo. l'altra è di mentre un E) Herba Absinthii a) Cenni storici Uno dei con soluzione all'i % di FeCl3, pre¬ una corrispondenza delle due già osservate sotto Quella con gusto amaro è di un colore grigio e verde lavori la lam¬ oscuro, oscuro. finora reperibili nella bibliografia primi ad occuparsi delle sostanze amare nell'erba contenute maggiore fu Mein (133). Dopo di lui altri autori le studiarono: Kromayer (134), Roux (135), Senger (136) e Bourcet (137); quest'ul¬ di assenzio ad timo riuscì isolare dall'erba di assenzio chiamò absintina Gli una autori e che sopra possedeva una sostanza cristallina che citati, credevano che l'erba di assenzio sola sostanza amara, ad isolare una punto di fusione di 68°. un ma più seconda sostanza tardi Adrian con amara e un contenesse Trillat (138) riuscirono punto di fusione di 258° che chiamarono anabsintina. Recentemente Herout, Sorm piccola pubblicazione, amare lizzata da benzolo, con un possiede mentre a Frantisek (139) quella un punto di fusione di 182°-183° se in noto un tra 160°-164° cristallizzata da alcool, possiede un punto di fusione isolata da Herout, Sorm e miscuglio delle due isolate da Herout, Sorm e isomere sostanze Frantisek — 41 tra 160°-164° Frantisek (139); tina ottenuta allo stato cristallino da Bourcet mente resero dall'assenzio maggiore due una sostanze se cristal¬ e Vanab- punto di fusione di 260°. h'anabsintina che tica e ottenuto isomere tra di loro. Uabsintina che sinlina d'aver (137) era (absintina se mentre molto e cristall'absin- probabil¬ anabsintina) (139). Ciò spiegherebbe la diffe- — renza del punto di fusione. Recentemente G. Schenk e E. Schuster (140) hanno pubblicato un maggiore. Essi svilupparono il seguente loro lavoro sull'erba di assenzio partendo dalla droga totale fresca. droga con acqua, concentrano mescolano con idrato di alluminio, precipitato metodo di estrazione, Gli autori estraggono la nel vuoto, la la soluzione di fresco e filtrano. Il filtrato lo concentrano, lo distillano il metanolo poi precipitato bianco e amaro non più gusto zone que la la sviluppano sviluppata ed e colonna prima fluorescenza con là seconda » » la terza » » la quarta » » la » » quinta usato denti alle a che la stessa e il la non versano su una colonna di cloroformio. con osservata ai raggi U.V. presenta cin¬ cinque blu gialla gialla di blu chiaro. un la dividono in cromatografia, cinque parti corrispon¬ zone. le sostanze ottenute affermano di gialla alluminio, così sviluppata, viene sortita dal tubo di di per la Le ultime quattro e nuovo, acetone; ben distìnte: La colonna vetro aggiungono cloroformio fino con Versano questa soluzione in cloroformio la stessa filtrano di amaro. ossido di alluminio La e filtrato; distillano poi l'acetone viene soluzione acquosa la estraggono lascia in metanolo versano alla soluzione acquosa essere zone eluite separatamente vengono corrispondono alle quattro riusciti ad isolare e alle sostanze quali metanolo con amare che essi diedero i nomi che ripeto nella seguente tabella. Tabella Dose A Sostanza Punto di fusione 95° Artamarina D Artamarinina B Artamaridina C Artamaridinina - 96° 82° 72° Olio — 42 — Grado di amarezza 850 125000 720 6800 A, B, D, si presentano Le sostanze giallognola, la mentre E' difficile dare sostanza giudizio un riusciti ad isolare le sono Sviluppo del metodo zio maggiore b) cromatografia Herout, Sorm tati ottenuti da allo stato maggiore, siste nell'estrarre gusto etere la con autori confermano però Frantisek (139). e non i risul¬ amare dalFerba di assen¬ dall'erba di amare quello adoperato da Senger (136), che con¬ droga polverizzata fino a che non lascia più amaro. La soluzione lascia depositare, rofilla delle e Si imbuto si concentra fino eterea si decanta e a consistenza sciropposa, la si si filtra per eliminare buona parte della clo¬ sostanze resinose. poi la agitatore con estrae sostanza amara, scuotendo la soluzione grande quantità eterea in un di acqua; l'operazione si ripete a che tutta la sostanza amara non sia passata nell'acqua. La soluzione acquosa si mescola con una certa quantità di idrato di fino alluminio trato può amare una si filtra. e Dopo a') su gli carta su per estrarre le sostanze si basa sostanza vitrea cristallino. Il metodo che ho usato per estrarre le sostanze assenzio una questo lavoro, dato che su sostanze amare Le mie ricerche colla forma di sotto C è rappresentata da un'olio. l'allontanamento di essere contenute considerato poco di etere sciolto quel una soluzione più o meno nell'acqua, il fil¬ pura delle sostanze nell'erba di assenzio maggiore. Scelta del solvente Prima di scegliere l'etere 1) L'etere di petrolio ho provato diversi altri solventi: sciogliere poca clorofilla e di possedere un punto di ebollizione piuttosto basso; però le sostanze amare dell'assenzio maggiore si sciolgono troppo poco in esso. ha il vantaggio di 2) La benzina sarebbe il solvente ideale se non possedesse un punto di ebollizione troppo alto. 3) Il cloroformio scioglie troppa clorofilla difficile da eliminare poi. L'etere rappresenta di sciogliere assenzio un po' quindi maggiore, possiede né sostanze resinose, il solvente, lentamente le e di i vantaggi avere un — che pur avendo lo sostanze di amare non contenute sciogliere troppa clorofilla, punto di ebollizione basso. 43 — svantaggio nell'erba di Difficoltà b'> In con incontrate primo tempo subito dopo l'estrazione nel soxlet, agitavo l'acqua, senza previa filtrazione su ossido di alluminio. l'etere un Questo modo di procedere mi causò grandi difficoltà, poiché tra l'etere l'acqua si formava uno strato di emulsione così forte che scompariva solo dopo lungo tempo e con difficoltà. e Una filtrazione ossido di alluminio si su questo inconveniente è nell'imbuto quello di mantenere la agitatore possibilmente evapora durante la manipolazione Micrometodo per isolare e) nute In nell'erba di assenzio soxlet di un un'ora 5 gr. di deve quindi della droga). di erba di assenzio La soluzione filtrato viene tirato Il residuo si e agitato a con secco scioglie per sei volte con ca. 15 mi. di cloroformio, di vetro dal collo si filtra di 1 lavata poi su cm. passati al ca. ca. ca. a tirata conte¬ amare cm. e grado nel secco a circa e di filtrato del diametro di 1 ama¬ vuoto. cm. una su La 40 mi. di cloroformio libero di acqua co¬ e il nel vuoto. imbuto agitatore un 30 mi. di acqua distillata. Si distilla la solu¬ un pallone di Cleisen viene versato il residuo sciolto in e quantitativamente Si concentra questa soluzione colonna di ossido di alluminio alta 1 una aggiunto. setaccio della Pharm. seconda del a 3 mi. di cloroformio per allontanare le ultime traccie di con tirata lungo. di acqua e durante estratti in 30 mi. di etere, versato in zione acquosa nel vuoto in nuovo le sostanze vengono eterea viene colonna di ossido di alluminio alta 3 poi lavata etere 1:1; l'etere che di essere evitare per maggiore Il residuo viene sciolto in lonna viene quantità di quantitativamente Helv. V., (questa durata d'estrazione varia rezza accorgimento sempre nel rapporto grandezza adeguata polvere utilissima in seguito, mostrava formazione di emulsione. Altro per evitare la impurità, a ca. e cm. la in un pallone 3 mi. e la del diametro stessa viene poi 10 mi. di cloroformio libero di acqua. La soluzione viene molto solubile in clo¬ una polvere bianca di questa polvere bianca è i 40 mgr. Un po' secco, rimane così roformio. La quantitativa resa campioni da sciolta in una microscopio me esaminati tra i 12 goccia di cloroformio mostra due forme di e e 44 di questa lasciata evaporare cristalli, aghi — variata nei diversi — e su tetraedri. un sostanza vetrino da Controllo dell'estrazione Poiché sia l'erba ogni residuo, dopo l'estrazione nel soxlet, sia l'ossido dopo essere stato essiccato, sia l'etere dopo l'agitazione ad esaurimento con l'acqua non lasciavano più gusto amaro, si può accettare con assoluta certezza che nella polvere bianca ottenuta sono presenti tutte le sostanze amare contenute neWassenzio maggiore. di alluminio d) Cromatografia carta su della Tutta la ottenuta dall'erba di bianca ottenuta da 5 gr. di assenzio polvere sciolta in 5 cm3 di cloroformio Per prova si ogni questa soluzione, el polvere bianca assen¬ maggiore zio usa ciò che maggiore viene secco. (misurato 0,1 mi. corrisponde a con 0,1 gr. di micropipetta) una di droga. Reattivo Oleum 66% (Soluzione di S03 in acido solforico conc.) Acido solforico concentrato L'acido solforico il potere stesse osservate sotto lampada la ai coll'oleum, poiché questo ha nell'acido solforico contenuta di dare macchie vantaggio Voi. 1 5 Voi. % si mescola concentrato legare l'acqua di reattivo ha il 99 ca. con colorazione concentrato. Il differenti, le e di mercurio danno fluorescenze vapori molto intense. Visibilizzazione delle macchie f) Il cromatogramma mercurio, Il non mostra 0,4 di 0,46; un una colore valore di raggi ai di trattato col reattivo macchia color arancio col valore di Rf rosso vapori ai solforico all'acido due macchie verdi col valore di Rf che si trasforma subito in di un presenta rispettivamente 0,6; e una di macchia viola molto intenso, col R( 0,8. L'intensità della colorazione delle macchie