La ricerca scientifica alza la guardia contro le frodi nel settore ittico
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La ricerca scientifica alza la guardia contro le frodi nel settore ittico
IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta La ricerca scientifica alza la guardia contro le frodi nel settore ittico Elena Bozzetta SC Istopatologia e Test rapidi FRODI ALIMENTARI: la sanità pubblica in campo per la tutela dei cittadini Torino, 8 Maggio 2014 IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Un po’ di numeri… Indagini di Eurofishmarket Il 74% dei filetti dichiarati di platessa è risultato appartenente ad altre specie ittiche, principalmente alla specie Limanda limanda. Il 15% dei filetti di cernia venduti è risultato in realtà essere di altre specie. Attività della Capitaneria di porto 2011 9% di illeciti su 27.737 controlli effettuati tra grossisti, mercati ittici, grande distribuzione, ristorazione, pescherie e ambulanti. Tra le irregolarità: prodotti con date di scadenza false o in cattivo stato di conservazione IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta ? É H C PER • Approvvigionamento insufficiente ...“Consumo di pesce al massimo storico: 18.8 kg a persona nel 2011” FAO 2012 • Movimentazione derrate alimentari • Richiesta di varietà IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta SOSTITUZIONE DI SPECIE (aliud pro alio) • Frode commerciale (sogliola/passera/platessa) • Implicazioni sulla conservazione della specie • Implicazioni di tipo sanitario – Specie tossiche (coda di rospo/pesce palla) – Specie provenienti da aree o Paesi da cui è vietata l’importazione per motivi igienico-sanitari – Specie che possono provocare allergie – Specie a basso valore nutritivo IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Perché l’IDENTIFICAZIONE GENETICA di specie? • • • • Notevole esperienza per il riconoscimento morfologico Riconoscimento morfologico di porzioni o lavorati Presenza sul mercato di nuove specie Alimenti trattati termicamente Sinergia tra metodi classici e identificazione genetica IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Metodi 1/5 FINS Forensically Informative Nucleotide Sequencing: tecnica che combina il sequenziamento del DNA e l’analisi filogenetica basata su sequenze nucleotidiche informative But how? IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Campione ignoto Estrazione mDNA Sequenziamento Confronto sequenza consenso con quelle depositate nel database (GenBank) Sequenza di interesse Marcatore candidato: cytochrome b gene (cytb) IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Barcode of Life Il consorzio del Barcoding of Life si pone l’obiettivo, ambizioso, di raccogliere le sequenze del gene COI di tutte le forme di vita animale Si stanno raccogliendo in un database i barcode di almeno 5 soggetti/specie, che rappresentino le 30.000 specie ittiche più importanti. Ricerca Finalizzata 2008: “Valutazione di marker genetici per identificazione di specie, per la loro applicabilità nel controllo delle frodi alimentari”. cytb x5 COI 55 specie IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Validazione 1/2 cytb •56 pesci di mare •13 cefalopodi •7 crostacei •7 pesci di acqua dolce •6 Molluschi Eduli Lamellibranchi COI 89 specie 206 campioni •112 freschi • 62 congelati/decongelati • 3 sott’olio • 6 affumicati • 3 sotto sale • 21 lavorati IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Validazione 2/2 Predisposizione di un registro, per mettere in relazione la specie con la capacità discriminatoria del marcatore (cytb o il COI) • specificità: 100% per almeno uno dei due marcatori • variabilità intraspecifica: < 3% • sensibilità analitica: prove di diluizioni • ripetibilità stretta ed intermedia: K = 1 (i.c. 95% ≥ 0.61) • applicabilità su tutte le matrici • prova accreditata: marchio ACCREDIA IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Attività di analisi su campo 6 anni di attività 252 campioni ittici analizzati 90 campioni conformi 80 campioni non conformi 70 60 50 40 65 40 44 30 