Tabella - IZSLER

1 Tabella 1: Metodi alternativi in vitro ed ex vivo validati. Saggio
Modello
Stato di Validazione
Riferimenti Normativi
IRRITAZIONE CUTANEA
EpiSkin SIT model
Epidermide umana
ricostituita in vitro
Completato
EURL-ECVAM
JaCVAM
OECD TG 439 (2010)
aggiornata nel 2013
EpiDermTM
Epidermide umana
ricostituita in vitro
Completato
EURL-ECVAM
OECD TG 439 (2010)
aggiornata nel 2013
®
TM
EpiDerm
SkinEthic RHE
LabCyte EPI-MODEL
Epidermide umana
ricostituita in vitro
Epidermide umana
ricostituita in vitro
Epidermide umana
ricostituita in vitro
Completato
EURL-ECVAM
Completato
EURL-ECVAM
Completato
JaCVAM
OECD TG 439 (2010;
updated 2013)
OECD TG 439 (2010)
aggiornata nel 2013
OECD TG 439 (2010)
aggiornata nel 2013
CORROSIONE CUTANEA
Resistenza elettrica
transcutanea di ratto (TER)
Corrositex®
Completato
Espianti di
epidermide di ratto
Membrana
macromolecolare
artificiale
ICCVAM
EURL-ECVAM
OECD TG 430 (2004)
aggiornata nel 2013
Completato
ICCVAM
EURL-ECVAM
OECD TG 435 (2006)
Completato
TM
EpiDerm - in vitro human
skin model
Epidermide umana
ricostituita in vitro
EpiSkin® - in vitro human
Epidermide umana
1 ICCVAM
EURL-ECVAM
Completato
OECD TG 431 (2004)
ultima revisione 20144
OECD TG 431 (2004)
2 skin model
ricostituita in vitro
SkinEthic - in vitro human
skin model
Epidermide umana
ricostituita in vitro
EST-1000 human
reconstructed epidermis
Epidermide umana
ricostituita in vitro
Vitrolife-Skin RHE
Epidermide umana
ricostituita in vitro
ICCVAM
EURL-ECVAM
Completato
EURL-ECVAM
Completato
EURL-ECVAM
Completato
JaCVAM
aggiornata nel 20134
OECD TG 439 (2010)
aggiornata nel 20131
OECD TG 431 (2004)
aggiornata nel 20131
OECD TG 431 (2004)
aggiornata nel 20134
ASSORBIMENTO CUTANEO
Assorbimento cutaneo:
metodo in vitro
OECD TG 428 (2004)
OECD GD 28
Espianti di
epidermide umana
e/o animale
OECD
OECD Guidance Notes
No. 156
FOTOTOSSICITÀ
Saggio di fototossicità su
cellule Balb/3T3
Vitalità cellulare su
cellule di mammifero
(Neutral Red Uptake)
Completata
OECD TG 432 (2004)
EURL‐ECVAM
Test di fototossicità 3T3
Neutral Red Uptake
Applicazione ai filtri chimici di
UV
Fototossicità
ECVAM (protocollo
INVITTOX )
OECD TG 432
Specie reattive dell'ossigeno
(ROS). Test di fotosicurezza
Test di fototossicità dii
prodotti farmaceutici
JaCVAM
EURL-ECVAM;
ICCVAM
Bozza di linea guida
OECD in discussione
(2014)
SENSIBILITÀ CUTANEA
Direct Peptide Reactivity Assay
(DPRA)
Determinazione degli
stadi iniziali degli
eventi di
sensibilizzazione
tramite legame
2 EURL-ECVAM
OECD TG 442C (2015)
3 covalente degli apteni
Attivazione di
pathway metabolici in
cheratinociti
Keratinosens
EURL-ECVAM
Compartecipazione
dell’industria
OECD 442D (2015)
IRRITAZIONE/CORROSIONE OCULARE
Test di opacità e permeabilità
della cornea di bovino
(BCOP)
Test sull’ occhio di pollo
(ICE)
Rilascio di Fluoresceina
Cytosensor Microphysiometer
Method
Saggio organotipico su
cornea isolato di
bovino
Completato
EURL-ECVAM;
ICCVAM; JaCVAM
Completato
Saggio organotipico su
occhio isolato di pollo
Funzionalità cellulare
(variazione di
permeabilità)
Funzionalità cellulare
(variazioni di pH) su
fibroblasi di topo
OECD TG 437 (2009)
aggiornata nel 2013
EURL-ECVAM;
ICCVAM;
OECD TG 438 (2009)
aggiornata nel 2013
Completato
OECD TG 460 (2012)
EURL-ECVAM
EURL-ECVAM
ICCVAM
Bozza di linea guida
OECD in discussione
(2013)
GENOTOSSICITÀ
Saggio del micronucleo su
cellule di mammifero (MNT)
Aberrazioni strutturali
e numeriche su cellule
di mammifero
Completato
EURL-ECVAM
OECD TG 487 (2010)
adottata nel 2014
Bacterial Reverse Mutation
Test (Ames Test)
Mutazioni geniche su
colture batteriche
OECD TG 471(1997)
Aberrazioni cromosomiche su
cellule di mammifero (CAT)
Aberrazioni strutturali
su cellule di
mammifero
OECD TG 473 (1997)
aggiornata nel 2014
Mutazione genetica su cellule
di mammifero
Aberrazioni strutturali
e numeriche su cellule
di mammifero
OECD TG 476 (1997)
Valutazioni di effetti
Studio della tossicità
riproduttiva estesa alla prima tossici
generazione
3 OECD TG 443 (2011)