matogramma ai raggi di Dal Dr. Herout, un lampada una alcuna macchia fluorescente. cromatogramma quattro macchie: e osservato centinaio di mgr. anabsintina, una lampada professore ai aumenta vapori all'università di di absintina e isolate nei suoi laboratori. — 45 esponendo — cro¬ di mercurio. Praga, ho potuto altrettanto quantità Queste due sostanze una il con avere grande di il reattivo all'acido solforico danno viola molto intenso. mescolate loro tra colorazione una Queste etere, posseggono lo con che si trasforma rossa cromatografate, sostanze valore di Rf di 0,8. stesso Sia l'absintìna che l'anabsintina lasciano gusto diluizione (1 10 : Tutta la striscia larga 2 ca. tagliata sulla cm. Rf separazione ogni singolo pezzettino viene e giunge alla conclusione si 0,8 possiede gusto = Per isolare questa sostanza gusto con bianca goccia una microscopio (1 amaro Dato che la un si sostanza : da amara di me e di del di il solvente. polvere una 000). Un poco di questa lasciata evaporare aghi con un su un punto di fusio¬ microscopio. isolata che le amarezza evaporandone 10 000 di cloroformio può dedurre che essa, molto miscuglio di absintina anabsintina. Questo fatto spiegherebbe anche il valore mostra sostanze un valore amare probabilmente, uguale ricevute dal non è altro un g) Considerazioni cola Questo metodo di quantità di droga Dopo lo sviluppo stanza esatta, basso in proprie sul metodo estrazione ha il e vantaggio secondariamente di del di lavorare pic¬ agire abbastanza rapidamente. con una rispettivo cromatogramma, si ha un'idea abba¬ o una droga con un contenuto alto, medio amara. ancora delle macchie basso del punto di fusione. si tratta di se sostanza Un'idea una ed cristallizza in bellissimi ugual grado Herout, Prof. che e ritagliato la zona una larghezza 0,8 per = ottenuto 50 mgr. di 104°, determinato al blocco sotto il di Rf più ottenute esatta colla l'ho droga e ottenuta con una confrontando le quantità grandezze ben determinata di soluzione, (absintina più anabsintina nel rapporto 1:1) in cloroformio. Il metodo da sponda 0,1 sostanza 15 cromatogrammi ho estremamente sciolta in vetrino da ne gusto con sostanza serie di ho amaro corrispondente al valore Rf eluendo poi queste striscie di carta una che solo la amaro. cromatogramma Dopo una è avvenuta la quale pezzettini a gustativo esame macchia col valore 3 cm., in ancora gusto. suo Dopo questo ca. amaro 000000). delle sostanze, viene analizzato nel poi in un singolarmente che sia di amara campioni me droga, di a ogni macchia corri¬ può calcolare la quantità approssimativa di nella droga. Con questo metodo ho analizzato proposto lavora in modo che così si contenuta droghe esistenti nel commercio. _46 — Questi risultati, confrontandoli logici vennero confermati. Vale suo grado a dire: di più amarezza Da calcoli la macchia viola di era 0,05 % il 0,5 e maggiore da grande, più me amara esaminati si dei diversi aggira tra il grandi difficoltà il di gli scopi ottenere Fabsin- campioni. più tardi anche per questa droga adotteremo, metodo di determinazione biologico. data la l'anabsintina semplicità, il %. a come causa delle sostanze Come vedremo sua era esami bio¬ metodo è da escludere, almeno per il momento, per della Pharm. Helv. VI tina droga il contenuto in sostanza approssimativi, di erba di assenzio Questo una dagli alto. campioni e i risultati ottenuti con — 47 — PARTE PRIMA METODO BIOLOGICO I. Parte teorica A) Introduzione al metodo A questo punto l'idea di determinazione chimica. una 1) In ripeto biologico i motivi che ci hanno indotti ad abbandonare una pianta medicinale dere che due contenente pur mostrando più sostanze amare può acca¬ campioni, ugual possedere una differente azione amara. 2) L'azione farmacologica degli amari, secondo le cognizioni odierne, si basano principalmente sul gusto amaro; perciò sembra, per il momento, più logico introdurre un metodo fisiologico. Oggi si fa sempre più larga la tendenza alle determinazioni biologiche contenuto totale in sostan¬ un amara, possono za o metodi diretti per la determinazione di sostanze, oppure per come trollare risultati dubbi ottenuti logica della vitamina A compresi i alcuni metodi per le determinazioni determinazione delle già altri metodi. foglie citata vitamina A l'azione emolitica delle Come vedremo (Vedi con¬ determinazione bio¬ (141). Nella Pharm. Helv. V, già con di (141), rispettivi supplementi, si trovano biologiche; per esempio, per la digitale (142), e per la determinazione della per la determinazione della vitamina saponine. Vit. D D e (143). più tardi il primo che pubblicò degli amari fu Wasicky (30). un metodo biologico per la determinazione Quando scenza di già terminato questo lavoro, siamo venuti a cono¬ pubblicazione del Professor Karma, di Helsinki (170), nella avevamo una quale egli dice di del di grado aver elaborato nessun del gusto Fisiologia a) Localizzazione del gusto trovano è ancora biologico per la determinazionf non stato introdotto nella Farma¬ stato. B) La metodo amarezza. Fin'ora questo metodo copea di un (144) percezione del gusto avviene nelle mucose della lingua dove appositi organi di ricezione. Questi organi, che sono situati _ 48 — si in ben determinate della parti lingua, 1) le papille filiformi, che superficie la tutta della i sono sono le nella parte anteriore della sono più forma di V sulla parte 4) le papille foliate, che si della e sono diffuse su rare e si trovano specialmente lingua; 3) le papille circonvallate, che, in a numerose lingua; 2) le papille fungiformi, che allineate seguenti: più numero posteriore trovano da sette dodici a del dorso della nella parte sono lingua; posteriore e laterale lingua. La sensibilità papille, è è direttamente gustativa bambini, nei perciò grande proporzionale dove la densità alla densità delle delle papille è maggiore. L'innervazione della è così distribuita: lingua i due terzi della parte anteriore della fondo alla b) posteriore della lingua lingua del nervo vago. della parte terzo Le condizioni affinchè una lingua percezione gustativa sostanza che provoca il avvenga essere linguale; nervo dal f aringioglosso ; 1) La sostanza che provoca il gusto deve 2) La dal e un la parte in sono: solubile in acqua. gusto deve trovarsi nella concentrazione minima necessaria. e) Le digerenti speci di gusto distinguono Si quattro sorta di gusto : 1) Salato; 2) Acido; 3) Amaro; Il Dolce. Oggi vige l'idea che ai quattro gu¬ corrispondano quattro qualità di organi ricettori. La sensibilità per i quattro gusti è sti, diversa nelle differenti regioni della lin¬ gua. La sensibilità per il dolce si trova localizzata sulla punta, ro sul fondo salato nelle e ai lati parti l'ama¬ quella per posteriori, per il anteriori laterali il gusto acido nelle parti e per laterali. _49_ deloteitòamater Julia lùvc d) Altri Noi fattori che possono constatare nell'esperienza giornaliera che l'organo può modificare sensibilmente una sensazione gustativa. possiamo l'odorato Nella lingua sono Inoltre esaminando della sostanza una e una del dolce. amara, tro¬ per fare attenzione che la temperatura bisogna sia troppo alta non freddo, del caldo di soluzione una la concentrazione limite, stessa del¬ localizzati altri fattori che possono influenzare cioè la sensazione del percezione gustativa, varne il gusto influenzare troppo bassa, altrimenti si otterrebbero o dei risultati falsati. Principali lavori finora reperibili C) Già nel secolo gusto scorso questa caratteristica non mai venne zione limite per l'amaro di adoperata stanchezza dei nervi Per evitare pubblicarono amare droghe un giudizio un altro metodo Per e amaro in quantitativo 4 800 cetto di 000, sostanza una e numero quella a è da stato di salute, seconda della ecc. Wasicky, Stern ancora e quantitativa Zimet delle con droghe (145), sostanze possibile amare, la hanno introdotto viene quale e stato trovato. poter confrontare, questi autori, biologiche, hanno diluizione una come sostanza cam¬ determinata la sensibilità e come consigliato la brucina, 1:4 000 000 tra base per evitare valori di e 1 che lascia : 5 000 000. ancora Come calcolo, hanno scelto il valore troppo grandi hanno introdotto il con¬ di amarezza, che per la brucina stabilirono in 100000. Per ottenere questo con stessa persona non dei risultati limite concentraionze : differisce molto momentanea. Come tale 1 droga uguale, contenenti sostanze amare, rendendo così pione (detta di paragone) gusto o sostanza in questo senso, le determinazioni individuale determinazione vera del contenuto in sostanza attiva di diverse ottenere per tutte per la ma in parte dal fatto che la concentra¬ metodo per la determinazione un delle e sbagli e ancora varia nella una perfino gustativi, o dello persona, a lascia droga una data concentrazione limite, una quantitativa delle droghe. Ciò dipende da persona bibliografia veniva indicato che in estrazioni acquose di amaro nella numero dividono la diluizione limite della della soluzione della brucina 100 000. — 50 — e moltiplicano il droga quoziente per Già nel 1931 alcuni gli diverse di campioni stessi autori (146) esaminarono lo con stesso droghe prelevati da farmacie della metodo città di Vienna. Campioni di Herba Absinthii esaminati lasciavano nelle diluizioni tra 1 : esaminati lasciavano ancora 1 : 500; 3 gusto cora campioni i e 9 000 e 1 : 10 gusto ancora gusto amaro 000; 8 campioni di Herba Centaurii di Folium Menyanthidis nelle diluizioni tra 1 amaro nelle diluizioni tra 1 amaro 1 500 : 1 e ancora diversi altri pione più amarezza il raggiunge D) (120) di alcuni gusto cora amarezza vennero amaro Osservazioni le quali, suo analizzati 12 al massimo campioni riguardanti scartato isolate, una in sostanza amara, basano : 25 000 il grado 1 e la determinazione del droghe 000, cam¬ 80 000. e di amara 1 : che 2 000. amarezza se¬ per l'erba di e varia di complicati : 60 000. grado di amarezza per isolare queste .sostan¬ si trasformano facilmente. determinazione chimica per i seguenti motivi: pur mostrando possiedono differente un il campioni (di droga) medicinale dove si trovano Perciò sembra per il 20 grado di genziana; questi lasciavano an¬ di radice di azione farmacologica degli amari, principalmente sul gusto amaro. zione di queste : e principio della fioritura 2) L'azione ne, si : 000, eseguito diverse determinazioni nelle diluizioni tra 1 una 1 e periodo vegetativo. 