20 10 0 ANNO 2009 2010 2011 2012 2013 2014 15 9 1 3 2009 2010 27 2011 campioni NON CONFORMI 1 3 27 17 10 9 17 2012 campioni CONFORMI 9 15 40 65 44 17 15 10 6 2013 apr-14 totale specie ittiche analizzate 10 18 67 82 54 26 IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Alcuni esempi 1/3 Discriminazione di specie tra Aphia minuta (rossetto) e Sardina pilchardus (bianchetto) per Capitaneria di Porto di La Spezia • Analisi microscopica della morfologia congiuntamente all’analisi del DNA delle vertebre • Si prevede evoluzione di questo tipo di indagine per discriminazione del Pesce ghiaccio (Neosalanx tangkahkeii) IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Alcuni esempi 2/3 Regolamento (UE) N. 500/2012 concernente un piano pluriennale di ricostituzione del tonno rosso (Thunnus thynnus) nell’Atlantico orientale e nel Mediterraneo • T.obesus venduto come tonno rosso o salmone o pinne gialle • Tonno rosso senza documentazione • Tonno pinne gialle invece di pesce spada • Tonnetto invece di tonno IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Alcuni esempi 3/3 • Moscardini (Eledone cirrhosa) e polpo messicano (Octopus maya) per polpo comune (Octopus vulgaris) • Pollack d’Alaska (Theragra spp.) e eglefino (Melanogrammus eglefino) per merluzzo bianco (Gadus morhua) • Pangasio (Pangasius spp.) per gallinella (Chelidonichthys lucernus) e cernia (Acanthistius brasilianus) • Persico del Nilo (Lates niloticus) per pesce persico (Perca fluviatilis) • Prodotti ittici esotici provenienti dall’Estremo Oriente, talvolta venduti come nostrani → specie poco conosciute dal punto di vista genetico IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Conclusioni • Attività di routine in crescita: nel corso degli anni trend sempre positivo di campioni sospetti inviati al laboratorio. •Media del 22% di non conformità: importanza dei controlli. • Necessità di confrontarsi con chi opera sul campo per sviluppare metodiche finalizzate ad affrontare specifiche necessità od emergenze. IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta CAFODOS • molto usato perché economico • finalità: sbiancante, conservante, battericida • è una miscela di acido citrico, citrato di sodio e perossido d’idrogeno è possibile rintracciare l’acido citrico ed i suoi sali ma non il perossido d’idrogeno! IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Fresco vs congelato É? H C PER Codice Penale Frodi commerciali: Art 515 e segg. Frodi Sanitarie: Art 439 e segg. La dichiarazione del metodo di conservazione nel prodotto ittico assume un'enorme importanza nella percezione della qualità da parte del consumatore finale. D.lgs 109/2002 Legge 4 /2011 IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta La dichiarazione mendace dello stato di conservazione fresco/congelato configura oltre che una FRODE COMMERCIALE una FRODE SANITARIA Prodotti congelati dichiarati freschi Superamento TMC Aumento carica microbica Prodotto da consumarsi crudo non sottoposto a bonifica RISCHIO PARASSITOSI IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta L’ ACQUARIO NEL PIATTO, TORINO, 2 DICEMBRE 2013 IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Situazione Anisakis nel mediterraneo IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta RC Ministeriale: Trasmissione zoonotica di nematodi anisakidi dai prodotti della pesca all'uomo: utilizzo di GIS ed epidemiologia molecolare nella valutazione del rischio MAR LIGURE Positivi Specie soggetti misto acciughe sardine cefalopodi TOTALE 1339 4700 2102 820 8961 anisakidae anisakis hysterot. 757 422 524 757 228 569 116 12 112 21 4 18 1651 666 1223 MAR LIGURE larve coinfezion anisakidae e 189 40 6 1 236 hysterot. 2984 1198 1784 998 246 752 146 12 134 26 4 22 4154 1460 2692 prevalenza abbondanza Specie misto acciughe sardine cefalopodi anisakis intensità media tot anisakis hysterot. coinfezioni 56,53 16,11 5,52 2,56 31,52 4,85 0,57 0,49 39,13 12,11 5,33 2,20 14,12 0,85 0,29 0,12 3,94 1,32 1,26 1,24 anisakis hysterot. 