4 CARCINOGENICITÀ
Saggi di trasformazione
cellulare (CTA): SHE (ph &,7
e 7) e Balb/c 3T3
Saggi di
trasformazione in vitro
su colture cellulari per
la determinazione del
potenziale
cancerogeno di una
sostanza
EURL-ECVAM
Bozza di TG in
discussione
TOSSICITÀ ACUTA SISTEMICA
Saggio di citotossicità
(BALB/c 3T3 e cheratinociti
normali umani NHK) per
determinare le dosi iniziali
per la tossicità acuta orale
Vitalità cellulare su
cellule di mammifero
(Neutral Red Uptake)
Completata
EURL_ECVAM
NICEATM
OECD GD 129 (2010)
EMOTOSSICITÀ
Formazione di colonie (CFUGM)
Test di emotossicità
per neutropenia acuta
ECVAM (protocollo
INVITTOX )
ESAC (2002)
DISTRUTTORI ENDOCRINI
Saggio di attivazione
trascrizionale dei recettori
estrogeni con attività agonista
Saggio di
bioluminescenza che
identifica le sostanze
in grado di attivare i
recettori estrogenici
Saggio di steroidogenesi
(cellule umane H295R)
Effetti delle sostanze
sulla produzione di
17ß-estradiolo e
testosterone
Test dell’inibizione
dell’aromatasi (umano
ricombinante)
Attivazione trascrizionale
OECD/EPA
Saggio di
OECD TG 455 (2009)
aggiornata nel 2012
Completata
OECD TG 456 (2011)
OECD/EPA
Test di screening per
le sostanze endocrine
attive
OPPTS TG 890.1200
(EPA, 2009)
Completata
4 Completata
OECD TG 457 (2012)
5 dell’attività estrogenica
agonista e antagonista
(BG1Luc – LUMI-CELL)
bioluminescenza che
identifica le sostanze
in grado di attivare i
recettori estrogenici
ICCVAM
TOSSICITÀ RIPRODUTTIVA E DELLO SVILUPPO
Test con le cellule staminali
embrionali (EST)
Embriotossicità/terato
genicità
ECVAM
(INVITTOX
protocol)
Test della micromassa
Embriotossicità/terato
genicità
ECVAM
(INVITTOX
protocol)
Ex vivo
PIROGENICITÀ
Sangue umano intero IL-1
Test della pirogenicità
da endotossine di gram
negativi, in alternativa
al test di pirogenicità
su coniglio (RPT).
Sangue umano intero IL-6
Test della pirogenicità
da endotossine di gram
negativi, in alternativa
al test di pirogenicità
su coniglio (RPT).
ECVAM;
ICCVAM
Sangue umano intero
crioconservato IL-1
In vivo/in vitro
EURL-ECVAM
ICCVAM (2008)
ECVAM;
ICCVAM (2008)
MM6 IL-6
Limulus Amebocyte Lysate
(LAL) test
EURL-ECVAM
ICCVAM (2008)
Identificazione delle
endotossine per
sostituire il test di
pirogenicità su
coniglio (RPT)
PRODOTTI BIOLOGICI E VACCINI
5 Farmacopea Europea
General Method 2.6.30
(2009)
FDA
Farmacopea Europea General Method 2.6.30
(2009)
FDA
Farmacopea Europea General Method 2.6.30
(2009)
FDA
Farmacopea Europea General Method 2.6.30
(2009)
FDA
6 Test basato su colture cellulari
per la determinazione della
tossina botulinica di tipo A in
prodotti biologici
Stabilità e test di
potenza del prodotto
ICCVAM
US FDA: Allergan, Inc.,
method accepted (2011)
Test ELISA per la valutazione
della Leptospira in vaccini
veterinari
Test di potenza del
prodotto
ICCVAM
USDA Supplemental
Assay Methods 624,
625, 626, and 627
(2008)
Test ELISA per la valutazione
di erysipelas del suino nei
vaccini
Test di potenza del
prodotto
EURL-ECVAM
Farmacopea Europea,
Monograph 064 (2004);
USDA Supplemental
Assay Method 613
Test ELISA per la valutazione
del vaccino anti-tetanico
dell’uomo
Test di potenza del
prodotto
EURL-ECVAM,
USDA
EDQM/EP (2003)
Test di inibizione di legame
tossina (ToBI) per il vaccino
anti-tetanico dell’uomo
Test di potenza del
prodotto
FDA, 21 CFR 610.10
(accepted on case-bycase basis)
EURL-ECVAM
EDQM/EP (2003)
FDA, 21 CFR 610.10
(accepted on case-bycase basis)
Fonti:
European Union Reference Laboratory for alternatives to animal testing (EURL-ECVAM)
https://eurl-ecvam.jrc.ec.europa.eu/
TSAR : Tracking System for Alternative test methods Review, Validation and Approval in the
Context of EU Regulations on Chemicals http://tsar.jrc.ec.europa.eu/
OECD Guidelines for the Testing of Chemicals, Section 4 http://www.oecd-ilibrary.org/
EURL ECVAM Status Report on the Development, Validation and Regulatory acceptance of
Alternative Methods and Approaches (2013-April 2014), April 2014.
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