1) pianta può accadere che due campioni, in : nella diluzione 1 (147), determinando ha pure volta una Abbiamo e 50 nelle diluizioni tra 1:1 000 Esistono dei metodi relativamente ze, : 30 000 7 di essi campioni; 10 000 : scrivono che il contenuto in sostanza soltanto di poco durante il Messmer ancora amarezza Schindler e Wasicky, assenzio Aurantii ancora Madaus condo mostrava flavedo mostravano nelle diluizioni tra 1 nelle diluizioni tra 1 campioni amaro Per il amarezza e an¬ 9 000. : Per la Radice di Genziana essi esaminarono 25 mostravano 2 000 : esaminati lasciavano momento metodo L'introduzione del metodo di un più ugual amare, totale amara. secondo le più logico sostanze contenuto attuare cognizioni odier¬ per la determina¬ fisiologico. Wasicky — 51 — nella Pharm. Helv. VI sarebbe senz'altro stata possibile e avrebbe portato dubbio senza notevole un progresso. Poiché la sensibilità per il gusto e dipende sensibilità di data persona per una di chinina, poiché questa a persona determinare la prima campione. Come sostanza però abbiamo scelto il closi trova già nella Pharm. sostanza una brucina, noi è stata usata fin'ora la campione ridrato varia da persona amaro anche da altre condizioni esterne, si deve sostanza Helv. VI. La concentrazione limite media per l'amarezza di questa di circa 1 In analogia semplice un sostanza è 200 000. : con le altre determinazioni di numero ma amarezza, biologiche venne non venne introdotta una adoperato unità di amarezza. Ciò permette droga della Basandoci loro su di unità di cetto rappresentazione plastica del valore terapeutico più facili da calcolare. una da dei valori e questa riessione abbiamo proposto d'introdurre il amarezza, misura per l'amarezza delle come le unità tutte amarezza biologiche con¬ delle è stata stabilita convenzionalmente, è oltremodo dipendente biologiche. altre unità La determinazione, per di 20 agli Ecco di da questa, semplificarla essere ciò viene indicata che non è perchè il caso l'azione per le eseguita alla temperatura un metodo per la determinazione del grado di amarezza scopi della Pharm. Helv. VI qui il metodo per la determinazione del grado di in unità di Definizione amarezza causata delle droghe, grado di VI, nella Pharm. Helv. amarezza. viene espres¬ amarezza. di unità di Un'unità amara pure gradi. Proposta Il come fin'ora esistenti. Nella definizione la concentrazione deve amara so e preparazioni. L'unità di E) droghe di amarezza. amarezza, per Pharm. la da 5 mgr. di cloridrato di acqua, alla temperatura di 20 gradi. — 52 — Helv. VI, s'intende l'azione chinina, sciolti in 10 mi. di Prescrizioni a) generali Per questa determinazione si deve stabilire la sensibilità della persona in esame per una soluzione campione di cloridrato di chinina, e l'azione del medicamento amara razione delle soluzioni Ogni L'esame e con droga. originali soluzione deve graduati vetro o gustativo viene le lungo parti superiori mossi durante 30 più piccola aspetta poi un esame non minuto per vedere sciacqua la Dopo bocca con lascia gusto si riceve se atteso 10 minuti si passa aver concentrata. b) Determinazione della sensibilità concentrazione gusto amaro, della viene rite¬ amaro una viene sputata, sensazione di amaro; gradi. all'esame della soluzione seguente gustativa in di vetro pallone un graduato. 2 mi. di questa soluzione vengono diluiti di vetro graduato di con acqua potabile in diluizioni delle un 100 mi. originale vengono preparate in 9 provette le quali poi si determina la concentrazione limite. Di questa soluzione guenti si gr. di cloridrato di chinina vengono sciolti in 100 mi. di acqua 0,100 pallone gradi, lingua. acqua alla temperatura di 20 più potabile, con di 20 in modo spe¬ secondi, laterali del fondo della e incominciare dalla Se la soluzione in si di palloni con concentrazione limite. nuta come poi preciso, esaminare, alla temperatura e analizzare; la prima concentrazione serie da articoli. nel seguente modo: eseguito vengono introdotti nella bocca Si deve sempre singoli misurata in modo essere il modo di prepa¬ e pipette. 10 mi. della soluzione da ciale La concentrazione si trovano nei se¬ A 2,10 2,20 2,30 2,40 2,50 2,60 2,70 2,80 2,90 B 7,90 7,80 7,70 7,60 7,50 7,40 7,30 7,20 7,10 C 1 1 1 1 1 1 1 1 1 238 000 227 500 217 000 208500 200000 192000 185 000 170 500 172 500 Soluzione di chinina. A = B = mi. di acqua. C = Concentrazione della chinina; 1 gr. in originale — 53 — x mi. di acqua. e) Determinazione del a') Assaggio preliminare Dalle soluzioni parate le diluizioni grado di originali descritte seguenti; delle e della amarezza droga del medicamento o singoli articoli nei vengono pre¬ determina la concentrazione stesse si limite. b') Determinazione * 10 4 3 2 1 o trovata nell'assaggio preliminare cinque provette si preparano in 1 G-1,00 ... mi j 10,00 La calcolazione delle unità di seguente * G-0,75 G-0,50 G-0,25 10,00 10,00 10,00 G | 10,00 avviene secondo la formula amarezza A amarezza 200 000 • = A • 2 000 = B • B 100 A = Concentrazione limite per il medicamento da determinare. B = Concentrazione limite per il cloridrato di chinina. spiegare il metodo diamo supponiamo gusto e le : Unità di Per 1 si determina la concentrazione limite. mi. di soluzione originale a (G) prossima più piccola, seguenti diluizioni, poi Acqua 7 principale Tra la concentrazione limite la concentrazione 6 amaro che un qui campione nella diluizione 1 il cloridrato di chinina sia 1 : : 45 il seguente esempio: di radice di 000, e genziana lasci ancora che la concentrazione limite per 180 000. I valori vengono sostituiti nella formula: 45 000 Numero di unità di amarezza • 2 000 = = 500. 180000 Questo campione unità di di radice di genziana amarezza. — 54 — mostra un contenuto di 500 IL Parte sperimentale Per poter logico della e H. Flùck sua secondo e i due guito avere valutare da e prestati sono maggior un e hd poi calcolato la Linder, ho se¬ ottenuti li ho fatti dispersione percentuale colla collaborazione del suo assi¬ esperimenti sapessero di « e soluzione soltanto due dispersione dei valori necessarie affinchè le persone in nell'esaminare, secondo consistè anche olio etereo), Questi gentilmente di studenti. di al esame », un campioni di cloridrato di (droga contenente in campione sostanza di il metodo di generale da la sensibilità delle 11 persone in pomeriggio, campione Herba Absinthii contenente 11 studenti della Scuola Poli¬ gustavano. cosa una per con lo scopo di esaminare la disposizioni noi proposto, al mattino esame, eseguito iscritti all'Istituto di farmacia che Zurigo numero L'esperimento do ne venne aveva Vennero prese le pione che due serie di tecnica Federale di non consiglio del Prof. Dr. K. Abt. Questo esperimento con su Esperimento primo a) si cui lavora il metodo bio¬ i risultati numerici e altri valori caratteristici, ingegnere con schema proposto dal Prof. Dr. A. seguenti esperimenti Principii delle A| precisione dispersione percentuale uno Quest'ultimo, del metodo stente un'idea della « più Folium chinina, di un delle sostanze Menyanthidis cam¬ amare (droga » amara). droghe vennero poi adoperati anche nel secon¬ esperimento. b) Esperimento Questo secondo secondo esperimento Scuola Politecnica Federale di mente todo si su sono poche prestati e aveva persone durante venne Zurigo eseguito eseguire la dispersione maggior spazio _ 55 quattro assistenti della dell'Istituto di farmacia che lo scopo di un con — di tempo: gentil¬ del me¬ Esso consiste nel stabilire, mattino sera, la sensibilità alle cinque da studiare di queste quattro persone durante quattro settimane, droghe in e più controllare se l'assuefazione ha un influsso sui risultati di questo esperimento. Droghe studiate e) I cinque campioni sono: 1) Herba Absinthii; 2) Radix Gentianae; 3) Flavedo* Aurantii (queste droghe accanto alle sostanze amare amari contengono anche olio etereo). 