0,89 0,05 0,01 0,0049 1,33 0,16 0,06 0,03 IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Attività di ricerca “Metodi rapidi basati sulla spettroscopia (fluorescenza ed infrarosso) per differenziare pesce fresco e pesce decongelato e loro utilizzo ai fini del controllo ufficiale” (Progetto di ricerca ministeriale 2008) SCOPO Valutazione delle prestazioni delle metodiche NIRS, FFFS e istologico per l’identificazione dello stato di freschezza/congelamento del pesce IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta RISULTATI METODO ISTOLOGICO IZSTO S.C. Istopatologia e Test Rapidi Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta PROCEDURA OPERATIVA STANDARD 10DG136 “ESAME ISTOLOGICO DI MUSCOLO DI PESCE PER IL RILIEVO DI ALTERAZIONI MICROSCOPICHE RIFERITE A CONGELAMENTO” TUTTE LE SPECIE DI PESCE Sensibilità: 90,70% (IC95%: 82,49% – 95,90%) Specificità: 92,59% (IC95%: 75,71% – 99,09%) Riproducibilità intralaboratorio: K-combined = 0.66 (IC95%: 0.57 - 0.75) PESCE SPADA Sensibilità: 100.00% (IC95%: 94,94% - 100,00%) Specificità: 100% (IC95%: 94,94% - 100,00%) Riproducibilità interlaboratorio: SPADA_K-combined = 0.95 (IC95%: 0.86 - 1.00) IZSTO S.C. Istopatologia e Test Rapidi Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta A Sezione di tessuto muscolare di Sparus aurata-Orata. A: prodotto fresco; B: prodotto congelato B IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Proposta operativa PIANO EPIDEMIOLOGICAMENTE STRUTTURATO PER STIMARE LA PRESENZA DEI PROBLEMI SUL TERRITORIO NAZIONALE •Corretta dicitura per lo stato di conservazione del pesce (GDO-Dettaglio) •Verificare l’effettuazione dell’abbattimento termico (Ristorazione) IZSTO IZSTO Istituto Zooprofilattico Istituto Zooprofilattico Sperimentale deldel Piemonte, Sperimentale Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Liguria e Valle d’Aosta PIANO di MONITORAGGIO (1/2) 1.CAMPIONAMENTO PESCI DA CONSUMARSI PREVIA COTTURA Mescolamento pesce fresco e congelato (prevalenza attesa 80%) CAMPIONAMENTO DI PESCE DI GRANDI DIMENSIONI (SPADA/TONNO) IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta PIANO di MONITORAGGIO (2/2) 2. CAMPIONAMENTO PER VERIFICARE L'AVVENUTO CONGELAMENTO SANITARIO prevalenza attesa del trattamento del 99% *A causa dei valori di sensibilità e specificità anche campionando tutti i soggetti della partita e trovandoli tutti sospetti non si raggiungerebbero i valori di accuratezza richiesti IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta INDAGINI NEL TORINESE Numero progressivo 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 Denominazione esposta in fase di vendita Smeriglio Salmone Persico Pangasio Tonno Pangasio Persico Salmone Salmone Merluzzo Persico Tonnetto Tonno Salmone Pangasio Persico Branzino Sarago Tonnetto Salmone Pangasio Persico Tonno Salmone Tonno Tonnetto Stato di conservazione dichiarato Congelato Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Congelato Congelato Congelato Fresco Tipologia di esercizio commerciale Area mercatale 1 (mercato ittico coperto) Area mercatale 2 Area mercatale 3 GDO 1 GDO 2 GDO 3 Ristorante 1 Ristorante 2 Ristorante 3 IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta RISULTATI Numero progressivo Specie dichiarata Specie identificata Stato di conservazione dichiarato Stato di conservazione effettivo 1 2 3 4 Smeriglio Salmone Persico Pangasio Isurus oxyrinchus Salmo salar Lates niloticus* Pangasius spp Congelato Fresco Fresco Fresco Congelato Fresco Fresco Congelato* 5 6 7 8 Tonno Pangasio Persico Salmone Thunnus albacares* Pangasius spp Lates niloticus* Salmo salar Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco 9 10 11 Salmone Merluzzo Persico Salmo salar Theragra chalcogramma* Lates niloticus* Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Congelato* 12 13 14 15 16 17 Tonnetto Tonno Salmone Pangasio Persico Branzino Euthynnus alletteratus Thunnus thynnus Salmo salar Pangasius spp. Perca fluviatilis Dicentrarchus labrax Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Congelato* Fresco Fresco Congelato* Fresco 18 19 Sarago Tonnetto Diplodus vulgaris Euthynnus