4) Herba Centaurii; 5) Folium Menyanthidis (queste droghe tengono soltanto Per le soluzione B) amara). sostanza stesse con¬ persone venne poi provata la loro sensibilità per una campione di cloridrato di chinina. Risultati a) Risultati del primo esperimento Si determina la sensibilità di mattino Le e del serie (1 gr. della indicata di numeri sostanza percepisce a indicati amara come Vengono poi dati in base più persone confrontando i risultati del pomeriggio. in un rappresentano mi. di acqua le concentrazioni potabile) limiti che la persona amare. i valori delle unità di amarezza poiché è appunto queste concentrazioni limiti che abbiamo introdotto l'unità di amarezza. — 56 — Tabella I Determinazione della concentrazione limite della soluzione campione di cloridrato di chinina. Persona in Signorina » Signor » mattino esame pomeriggio A 200 000 192 000 B 217 000 217 000 C 208 500 208 500 D 208500 208 500 200 000 E 200000 » F 208 500 208 500 » G 200 000 200 000 H 200 000 200000 I 200 000 200 000 L 185000 185 000 M 208 000 208000 Signorina Signor Signor » Signorina Tabella II Herba Absinthii Persona in Signorina » Signor » (droga che contiene anche olio etereo) mattino esame pomeriggio A 50000 45 250 B 55000 58 750 C 50 000 50 000 D 41500 43 500 E 41500 41500 » F 43 500 45 250 » G 43 500 45 250 H 41500 41500 » I 41500 41500 » L 45 250 43 500 M 50000 51000 Signorina Signor Signorina — 57 — Tabella HI Folium Menyanthidis (droga Persona in Signorina che contiene soltanto sostanza mattino esame A 33.300 B » 50000 pomeriggio 33 300 50 000 C 33 300 33 300 D 20000 20000 Signorina E 20 000 20000 F 22 200 22 200 Signor » » G 28 500 25 000 H 22 200 25 000 » I 22 200 25 000 » L 28 500 25 000 33 300 33 300 » Signor Signorina M amara) b) Risultati del secondo esperimento Dispersione spazio e del dei valori delle concentrazioni limite durante un più lungo di tempo, per quattro persone, confrontando i risultati del mattino pomeriggio. Tabella IV Determinazione della concentrazione limite della soluzione campione di cloridrato di chinina Persona in esame mattino pomeriggio S 208 500 208500 » R 200000 200000 » B 200 000 200 000 » F 200000 200 000 Signor Delerminazione delle concentrazioni limiti per le — 58 — cinque droghe in esame I) Settimana Herba Absinthii 1. Giorno Persona in pomeriggio mattino esame Signor S 50000 50000 » R 41500 40 000 » B 38 000 38000 » F 52 500 52 500 Folium 2. Giorno Persona in Menyanthidis pomeriggio mattino esame Signor S 33 300 28500 R 25 000 25 000 » » B 20000 20 000 » F 33 300 33 300 Herba Centaurii 3. Giorno Persona in mattino esame pomeriggio S 22 200 25 500 » R 16 650 18 000 » B 12 500 12 500 » F 20000 22 200 Signor Radix Gentianae 4. Giorno Persona in mattino esame | pomeriggio S 22 200 25 000 » R 20 000 25 000 » B 16500 18 000 » F 20 000 22200 Signor Flavedo Aurantii amari 5. Giorno Persona in mattino esame Signor S | pomeriggio 2 000 2000 » R 2000 2000 » B 1250 1250 » F 2000 2000 — 59 — II) Settimana Folium 1. Giorno Persona in esame mattino Menyanthidis pomeriggio S 40 000 40 000 » R 20 000 22 200 » B 20 000 20000 » F 33 300 33 300 Signor Radix Gentianae 2. Giorno Persona in esame mattino pomeriggio S 28500 28 500 » R 20000 20 000 » B 16650 16 650 » F 22 200 22200 Signor Fìavedo Aurantii amari 3. Giorno Persona in esame mattino pomeriggio S 2000 2000 » R 2 000 2000 » B 1650 1800 » F 2000 2000 Signor Herba Absinthii 4. Giorno Persona in esame mattino pomeriggio 52 500 S 52 500 » R 41500 41500 » B 41500 41500 » F 52 500 52 500 Signor Herba Centaurii 5. Giorno Persona in esame mattino pomeriggio S 25 000 25 000 » R 20 000 20000 » B 20000 20000 » F 25000 25000 Signor 60 — Settimana Herba Centaurii 1. Giorno Persona in mattino esame pomeriggio S 25 000 25000 » R 20 000 20 000 » B 16 650 16 650 » F 25 000 25 000 Signor 2. Giorno Persona in Herba Absinthii mattino esame pomeriggio Signor S 52 500 » R 50000 47 500 » B 41500 40 000 » F 52 500 52 500 Radix Gentianae 3. Giorno Persona in Signor 52 500 mattino esame pomeriggio S 25 500 25 500 » R 22 200 22 200 » B 16650 16 650 » F 25 500 25 500 4. Giorno Persona in Signor FoUum mattino esame Menyanthidis pomeriggio S 40 000 40000 » R 20 000 20 000 » B 18 000 18 000 » F 40 000 40 000 5. Giorno Persona in Signor » Flavedo Au rantìi amari mattino esame pomeriggio S 2 220 2220 R 2 000 2000 » B 1650 1650 » F 2000 2000 — 61 — C) Considerazioni sui risultati dei due a) Primo esperimento Osservando prima a valori del mattino ferenza, Se e esperimenti ciò con e del vista questi risultati, si pomeriggio, praticamente subito che nota i risultati del chinina, ( = si a g 100 • — = primo esperimento dire ciò che è dato 100 i confermato dall'elaborazione statistica. venne si vuole calcolare la differenza di sensibilità delle 11 persone, per le due vale tra esiste alcuna dif¬ non • la meglio stabilire e droghe e per la dal coefficiente di variazione deviazione standard diviso per il valore medio), che esso è più piccolo per la chinina (ca. 4,5 %), più grande droga contenente olio etereo (ca. 11 %), e ancora più grande per droga contenente soltanto sostanza amara (31%). osserva per la la Tabella I Numero dei valori (persone) Valore medio m x Deviazione Rapporto 100- s standard 1) Droga con olio etereo (Herba Absinthii) mattino pomeriggio 2) Droga con .... 11 45 750 4 716 11 46 091 5 276 11 28 500 8916 11 28373 8 743 11 203 273 8278 11 201 091 9905 15 205 233 8009 15 203 633 9 646 10.3 % 14.4 % solo sostanza amara (Folium Menyanthidis) mattino pomeriggio .... 31,3 % 30,8 fc 3) Soluzione di chinina mattino pomeriggio .... mattino pomeriggio .... 4,07 4,93 3,90 4,74 % % % % Osservazioni alla tabella A questi risultati delle dispersioni si deve far notare, che essi si basano su due determinazioni per ogni persona. Come vedremo più tardi, soltanto — 62 — dopo un dato cosi che i valori delle b) Secondo e Calcolo della quelli esperimento Per si più piccoli. che tra i valori dei risultati osserva dopopranzo, praticamente del non esiste una differenza. dispersione parziale si non procede coi valori dei risultati delle dilui¬ coi loro logaritmi. esempio la droga A (H. Centaurii) ma assuefazione certa una diventano sensibilmente dispersioni Per questo calcolo zioni, acquista si esperimento Anche in questo del mattino determinazioni, di numero per la persona S, al posto dei valori, 22 200 e 25 000 si calcola coi A valori, 135 e 140. questi valori si arriva procedendo al posto di 22 200 22,2 parte ottenendo 1,35 arriva cosi e 25 000 si e 25 prende si estrae e 1,40 e 140 nel seguente modo: la millesima poi il logaritmo questi valori si moltiplicano per 100 e si a 135 Questa trasformazione dispersioni quasi uguali, Con questi valori si dei valori del mattino I risultati sono e serve, calcola e prima secondo per del poi la di tutto, a rendere i valori delle dei numeri troppo grandi. la somma (Con dispersione parziale. avere non pomeriggio). dati dalla tabella seguente. Tabella II La dispersione parziale nel secondo Somme dei libertà quadrati Droghe 4 3 737525,8 17 350,9 680,9 3 680,6 498,6 645,2 1843,8 762225,8 3 D. P. 12 D. W. 12 P. W. logaritmi Grado di Persone Settimane per i 9 D. P. W. 36 Somma 79 — 63 — esperimento Media dei valori dei quadrati S2 148381,4 5 738,6 227,0 306,7 41,55 71,69 51,217 154 818,157 Da questa tabella si sulla differenza tra le Nella tabella seguente il valore troviamo e la « più alto il « che gran parte della dispersione cade dati i valori medi per le singole droghe: osserva una droghe. sono si constata per l'« Herba Absinthii », al secondo posto Folium Radix Gentianae Menyanthidis » e a grande », seguono distanza il poi l'« Herba Centaurii » Flavedo aurantii amari ». « Tabella HI Valori medi dei Droga Valore medio A Persona Valore S 132,2 132,8 166,9 143,6 28,1 B C D E per il secondo logaritmi medio Settimana 128,3 117,6 110,2 126,9 R B F esperimento medio Valore 3 118,2 121,4 121,8 4 121,4 1 2 Tabella IV s R B F Inoltre si A B C D E 139,6 129,8 121,0 138,4 140,6 130,2 123,5 136,9 171,5 163,5 160,8 172,0 157,1 134,4 127,0 156,0 32,5 30,0 18,5 31,2 osserva che, se eccezione per A si fa e B, valori medi i differiscono in modo evidente. Si uguali, osserva e anche che i valori medi per le persone F che per le persone R e B differiscono Se si vuol esaminare la differenza servirsi dei e persone, con quadrati e i tra singoli dei valori medi dell'azione calcolare la più piccola e S (vedi tabella sono valori medi, reciproca (D P) differenza esistente, nel quasi IV). tra bisogna droghe nostro caso la formula: l0,05 i ' S do,05- In cui to.os rappresenta la corrispondente grado zona di sicurezza della distribuzione t, col di libertà. — 64 — s =. la radice del N = il d0,05 dei numero corrispondente quadrato del valore medio. valori, dai quali venne calcolato il valore differenza rappresenta la Per quel più piccola riguarda l'influsso che nazioni, dai valori medi si la poiché dopo prima significativa. del continuo ripetersi delle determi¬ l'influsso dell'assuefaizone, nettamente osserva settimana medio. valori questi rimangono dire così per costanti. si lascia stabilire per Questo della mezzo dispersione parziale. Tabella V Dispersione Tra 1 + 3 + (2 e Tra 2, 3 più 1 666,7 14,2 680,9 4) le settimane parte della gran settimane, 3 dispersione sulla amarezza D) Dispersione del metodo La dispersione con i dei quadrati 666,7 7,1 cade sulla differenza la una lingua certa viene pratica, prima e per imparare dove percepita. per la determinazione delle sostanze del metodo che determina le logaritmi dei Valore medio nel cerchio di queste tre ultime la diffe¬ mentre è minima. Infatti è necessaria la sensazione di colata quadrati 2 tra le ultime tre renza Somma dei libertà 4 e Nell'insieme La Grado di valori delle unità di amare sostanze amare, amarezza ( 148) viene cal¬ dati dalla formula A E 2 000 = .Si • — procede quindi alla trasformazione della formula B come segue: log Log. A è il = log logaritmo della mentre log Viene data una minare, E B è il 2 000 + log A — log B droga da deter¬ concentrazione limite della concentrazione limite della logaritmo della chinina. di concentrazione trasformazione limite, che sono logaritmica perchè valori minimi il cui si tratta di valori logaritmo è distri buito normalmente. La dispersione del metodo, nel primo esperimento, viene calcolata coi valori delle concentrazioni limiti trovate per le due La dispersione del metodo, nel secondo — 65 — droghe sulle 11 persone. esperimento, viene calcolata coi valori delle concentrazioni limiti trovate nelle ultime tre mattino pomeriggio sulle quattro persone. primo esperimento per il calcolo della dispersione e Nel sizione 11 valori mattino e sono 3 x = E log. disposizione 3 S Xi x = • 4 2 • x singole droghe log. S sono del metodo dispersione E. log = e pomeriggio). dati dalla formula: E dove N = rispettivamente 24 11. = N dispersione si calcola colla formula: s = Intervallo in cui il 95 -Nl-i v % s Ul — x)a di tutte le determinazioni x log = E di una si troverebbero è dato da: x n 24 valori — r= N con per il calcolo della esperimento, I valori medi per le droga dispo¬ a viene calcolato col valore medio tra (perchè settimane, 4 persone, 2 volte al giorno (mattino La sono pomeriggio). Nel secondo a settimane, al al = + sto.os» dove t0,05, (=23 N-l distribuzione Student « » st, rispettivamente =10) significa grado di L'intervallo, nel quale di determinazioni per una in 95 °/c di tutti i casi oppure in 19 droga, eseguite si troverebbe il valore medio x X a catena delle misurazioni + tolleranza. e alle stesse singole N, è 20 casi su condizioni, dato: to,or> s V N Se si passa mente agli antilogaritmi, dunque alle unità di amarezza propria¬ detti, si ha così : Antilog x = M = unità di nata « u » Antilog (x -f sto.os) = L„ = — st0,05) = L„ = zone media della limiti (« Unità di amarezza, che in 2,5 singole — = esami¬ sopra e % di tutte le determinazioni viene sorpassato. Unità di senso droga o » sotto). = singole Antilog (x amarezza per le e amarezza, che determinazioni negativo. 66 — in 2,5 % di viene tutte sorpassata le nel st0,05 _ Antilog (x -| ) V 10 = = N Unità di amarezza, che in 2,5 % di determinazioni coefficiente N per di una ) V = lu Unità di amarezza, che in = determinazioni N di Gli intervalli del 95 Lu = R una % diventano unità sua r un ciò unità sua : di tutte % grado di ama¬ droga. per la Intervallo in cui si troverebbe l'unità di = M per rezza di tutte le negativo. senso determinazioni del singole tutte coefficiente N viene sorpassata dalla media in con di 2,5% di catena a Intervallo in cui si troverebbe il 95 = rezza = droga amarezza le 10 —1„ un media. amarezza per — catena di a viene sorpassata dalla Sto,05 _ Antilog (x L0 droga tutte le una le droga, ama¬ nell'ambito del 95 determinazioni di catena a Jc un coefficiente N. L'intervallo di dispersione per la dispersione data (da Poiché di una a causa non metodo, e lo intorno a si presume che sua unità di due calcolate da di sopra M, e di in cui la una unità di misura amarezza media. logaritmo simmetricamente intorno più M, dà a come amarezza della ritrasformazione del si trova dispersione percentuale di sotto, tutte da lu fino se viene presa la darsi), l'intervallo del r a in M, antilogaritmo, si deve parlare dispersione percentuale percentuale di sopra è sempre una più grande. 1„ —M 100 = M Divergenza in 47,5 % di rapporto a amarezza media M tutte le determinazioni di M, in sopra l'unità di M stesso in percento. lo —M P„ • = M 100 = Divergenza in sotto 47,5 % di rapporto — 67 a l'unità di tutte amarezza M stesso in percento. - media M le determinazioni di M, in Considerazioni sul metodo E) dei Dai risultati calcoli conclusione e statistici, si riceve buona una impressione generale sul metodo. buona Questa impressione è confermata dal calcolo delle diver¬ poi percentuali. genze lo p„ — = M —1„ M — 100 • pu e 100 = M M primo esperimento Risultati del a) FI. H. Absinthii Po p» + 19,0 % Pu —16,0 % Radix Folium Gentianae Menyanthidis + 6,7 % + 4,6 % 6,3% -4,5% Menyanthidis droghe, mentre essi » notare Menyanthidis pu per queste due causa della + 15,7 % + 4,8 % 6,9% —13,6 % -4,8% differiscono da tutti differiscono poco che nei due » ho sempre sono gli tra e droga pu delle di loro. adoperato migliori per il secondo persone in » e per il i valori p0 droga; la stessa maggior assuefazione delle pu per la e altri valori p0 per l'« Herba Absinthii esperimenti droghe auran- tii amari + 7,4 % — si vede subito che i valori p0 questi risultati Folium e Flavedo Herba Absinthii Folium Da esperimento Herba — altre « + 5,4 % -5,1% Centaurii Da « Po Risultati per il secondo b) Menyanthidis esperimento a esame. Conclusione Da questi risultati si può dedurre che, introdotto per la determinazione delle il metodo sostanze biologico può amare essere da noi tratte, nella Pharm. Helv. VI. F) Risultati dì diverse eseguite, Do delle qui droghe con alcuni determinazioni delle unità di campioni delle cinque droghe le concentrazioni limiti in gr., che la persona indicata — mi. (espresse) percepisce in 68 — da amarezza me trattate. di acqua ancora potabile come amare e le unità di rispettive E a) Herha Absinthii a') Risultati la con Raccolto 1954 calcolate secondo la formula: amarezza droga 2 000 = A/B. • secca Firma Provenienza Siegfried Diluizione limite Unità di amarezza dopo 1 anno 1. Campione: Jugoslavia 80 000 800 800 2. » Polonia 22 000 220 220 3. » Vallese 13 000 130 130 4. » Ungheria 9 200 92 92 5. » 16400 164 164 6. » 35 000 350 350 7. » « ss Dixa 65 600 656 640 58 400 584 560 Lehner-Sueur 52 500 525 500 Firma Raccolto 1955 Provenienza Diluizione unità di limite amarezza Dixa Vallese 52 500 520 Bohny Bohny Sulger Ungheria 54 000 540 Vallese 57 000 570 » Prof. Tucakov » Brit. Jugoslavia Ungheria 1. Campione: 2. » 3. » 4. » 5. 6. b"| Vallese » Sulger Bohny Risultato La droga con la Drug H. droga fresca essicata da noi 325 100 000 1000 66 000 660 a temperatura d'ambiente giardino botanico politecnica federale di 2!urigo. è stata raccolta nel cia della scuola 32 500 » dell'istituto di farma¬ Unità di Foglie 4Foglie fiori ca. (1 : amarezza 440 1) 520 335 Fiori — 69 — b) Radix Gentianae a') Risultati la con droga secca Raccolto 1954 Un campione della firma Siegfried provenienza sconosciuta: zione limite 22 000, unità di Firma Raccolto 1955 1. Campione: 2. » Dixa Siegfried 3. » » 5. » Brit. 6. » Prof. La Drug H. Tucakov una droga fresca e) Flavedo Aurantii amari a') Risultati con la droga Campione: » 3. » 4. » amarezza 32 200 322 82 500 825 » 10 600 106 » 33 400 334 » 13 200 132 » 68600 686 essicata da noi amarezza 60° a Provenienza Spagna Siegfried Dixa » Bohny Brit. Drug d) Herba Centaurii a') Risultato con la droga 424. secca Firma Raccolto 1955 1. Unità di limite è stata raccolta nell'Oberland Bernese sui monti di Brienz: droga diluizione limite 42 400; unità di 2. Diluizione Francia » Risultato cori 220. Provenienza Bohny 4. b't amarezza dilui¬ H. » Diluizione Unità di limite amarezza 3 300 33 1600 10 1000 16 2 500 25 secca Raccolto 1954 Un campione zione limite 8 000, della Firma unità di Siegfried, provenienza amarezza — 70 80. — sconosciuta: dilui¬ Firma Raccolto 1955 Provenienza Diluizione Unità di amarezza 1. Campione: 2. » 3. » 4. » 5. » Siegfried Algeria 6 600 66 Dixa Nordafrica 20 000 200 Francia 14 000 140 Belgio 12 000 125 Francia 41000 415 Bohny Brit. Drug H. Prof. Tucakov e) Folium a'I Risultato Menyanthidis con la droga secca Raccolto 1954 Un campione della firma Siegfried provenienza zione limite 8 000, unità di 1. Campione: 2. » 3. » 4. » Proposta Per Helv. 12 500 125 Bulgaria Ungheria Belgio 33 200 332 43100 431 8 000 80 H. esigenze minime nella amarezza Polonia Bohny Drug quel che Unità di limite Dixa Brit. delle Diluizione Siegfried concerne VI dovrebbe reperibili Provenienza Firma Raccolto 1955 esigere, bibliografia per la Pharm. Helv. le unità di e amarezza VI minime che la ogni sìngola droga per ai risultati da Unità di amarezza 400 Radix Gentianae 300 Menyanthidis 200 Herba Centaurii 150 Flavedo Aurantii amari — 20 71 — in base ai ottenuti, me Herba Absinthii Folium dilui¬ sconosciuta: 80. amarezza Pharm. risultati propongo: minime SECONDA PARTE Determinazione dell'olio essenziale nell'erba di assenzio, nella I. di arancio scorza amaro, nella radice di genziana. e Scelta del metodo A) Fluck che Hegnauer e esiste non un di olio essenziale nelle olii essenziali in (149) se droghe, poiché stessa, e tutti i metodi per la determinazione