alletteratus Fresco Fresco Fresco Fresco 20 21 22 Salmone Pangasio Persico Salmo salar Pangasius spp Perca fluviatilis Fresco Fresco Fresco Fresco Fresco Congelato* 23* 24 25 Tonno Salmone Tonno Thunnus obesus* Salmo salar Thunnus thynnus Congelato Congelato Congelato Fresco* Congelato Congelato 26 Tonnetto Euthynnus alletteratus Fresco Congelato* Per il 27% dei campioni è stata riscontrata una non conformità dello stato di conservazione IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta INDAGINI NELLA REGIONE LIGURIA PESCE DA CONSUMARSI CRUDO ID Dichiarato 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 congelato congelato congelato congelato congelato congelato congelato congelato congelato congelato congelato congelato congelato congelato congelato congelato congelato congelato congelato c c nc f nc c c nc c c f nc f f c c f f nc nc c nc nc c c c nc c c f nc f nc c c f nc nc c c f f c c c f c c f nc nc nc c c f f nc nc c nc nc c c c nc c c f f nc f c c f f nc nc c nc nc c c c nc c c f nc f f c c f f nc 5 CAMPIONI/ PARTITA L’ESAME ISTOLOGICO HA RILEVATO IL 26 % DI PARTITE NON CONFORMI IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Prevalenza positività di Diphyllobotrium latum nei maggiori laghi italiani Totale Lago Maggiore Lago di Como Lago d'Iseo Lago di Garda N° Campioni 310 692 319 212 N° Positivi 7 164 47 0 Prevalenza (%) 2,26 23,69 14,73 IZSTO S.C. Istopatologia e Test Rapidi Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta IL METODO ISTOLOGICO NELLA VALUTAZIONE FRESCO/CONGELATO DEL PESCE D’ACQUA DOLCE ) 20 trote fresche allevate in condizioni controllate prelievo del tessuto muscolare per l’esame istologico protocollo applicato non ha comportato modifiche a quello in uso TROTA IRIDEA (Oncorhyncus mykiss 20 trote allevate in condizioni controllate congelamento delle trote intere a -20°C per almeno 24 h (non più di 48 h) scongelamento a +4°C per circa 24 h prelievo del tessuto muscolare per l’esame istologico (lettura in cieco) IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta TESSUTO MUSCOLARE DI TROTA FRESCA (EE) TESSUTO MUSCOLARE DI TROTA SCONGELATA (EE) Sensibilità:100%, IC 95%(78-100%); Specificità 100%, IC 95% (83-100%) IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Ricerca corrente 11C3 Sorveglianza sulle frodi sanitarie ittiche relative alla dichiarazione dello stato di conservazione Previa valutazione dell’idoneità del metodo, indagini nel salmone affumicato Il 69% dei campioni di salmone affumicato sono risultati provenire da pesce fresco. Id campione Esito istologico 1 Fresco* 2 Non conclusivo 3 Fresco* 4 Congelato 5 Fresco* 6 Fresco* 7 Non conclusivo 8 Fresco* 9 Congelato 10 Fresco* 11 Fresco* 12 Congelato 13 Fresco* 14 Fresco* 15 Fresco* IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Cambiando i tempi di processazione.....(4 specie diverse) • Modificando i tempi di processazione la validità del test non cambia: • I valori di Se e Sp rimangono gli stessi TEMPI DI PROCESSAZIONE Se I.C. 95% SP I.C. 95% 24 ORE 100% 92.5% - 100% 100% 91.8% - 100% 12 ORE 100% 92.5% - 100% 100% 91% - 100% 6 ORE 100% 92.5% - 100% 100% 90% - 100% Aumenta l'ampiezza degli intervalli di confidenza perche aumenta la probabilità (non statisticamente significativa) di ottenere risultati non conclusivi. TEMPO DI PROCESSAZIONE ODDS RATIO I.C. 95% 12 ore 1,7 0.6 - 5.0 6 ore 2,6 0.9 - 6.97 I risultati non sono influenzati dalla specie ittica esaminata Ricerca corrente 11C3 Sorveglianza sulle frodi sanitarie ittiche relative alla dichiarazione dello stato di conservazione IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta INDAGINE ISTOLOGICA PRELIMINARE IN MOLLUSCHI CEFALOPODI Ricerca corrente 11C3 Sorveglianza sulle frodi sanitarie ittiche relative alla dichiarazione dello stato di conservazione Numero di soggetti campionati Denominazione esposta in fase di vendita 5 Totano di Porto S. Stefano Illex coindetii Fresco Area mercatale A (mercato ittico coperto) 3 Totano atlantico Illex argentinus Congelato Area mercatale A (mercato ittico coperto) 2 Polpo Octopus vulgaris 2 Polpo Octopus vulgaris 3 3 Polpo Octopus vulgaris Polpo Octopus vulgaris Stato di conservazione Congelato Fresco Luogo Area mercatale A (mercato ittico coperto) Area mercatale B (mercato ittico coperto) Congelato GDO C Fresco GDO C 3 sezioni longitudinali 3 trasversali in ciascun soggetto in corrispondenza di A: Mercato ittico di Milano; B: Mercato ittico di Savona; C: Ipermercato di Torino. IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta RISULTATI PRELIMINARI TESSUTO MUSCOLARE, SEZIONE TRASVERSALE TENTACOLO DI POLPO (EE) CAMPIONE FRESCO CAMPIONE CONGELATO IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta La proteomica a supporto della sicurezza alimentare La proteomica è la scienza che si occupa di studiare il proteoma “l’intero complesso di proteine espresse da un genoma” Il proteoma è dinamico e muta nel tempo in base a differenti processi fisiologici, patologici o in risposta a sostanze o stimoli ambientali. Lo studio del proteoma si realizza mediante tecniche molto sofisticate che consentono di separare le proteine presenti in miscele complesse e di caratterizzarle (elettroforesi bidimensionale, spettrometria di massa, microarray) IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta La proteomica a supporto della sicurezza alimentare Monitoraggio dei processi proteolitici legati alle modalità di conservazione degli alimenti di origine animale, quali il pesce fresco Valutazione espressione proteica tra campioni di polpo fresco e congelato Materiali: analisi di campioni di polpo fresco e dopo 72 ore di congelamento a -20 °C Metodologia 1.Estrazione e separazione proteine mediante analisi di elettroforesi bidimensionale (2D); 2.Colorazione della mappe proteiche; 3.Analisi di confronto con apposito software delle mappe proteiche ottenute dai due gruppi di campioni Risultati Evidenziata una diversa espressione proteica tra i campioni di polpo fresco e quello decongelato Applicazioni future: Sviluppo metodo per altre specie ittiche (moscardini e gamberi) e altre matrici (carni avicole) IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Ringraziamenti • • • • • • • Dr. Stefano Gili, ASL TO1; Dr. Renato Malandra, Responsabile Mercato Ittico Milano; Dr.ssa Elena Teneggi, Sezione di Genova; Dott. Marino Prearo, S.S. Laboratorio specialistico di Ittiopatologia; Dr Pierluigi Acutis e Maria Vittoria Riina, S.S. di Genetica; Dr.ssa Maria Mazza, S.S. Immunobiochimica; Dr.ssa Elisa Baioni e Cristiana Maurella, S.S. BEAR …e tutto il team dell’Istopatologia! CONTATTI: Elena BOZZETTA SC Istopatologia e Test Rapidi Tel. 011 2686361 [email protected] • STACCO • DOPO GIACENZE IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta RISULTATI Xiphias gladius FRESCO CONGELATO IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta La dichiarazione mendace dello stato di conservazione fresco/congelato configura oltre che una FRODE COMMERCIALE una FRODE SANITARIA Prodotti congelati dichiarati freschi Superamento TMC Aumento carica microbica Prodotto da consumarsi crudo non sottoposto a bonifica RISCHIO ANISAKIS IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta VALIDAZIONE METODO POS 10DG136 “ESAME ISTOLOGICO DI MUSCOLO DI PESCE PER IL RILIEVO DI ALTERAZIONI MICROSCOPICHE RIFERITE A CONGELAMENTO” PARAMETRI DI VALIDAZIONE TUTTE LE SPECIE Sensibilità: 90,70% (IC95%: 82,49% – 95,90%) Specificità: 92,59% (IC95%: 75,71% – 99,09%) Riproducibilità intralaboratorio: K-combined = 0.66 (IC95%: 0.57 - 0.75) PESCE SPADA Sensibilità: 100.00% (IC95%: 94,94% - 100,00%) Specificità: 100% (IC95%: 94,94% - 100,00%) Riproducibilità interlaboratorio: SPADA_K-combined = 0.95 (IC95%: 0.86 - 1.00) IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta INDAGINE ISTOLOGICA PRELIMINARE IN MOLLUSCHI CEFALOPODI Numero di soggetti campionati Denominazione esposta in fase di vendita 5 Totano di Porto S. Stefano Illex coindetii Fresco Area mercatale A (mercato ittico coperto) 3 Totano atlantico Illex argentinus Congelato Area mercatale A (mercato ittico coperto) 2 Polpo Octopus vulgaris Congelato 