gravimetrici, Flìjck Sono che in sono sostanze generale secrezione si da una quantità e la costituzione degli olii eterei, sia volumetrici che formano e gli olii vegetale, oleose, essenziali con immagazzinati vengono in come segue: odore molto forte appositi organi di ». generale due quantitativa vengono attualmente usati in metodi: Metodo volumetrico a) Il metodo volumetrico presenta diversi troppo pera Hegnauer e tempo, e Hofmann specialmente (149) risultati ben riproducibili. l'olio dopo etereo e nella vantaggi: forma è semplice, modificata non da ado¬ Flìjck, destinato per la Pharm. Helv. VI fornisce Inoltre permette di analizzare i costituenti del¬ la determinazione dell'olio totale. Metodo ossidimetrico Il metodo ossidimetrico, che ha il vantaggio di adoperare una quan¬ piccola di droga, è stato studiato da Zach-ScHENKER (151) modificato dopo lunghi anni di prove da Fluck e collaboratori (152). L'ossidazione con KoCro07/H2S04 avviene sotto pressione in un tubo tità relativamente e contenuto vero parte la definizione degli di determinazione. Di conseguenza definito volatili di origine Per la loro determinazione b) (150) dimostrarono, convenzionali. Hoffmann hanno e Schirm dall'altra parte la olii variano secondo il metodo degli « tardi più e metodo assoluto per la determinazione del di vetro a pareti solide. — 72 — Metodo cj Si gravimetrico procede droga stilla la pentano, nello stesso modo altri solventi o quest'ultimo e per il metodo volumetrico. Si di¬ come vapore acqueo, il distillato si estrae con lipofili etere con di petrolio, punto d'ebollizione basso; si evapora a il residuo si pesa. // metodo volumetrico metodo che verrà introdotto nella Pharm. Helv. Questo la quantità dell'olio viene letto in un che distilla etereo VI, determina volume il il vapore acqueo; con tubo di vetro finemente calibrato. Perchè anche la parte dell'olio essenziale solubile nell'acqua venga quantità non troppo grande di acqua venga a trovarsi nel sistema. Ciò viene raggiunto, riconducendo continuamente l'acqua, dopo l'avvenuta separazione dell'olio, nel pallone determinata, si deve fare in modo che una distillatore (149). Un principio, fu descritto a suo tempo da Clevenger (153) e poi adoperato da molti studiosi con piccole modifiche. (Vedi anche Heeger (154), Panzer (155) e l'apparec¬ chio distillatore dell'U. S. P. XIV). apparecchio che lavora secondo questo fu Anche l'apparecchio l'edizione 1953 rimase L'apparecchio immutato), contenuto in olio etereo nelle resistente al uso e calore, presenta facilità di di un Il sistema tenuto refrigerante per la dell'acqua, E' fabbricato con per la sua forma di a chiuso che sistema un grande vantaggio distillazione refrigerante è iniziata a forma di fungo refrigerante a e sua intro¬ fungo. può essere come per il speciale vetro un regolata semplicità di continua senza si adatta molto bene. forma di che la stessa venga però vapori condensati scendano lungo di di gocce troppo grosse che Come un assiduo controllo. punta, in maniera così che i droghe. un Secondo Bauer (156) il a HuFFMANN, pulizia. Una volta che la bisogno VI, possiede di distillazione avviene in questo principio. e sia per la determinazione del contenuto adoperato, britannica 1948 (nel¬ è costruito secondo modificato da Fluck duzione nella Pharm. Helv. Il processo Farmacopea nella contenuto mezzo potrebbero di misurazione serve di 1,5 mi., suddivisa in 0,01 mi. — 73 essa otturare una — fungo deve terminare trovarsi vicino alla parete; a evitando la formazione la microburetta. buretta di precisione del con¬ il tubo di vetro del diametro di 1 fino alla refrigerante camera che sale dal cm. è rivestito con pallone distillatore corda di amianto per una isolarlo dall'ambiente. Per la del diametro di 7 le due burette nel e si usa tubo di il tubo di vetro vetro del 0,05 mi. Un tubo trasversale obliquo che sale e congiuntura permette il riflusso tra dell'acqua Modo di esecuzione della determinazione Si pesa nel dere pallone di vetro di droga (deve corrispon¬ 0,3 mi. di olio essenziale), che viene poi mescolata con una ca. a di acqua da quantità cinque a Si chiude il rubinetto, si che in comunicazione il punto di mette in mm. dall'acqua, etereo mi., suddiviso di distillazione. pallone e) dell'olio separazione contenuto totale di 3 l'acqua esca si mette il attraverso una quantità dieci volte superiore. riempiono con acqua le due burette fino il tubo trasversale nel poi lentamente (ca. 20 minuti) fino refrigerante, dopo la temperatura distillazione continui adagio. cada dal viene prescritto, per lavare dal gocce che fossero rimaste attaccate alla Dopo a che la regolata Il tempo di durata della distillazione varia da Trascorso il tempo e e ca. droga. refrigerante le eventuali a l'acqua del refri¬ 5 minuti. che l'olio si è ben separato, si lascia uscire a prima goccia in modo che la droga parete, si chiude si continua la distillazione durante stesso venga trovarsi nella microburetta. Trascorsi ca. l'acqua finché lo 5 minuti si poi il volume dell'olio essenziale. IL Determinazione dell'olio essenziale nell'assenzio A) Lavori I a refrigerante. Si riscalda gerante di distillazione, pallone legge maggiore. fin'ora reperibili nella bibliografia primi lavori sulla determinazione dell'olio essenziale nell'assenzio maggiore risalgono a Charabot e principio della primavera effettuato il 31 maggio del 1904. nata nel II raccolto avvenne Laloue (157). La pianta del 1904, il ripianto delle in quattro stadi ben determinati del getativo. — 74 — venne stesse semi¬ venne periodo ve¬ Risultati Contenuto in olio Data della raccolta Stadio 1. settembre 26 1904 - prima della fioritura 0,1 % Stadio 2. 10 luglio 1905 principio della fioritura Stadio 4 agosto 3. - 0,2 % 1905 sul finire della fioritura Stadio settembre 4. 2 0,12 f< 1905 - la fioritura dopo etereo della droga totale 0,14 % Osservazioni Da questi risultati si constata un massimo contenuto olio in essen¬ ziale durante la fioritura. Per la determinazione quantitativa si sottopose la pianta alla distil¬ lazione con vapore acqueo, il distillato trolio, e dopo porato e il residuo pesato. la separazione E. RabAK (158) essenziale contenuto absinthium condizioni; allo venne e dopo lunghi e Arlington il anno parte allo nella stato secco. dopo l'evaporazione differente noto sottoposta alla distillazione in del e tra gli anni e 1907 pianta Virginia eva¬ « Artemisia sempre nelle stesse vapore acqueo, in parte con Il distillato 1919 etere di pe¬ il solvente fu la il venne residuo in olio della e con ricerche intorno all'olio che solvente resa estratto agitatore, anni di studi Secondo le condizioni climatiche, la in poi venne imbuto un nell'assenzio, rende fu coltivata ad stato fresco etere, con » in venne pianta oscillò tra poi era il estratto pesato. di anno 0,12 % e 0,24 %. Poche precipitazioni assieme ad elevata temperatura sole favoriscono l'aumento della dalla droga essiccata era molto resa più fresca. Al tempo della fioritura la e molte ore di in olio etereo. L'olio etereo ottenuto da quello ottenuto dalla droga pianta possiede il maggior contenuto in oscuro olio etereo. M. FlÒSCH (159) scrive che il contenuto in olio etereo dell'Artemisia non indica il metodo ( Russia) possiede il Ester olio stagioni fresco, indica il foglie foglie (161) ha un'altro mentre fresco mostrava contenuto un di fresco mostravano 0,15%, del 0,20% La percentuale assenzio di 0,2 % e nel che il contenuto in Brasile, varia colle stesse. olio in novembre e determinate di rispettivamente del 0,34 % etereo luglio e determinato di campioni determinati contenuto rispettivamente del campione raccolto in del 0,41 %. Gli stessi dopo piena crescita un del 0,38%. e delle L'autore scrive trovato cresce foglie giovani raccolte di Saratowa a che oscilla tra il etereo dell'artemisia che mostravano un contenuto in %, %. L'autore il 0,47 metodo. suo Camargo Fouseca delle campioni del 0,38 l'erba olio in contenuto non coll'età delle e Due e de etereo e (160) scrive che l'assenzio coltivato un 0,56 %. L'autore il 0^2 % tra cui ha determinato l'olio etereo. con Soboleskaja 0. oscilla Ungheria absinthium coltivata in foglie 0,098% fino secche varia da della che per gli scopi poi maggiore dovrebbe avere 0,20 %. La determinazione dell'olio etereo 0,3 %>. del farmacopea un venne a Brasile minimo contenuto del effettuata col metodo gra¬ vimetrico. In un suo lavoro inviato al Prof. Fluck (e che mi fu recente rende noto che l'assenzio gnato), St. BiJCHNER, in Polonia, mostrava della fioritura. Per le determinando la provoca La una contenuto massimo sue droga risce anche che il non un maggiore da lui coltivato in olio essenziale nei principi gravimetrico determinazioni ha usato il metodo costituita dalle foglie magazzinaggio durante diminuzione dell'olio e dalle sommità fiorite. Rife¬ un anno etereo nella in condizioni normali droga. seguente espone i risultati delle determinazioni tabella dall'autore nei differenti stadi del Anno 1950 Data della raccolta periodo vegetativo. Stadio di della sviluppo pianta 7.VI. Prima della fioritura 7.VII. Gemme 7.VIII 7.IX. 7.X. Durante la fioritura Sul finire della fioritura Dopo la — fioritura 76 — conse¬ Contenuto in olio essenziale 0,62 0,68 0,51 0,47 0,13 % % % % % eseguite Percntuale del 'olio 10— 20— 30— i»0— SO 60- TO— etereo BO¬ totale 90— 400 distil ale °/o Durata I 30 I 15 droga della i*5 I in 1 20 I 165 I 150 I 1 80 maggiore. 135 assenzio minuti 1 105 1 90 1 75 polverizzala di dishiiazione 6 0 secca e Curva della durata della distillazione dell'olio etereo dalla B) Lavori a) Considerazioni L'olio maggior propri generali contenuto etereo nell'erba di assenzio maggiore ghiandole epidermriche, parte rinchiuso nelle tità in interne. Le nero e speciali ghiandole oleifere comperate già polverizzate droghe si trova per la in e secche piccole quan¬ seguenti ven¬ passate al setaccio IV della Pharm. Helv. V. b) della Quantità Dato il contenuto adoperare sogna droga una relativamente basso dell'olio etereo abbastanza minazione ho sempre preso nell'apposito pallone pesavo giunta di e) ca. per la determinazione adoperare da 100 grande quantità gr. di polvere di droga. nell'assenzio, Per bi¬ ogni deter¬ di erba di assenzio che di vetro del contenuto di 1 lt., e dopo l'ag¬ 500 mi. di acqua, sottoponevo alla distillazione. Durata della distillazione La durata totale della distillazione per di assenzio secca maggiore Nella tabella seguente nelle singole è di ca. annoto 3 quantità una di 100 gr. di erba ore. le percentuali di olio totale distillato frazioni di tempo. Singole Percentuale dell'olio totale frazioni distillato di tempo in minuti 60 15 Durante la prima frazione 30 75 60 84 90 90 150 98 180 100 prima mezz'ora distilla è di un il 60 color bruno, le % dell'olio totale; questa seguenti sono poi di un verde molto intenso. Se buona dopo però l'erba di assenzio è abbastanza fresca, se droga del commercio, distilla subito un olio di alcune ore assume una colorazione di _ 78 — un si tratta cioè di un una colore verde, che blu intenso, dovuta a for- inazione di azulene. Col tempo però fluidità, trasformandosi in una perde questo massa bruna e colore assieme alla sua resinosa. Osservazione: Alla fine della distillazione, per lavare dal refrigerante olio etereo semisolide che sono rimaste attaccate alla piccole quantità di parete, è molto importante chiudere la distillazione continui di ancora l'acqua per ca. del refrigerante lasciare che e 5 minuti. Risultati per il raccolto 1954 Contenuto in olio essenziale Contenuto in Enumerazione dei olio essenziale campioni in % determinato un anno 1) Siegfried: provenienza Jugoslavia 2) Siegfried: provenienza Polonia 3) Siegfried: provenienza Vallese 4) Siegfried: provenienza Ungheria 5) Dixa: provenienza Ungheria 6) Dixa: provenienza Vallese 7) Sulger: provenienza Vallese Lehner e Sueur: . . . 8) Bohny: provenienza Vallese 9) 0,24 0,42 0,25 0,1 0,19 . . provenienza 0,15 0,3 0,33 0,24 0,41 0,23 0,1 0,18 0,15 0,3 0,32 0,25 0,24 0,15 determinato Val- 10) British Drug Houses: provenienza (*) Le droge in luogo scuro vennero conservate in (un armadio), dopo % in non sacchetti di carta alla temperatura tra i 18 e bruna, rinchiusi, i 20 gradi. Risultati per il raccolto 1955 e) Enumerazione dei 1) 2) 3) 4) 5) Contenuto in olio campioni essenziale in Dixa: provenienza Vallese Bohny: provenienza Ungheria Bohny: provenienza Vallese Sulger: provenienza Vallese Prof. Tucakov: provenienza Jugoslavia . . — 79 — 0,42 0,32 0,35 0,26 0,45 % Ricerche f) su campione di erba di un assenzio maggiore raccolto di fresco. Dal giardino botanico dell'istituto federale di ca. Zurigo, al principio di farmacia della scuola della fioritura (mese di politecnica luglio) si raccolse 1,5 kg. di erba fresca di assenzio maggiore. L'essiccamento settimana una e avvenne subito all'ombra dopo se a una temperatura di determinò il ne ca. 25° durante contenuto. Risultati Contenuto Parti determinate Droga totale foglie Sole ( fiori + foglie + essenziale stelo) d'olio in % 0,78 1,02 0,98 0,15 . Solo steli Osservazioni E' da che la distillazione degli olii essenziali è avvenuta in un tempo molto più breve, che non per gli altri campioni di erba secca di assenzio maggiore, e dopo un'ora praticamente tutto l'olio era distillato. Altro particolare degno di rilievo: l'olio distillato dalle foglie è inco¬ lore e limpidissimo, mentre quello distillato dai fiori pur essendo limpido è di notare colore bruno un Le due qualità scuro. di olio lo stesso odore possedevano e lo stesso indice di rifrazione. Questi due olii, conservati durante la colorazione blu osservata già in altri una settimana, hanno non campioni di olii mostrato ottenuti da droghe in commercio. g) conclusioni Osservazioni e Dai risultati reperibili nella letteratura e da quelli da me ottenuti si può concludere: 1) L'assenzio maggiore dovrebbe 0,2 % - minimo del 0,3 % in olio essenziale. 2) Il magazzinaggio di ha mostrare un contenuto praticamente alcun un anno, influsso sul — alle condizioni contenuto 80 — già quantitativo accennate, in olio non etereo. 3) Olio essenziale da una fin Lavori I ora contenuto Burmann (162) e con un nella essenziale radice nella distilla molto colore da più più uniforme, più di radice di un anno. genziana bibliografia di che trattano l'olio genziana appartengono agli autori Redgrove (163). Kroeber (164) scrive: lazione e reperibili nella bibliografia brevi accenni primi essenziale di più droga immagazzinata nella reperibili droga fresca una fluido III. Determinazione dell'olio A) da ottenuto si presenta molto rapidamente, che non quello distillato e vapore sottoponendo ottiene si acqueo, la radice di olio uà che genziana alla distil¬ odora fortemente di genziana. Più tardi Brack (84) si olio. Egli olio, vale scrive che da 2150 a dire il Messmer minazioni radice di della occupò kg. genziana di questo 193 gr. di ottenne 0,009 %. (120) nella quantitative, sua col dissertazione espose il risultato delle deter¬ metodo ossidimetrico, di alcuni campioni di genziana. II contenuto medio di questi campioni B) Lavori a) Scelta del metodo di determinazione. è di circa 0,045%. propri Essendo il contenuto della radice di dovuto far ricorso Per composizione chimica di radice di a un genziana veramente minimo, avrei micrometodo. esempio quello ossidimetrico secondo Zach-Schenker (151). Dato che il metodo volumetrico verrà introdotto nella Pharm. Helv. V ho cato b) di adattarlo anche per la radice di Quantità da adoperare per ogni determinazione L'adattamento del metodo volumetrico a') Prendendo a una quantità sufficienza per consentire La ziana, quantità ma una cer¬ genziana. di lettura avviene in droga esatta due maniere. bastante affinchè distilli olio nella microburetta. necessaria per questo scopo è di 300 gr. di radice di gen¬ questo adattamento presenta lo svantaggio che la distillazione deve avvenire in due volte, perchè 300 — 81 gr. di radice di — genziana in polvere più l'acqua necessaria non hanno posto nel pallone distillatore da 1 lt. 6') Si distillano, come al solito, 100 gr. di radice di genziana. L'olio scioglie distillato si la Dopo tore. una capsula normale, separazione dall'acqua, e si in un imbuto separa¬ la soluzione in pentano si evaporare il pentano, si mette la poi nell'essiccatore, e si pesa calcolando la poi capsula per percentuale in peso. versa in due ore Durata della distillazione La durata della distillazione è di quattro La velocità della distillazione la si soluzione quasi diluendola d) versa di vetro esattamente tarata. Si lascia e) in pentano poi satura con un ore. può accelerare adoperando di cloruro di sodio, che si prepara in una precedenza, po' d'acqua. Risultati Enumerazione dei Contenuto in olio campioni etereo metodo volu¬ metodo metrico in % metrico in % 0,04 0,03 0,042 0,033 0,045 0.048 0,05 0,035 0,042 0,05 0,038 0,042 gravi¬ Raccolto 1954 1) Siegfried: provenienza Francia 2) Siegfried: provenienza Francia 3) British Drug Houses: provenienza Raccolto 1955 1) Dixa: provenienza Francia 2) Dixa: provenienza Francia 3) Bohny: provenienza Francia Osservazioni. pressoché sono - . Come si vede i risultati percentuali dei due metodi identici. Altri risultati sono i risultati, non ancora pubblicati, di due campioni di col metodo gravimetrico, determinati alla scuola poli¬ svizzera, provenienza I seguenti tecnica federale di Zurigo, istituto di farmacia. — 82 — 1) Campione dell'anno 1951 mostrava un contenuto in olio etereo 1952 mostrava un contenuto in olio etereo 0,052 %. del 2) Campione dell'anno del 0,058 %. Determinazione IV. dell'olio essenziale nella di scorza arancio amaro Lavori A) Dati fin Nella amaro bibliografia della sul contenuto in olio essenziale della scarsi. sono Schimmel Bericht « distillazione dalla nella reperibili nella bibliografia di arancio scorza reperibili ora (165) del » scorza di 1907 arancio si anlaro, legge che si ad Amani ottenne una resa deU'1,4 %. Nella rivista del 1908 stessa amaro del Monzambico si metodi con Distillando con lare invece che di era acqua che la accorse con quantità di olio acqua stessa 0,1 tardi un amaro era di acido n quella scorza dopo olio in sono etereo. I stati indicati. lavoro molto interessante. a pezzettini di minima. Provò ca. poi 4 a mm2, distil¬ cloridrico, la quantità di olio polverizzata, averla di arancio scorza ottenuta distillando a