2 Polpo Octopus vulgaris Fresco 3 3 Polpo Octopus vulgaris Polpo Octopus vulgaris Stato di conservazione dichiarato Luogo 3 sezioni longitudinali 3 trasversali in ciascun soggetto in corrispondenza di Area mercatale A (mercato ittico coperto) Area mercatale B (mercato ittico coperto) Congelato GDO C Fresco GDO C A: Mercato ittico di Milano; B: Mercato ittico di Savona; C: Ipermercato di Torino. IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Regolamento UE 1276/2011 Regolamento CE 853/2004 allegato III, sezione VIII, capitolo III, paragrafo D “i prodotti ittici di seguito elencati devono essere congelati ad una temperatura non superiore a -20°C in ogni parte della massa per almeno 24 ore: […] a) i prodotti della pesca che vanno consumati crudi o praticamente crudi; oppure b) i prodotti della pesca marinati, salati […] siano sottoposti ad un trattamento di congelamento che uccide i parassiti […] a) I prodotti ittici da consumarsi crudi b) I prodotti della pesca sottoposti ad affumicatura a freddo con procedimento < 60°C (aringhe, sgombri, spratti, salmone) c) Prodotti della pesca marinati o salati” 2. Per i parassiti diversi dai trematodi il congelamento deve consistere in un abbassamento della temperatura in ogni parte della massa del prodotto fino ad almeno: a) – 20 °C, per almeno 24 ore; oppure b) – 35 °C, per almeno 15 ore. IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Visti i risultati incoraggianti ottenuti con l’istologia abbiamo validato il metodo istologico in 35 specie differenti IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta TANTO SUSHI E Non si può definire più come una moda tanto è diffuso il consumo di pesce crudo ed il sorgere spontaneo in ogni parte d’Italia di sushi bar o simili. In effetti l’abitudine di tanti italiani di mangiare pesce e molluschi non cotti non è un marchio tipico d’importazione “giapponese”, anche perché nel Nostro Paese è consuetudine consumarne da sempre, così come da sempre si dimenticano i rischi connessi dovuti spesso alla carenza d’informazione. IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Reg. 1379/2013 del Parlamento Europeo e del Consiglio Articolo 35 Informazioni obbligatorie [...] d) se il prodotto è stato scongelato; Il requisito di cui alla lettera d) non si applica: a) agli ingredienti presenti nel prodotto finito; b) agli alimenti per i quali il congelamento costituisce una fase tecnologicamente necessaria del processo di produzione; c) ai prodotti della pesca e dell'acquacoltura precedentemente congelati per ragioni di sicurezza sanitaria, conformemente all'allegato III, sezione VIII, del regolamento (CE) n. 853/2004; d) ai prodotti della pesca e dell'acquacoltura che sono stati scongelati prima di essere sottoposti ad affumicatura, salatura, cottura, marinatura, essiccatura o ad una combinazione di uno di questi processi. IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Valutazione metodo istologico in preparazioni di pesce Guia Valutare l’applicabilità dei parametri istologici adottati per identificare lo stato di conservazione del pesce ai prodotti sottoposti a trattamento di marinatura/affumicatura IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta RISULTATI PRELIMINARI TESSUTO MUSCOLARE, SEZIONE TRASVERSALE TENTACOLO DI POLPO (EE) Quale èdue…questo il fresco?................. Tutti è congelato…. IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta PARASSITI PRESENTI NEI PESCI D’ACQUA DOLCE Il numero di persone affette da parassitosi da trematodi associate al consumo di prodotti della pesca supera 18.000.000 (WHO, 1995), ma le persone a rischio, incluse quelle dei paesi in via di sviluppo non è quantificabile (WHO, 2004) Nel 2010 il numero di persone affette da parassitosi da trematodi associate al consumo di prodotti della pesca supera 50.000.000 •Consumo di pesci d’acqua dolce crudi o poco cotti •La maggior prevalenza nell’Asia sud-orientale •Aumenta il numero di infezioni in paesi considerati non endemici (globalizzazione del commercio) L’ ACQUARIO NEL PIATTO, TORINO, 2 DICEMBRE 2013