dalla distillazione dei come dell'8,9 % resa di olio distillata con che dalla trova avvenute non di arancio scorza superiore Distillando la una sono pubblicato più quantità 4 volte ca. ottenne cui le determinazioni Steiner (167) ha si (166) si pezzetti con con sola acqua. ottenne 0,1 n la stessa di acido cloridrico. Questo L'olio dule fenomeno etereo oleifere, che droga o secondo Steiner si trova rinchiuso in sono all'olio di distillare, la trova appositi organi attorniate da molta può essere chimicamente per smossa mezzo (167) la spiegazione seguente: glanimpedisce di secrezione, pectina. Questa, che meccanicamente col polverizzare dell'acido cloridrico, facilitando così la distillazione dell'olio etereo. L'autore pubblica poi tutta una serie di determinazioni quantitative campioni di scorza fresca di arancio dolce. contenuto minimo di questi campioni è del 0,7 %, il contenuto mas¬ dell'olio Il etereo in diversi simo è del 7%, e il contenuto medio del — 83 — 2%. cu_ sr «^ o n> ^ ro «» CU o M OD M ^ «• tfl A •»—1 < ^ o O o •^a w— O .k o ^ (D cu VI «ri— 3 ^ cu n» o 3 o O o 3 CU "3 14 CU ._ ZT. <A N ^ ^r e Ol o— .fc cu ^* o 5' 3 5' (0 cu IO CU 3 M ili •J cu c n_ CU CD «% cu < tf « o v> o wqp» CU o o» ex istil a CU O O CD 01 Ul * 01 Z3 IO a o * 01 "T cu a in o -3 e o So5 o A 1 1 1 1 e o o « » J o »> o DI rf r W" r » r i distillato totale etereo dell'olio Percentuale — n — B) Lavori a) Quantità propri. di droga Dato il contenuto da adoperare piuttosto per ogni determinazione. elevato 10 gr. bastano per una determi¬ nazione. Si pesano del contenuto quindi 10 gr. di di 250 gr., si scorza polverizzata aggiunge l'acqua in pallone un necessaria procede alla si e di vetro distillazione. b) Durata della distillazione Per una Dopo normale distillazione si devono calcolare due ore. Singole frazioni Percentuale dell'olio di tempo in minuti totale distillato 15 70 30 85 60 95 90 98 120 100 120 minuti la droga tinuando la distillazione la resa non lascia più in. olio etereo è alcun odore nulla; da e anche ciò si con¬ può de¬ durre che la distillazione è terminata. Ho e) Risultati I e lo stesso controllo per l'erba di assenzio. eseguito campioni delle droghe mi vennero in parte concisi. — 85 — forniti in parte già polverizzati Contenuto in olio Contenuto in olio essenziale delle Enumerazione dei campioni droghe polvere in distillate concise in % HC1 0,1 con % distillate distillate con acqua in essenziale delle droghe acqua con Raccolta 1954 * 1) British Drug Houses provenienza Spagna ** 3,2 3,4 0,9 1,8 0,4 1,9 0,5 Raccolta 1955 2) Bohny * provenienza Spagna * 1.7 3) Dixa 1,5 provenienza Spagna 4) Siegfried 2,4 provenienza Spagna 5) Siegfried 6) provenienza Spagna Raccolta delle droghe 2,0 del¬ l'istituto di farmacia della scuola di * ** politecnica di Campioni La federale * Zurigo (Museo) droghe 1.8 * concisi. differenza nel contenuto è dovuta piccola ziale andato perso durante l'operazione di all'olio certamente polverizzare la essen¬ droga. Osservazioni Se la determinazione dell'olio essenziale della di arancio amaro droga polverizzata, allora basta distillare con acqua; ma droga a pezzettini, bisogna distillare con acido si esegue colla se scorza lo si determina dalla cloridrico 0,1 Conclusione n. generale Considerati i risultati nuti, che sono reperibili bibliografia nella sempre il valore medio di almeno tre e quelli da me otte¬ determinazioni, credo che per la Pharm. Helv. VI il contenuto minimo in olio essenziale delle seguenti tre droghe si potrebbe stabilire Herba Absinthii 0,25 %. Radix Gentianae 0,04 %. Flavedo Aurantii amari 2,0 come %. — 86 — segue: RIASSUNTO I. Parte Generale 1) Una vista d'assieme delle principali piante medicinali contenenti delle sostanze amare e riassunta in Segue che sostanze amare descrizione generale delle proprietà chimiche, farmacolo¬ una giche, terapeutiche e altre caratteristiche degli amari. 2) La descrizione delle 5 droghe da studiarsi, Gentianae « Radix « Folium tà », Flavedo « Menyanthidis », viene chimiche e farmacologiche. II. Parte 1) Vi chie poi Aurantii vengono descritti Herba Absinthii », Centaurii », trattata, dandone la definizione, le amare gli esperimenti cromatografici sulle come se esposti raggi ai esaminati i gusti delle alcuni reattivi esistenti nella già una resa proprietà di una sostanze proprie¬ di posizione amare e droghe delle di dare delle questi lampada 5 so¬ mac¬ vapori di mercurio; ai in più usati vengono bibliografia. 2) Per la radice di genziana è fresca, ottenendo di ricerca della mezzo sul cromatogramma, la fluorescenti, sono « «Herba amari», Speciale da studiarsi, sfruttando, stanze (amari) viene contengono esse tabella. una isolata la stata del 0,05 genziopicrina dalla droga fc. Confrontando i cromatogrammi ottenuti che quello ottenuto dalla radice secca molto con questa droga, si osserva genziana presenta delle macchie raggi di una lampada ai vapori di di più fluorescenti, se esposto ai mercurio, che non quello ottenuto dalla che le tre reazioni (alla benzidina, al naftoresorcinolo di essi per rendere visibile la zolio) eseguite su più chiare cromatogrammi non quelli per 3) un sui Per che riguarda micrometodo per isolare contenute e grafia su e genziana; inoltre al cloruro di genziopicrina, ottenuti dalla radice fresca di ottenuti dalla radice quel radice fresca di secca di sono tetra- molto genziana che genziana. l'erba di assenzio, è data la descrizione di quantitativamente le sostanze quantitativa per mezzo la loro determinazione carta. — 87 — amare della in essa cromato¬ III. Parte Prima 1) In questa parte viene nazione delle sostanze Al metodo per esempio, biologico di Wasicky come il metodo trattato biologico per la determi¬ amare. vengono apportate alcune unità di misura per il dotta l'unità di amarezza, e grado sostanza come di campione, modifiche; viene intro¬ amarezza viene introdotto il cloridrato di chinina. 2) Il calcolo della dispersione del metodo biologico viene eseguito risultati di due Il valori esperimenti. primo esperimento, che ha lo scopo di esaminare la dispersione un numero di 11 studenti, ha dato i seguenti risultati: dei con Per la droga « Herba Absinthii Per la droga « Folium H secondo del metodo persone seguenti » : 5,4 % p0 = -j- p0 = + 19,0 % ep, e pM 5,1 fc = — = —16,0 % che ha lo scopo di esaminare la (4), però durante un dispersione maggior spazio di tem¬ risultati: Per la droga « Herba Absinthii Per la droga « Radix Gentianae Per la droga « Flavedo Aurant. Per la droga « Herba Centaurii « Fol. droga » : Menyantidis esperimento, poche su po, ha dato i Per la coi p» = + 4,6 % ep, = — » : p„ = -f- 7,4 % pu = — 6,9 % ani. » : p0 = + 4,8 % ep, = — 4,8 % p0 = -f- 6,7 % e pu = p0 = + 1^,7 % e pM = » : » : Menyanthidis » : 3) I risultati delle determinazioni biologiche e e — 4,5 fr 6,3 °/c —13,6 % i risultati dei calcoli vengono discussi. Viene fatto rimarcare l'influsso dell'assuefazione che persona acquista dopo In base a questi un po' una di tempo. risultati si propone che questo metodo venga intro¬ dotto nella Pharm. Helv. VI. 4) Seguono poi i risultati delle determinazioni del grado di delle 5 sulla base di amarezza droghe trattate questi risul¬ tati, e di quelli trovati nella bibliografia; e viene proposto un contenuto minimo espresso in unità di amarezza, che queste droghe dovrebbero avere di una per serie di campioni gli scopi della Pharm. Helv. VI. — 88 — Parte Seconda IV. 1) Viene trattata la determinazione dell'olio essenziale nell'« Herba Absinthii», nella «Radix Gentianae» e nel «Flavedo Àurantii amari». Le determinazioni vengono lisce la quantità eseguile col metodo volumetrico, di materiale da candone la durata prendere per (dati che variano da droga ogni a si stabi¬ determinazione indi¬ droga). 2) I risultati delle determinazioni dei diversi campioni delle tre droghe sopra citate vengono discussi. Per PHerba Absinthii è stato studiato l'influsso del In base ai risultati ottenuti proposto che il dovrebbe contenuto esigere a come trovati nella segue: 0,25 %. » Per la «Radix Gentianae» Per il quelli magazzinaggio. bibliografia, viene minimo in olio essenziale che la Pharm. Helv. VI venga stabilito Per l'« Herba Absinthii e 0,04%. «Flavedo Àurantii amari» — 2,0%. 89 — BIBLIOGRAFIA Gantneb P.: Diss. ETH. Ziirich (1942). Korte F.: Arch. Pharm., 286, 257 (1953). Korte F.: Ber. dtsch. chem. 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Ho frequentato il ginnasio Ascona. e a Muralto da il liceo al Eugenio Biag- collegio Papio in Nell'estate del 1947 ho conseguito la maturità federale a Locamo, e nell'ottobre dello stesso anno, ho iniziato gli studi di farmacia alla Scuola Politecnica Federale di Zu¬ rigo, che ho frequentato durante — tre semestri. Ho poi assolto i tre semestri di pratica obbligatoria e a Zurigo, e l'anno obbligatorio d'assistenza Locamo a a Nyon. — Dopo altri quattro semestri ho conseguito il diploma farmacista alla Scuola Politecnica Federale di — Dal novembre del 1953 ho lavorato come assistente della federale della farmacopea (sotto-commissione all'Istituto di farmacia, della Scuola Politecnica commissione droghe) come Zurigo. Federale, dove ho svolto questo mio lavoro di tesi.