INCYTO C-Chip DHC-N01

PRODOTTO DISTRIBUITIO DA:
INCYTO C-Chip DHC-N01
Emocitometro (Tipo Neubauer improved)
Contenuti
Apertura dell’imballo
Caratteristiche
Avvertenze per la sicurezza
Simboli di sicurezza
Introduzione
Conteggio con i C-Chip
A. Metodo generale
B. Conteggio delle cellule di mammifero
C. Conteggio degli eritrociti
D. Conteggio dei leucociti
Troubleshooting
Pag.
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Apertura dell’imballo
All’interno dell’imballo sono contenuti i vetrini C-Chip e le Istruzioni per l’utilizzo del dispositivo.
Caratteristiche
• Camera di conta caratterizzata da una profondità definita che determina precisione e
riproducibilità
• Per la lettura al microscopio, non è necessario aggiungere il vetrino copri - oggetto sul vetrino
C-Chip
• Ridotto rischio di esposizione a materiale potenzialmente infetto
• Velocità di esecuzione
• Dispositivo leggero ed indistruttibile, se confrontato con il supporto di vetro.
Avvertenze per la sicurezza
Per l’analisi di materiale potenzialmente pericoloso o infetto:
prendere le necessarie precauzioni,
manipolare con cautela,
eliminare il vetrino in modo opportuno.
Una lunga esposizione a solventi potrebbe causare la deformazione dei vetrini. Lo xilolo ed il toluene
dovrebbero essere evitati come soluzioni di montaggio dei vetrini. Si consiglia invece l’utilizzo di
glicerolo, gelatina ed altre soluzioni acquose.
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Man_C_Chip_050712.doc
Simboli di sicurezza
I simboli per la sicurezza presenti sull’etichetta dei C-Chip (DHC-N01) sono utili per informare
l’utilizzatore sul potenziale pericolo o l’attenzione nel manipolare il dispositivo. Prima dell’utilizzo,
leggere e consultare i simboli ed il loro significato.
Il vetrino C-Chip (DHC-N01) è un dispositivo monouso. Non riutilizzare.
Il campione dovrebbe essere analizzato subito dopo l’allestimento del vetrino.
Numero di Lotto
Data di Produzione
Data di Scadenza
Nome del Fabbricante
Non Riutilizzare
Pericolo!
Introduzione
Il vetrino C-Chip (DHC-N01) è un emocitometro monouso in plastica utilizzato per la conta manuale
delle cellule.
E’ costituito da una superficie formata da due camere di conta chiuse, che presentano due fori laterali
per l’aggiunta del campione. (Fig. 2).
Il modello di griglia presente sul modello DHC-N01 è esattamente corrispondente a quello della
Camera di Neubauer Improved. E’ costituita da 9 quadrati grandi, ciascuno dei quali misura 1 x 1 mm,
e la profondità delle camere è di 0.1 mm. Ciascun quadrato ha un volume totale di 0.1 mm3 o 10-4 cm3
(Fig. 1).
Il quadrato centrale è suddiviso in 25 piccoli quadrati da con tripla linea e i 4 quadrati agli angoli sono
suddivisi in altri 16 piccoli quadrati.
3 mm
1 mm
Fig. 1: Modello di griglia
0.25 mm
0.20 mm
Area di lettura
Area in cui viene aggiunto il campione
Fig. 2: Vetrino C-Chip (Modello DHC-N01)
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Man_C_Chip_050712.doc
Conteggio con i C-Chip
Metodo Generale
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Miscelare accuratamente il campione.
Aggiungere 10 µl di campione all’interno dell’area indicata in verde nella Fig. 2, affinché riempia
la camera di conta per capillarità.
Contare le cellule al microscopio.
Cellule/ml = N° medio di cellule per quadrato x Fattore di Diluizione x Volume campione
Conteggio delle cellule di mammifero
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Trattare il campione di cellule con tripsina - EDTA.
Rimuovere accuratamente il surnatante con il puntale della pipetta facendo attenzione a non
toccare il pellet.
Aggiungere un adeguato volume di terreno di crescita o PBS per diluire il campione ad una
concentrazione finale di 5 x 103 cellule / ml a 5 x 106 cellule / ml.
Risospendere bene il pellet di cellule con la pipetta.
Verificare visivamente se sono presenti gruppi di cellule o agglomerati.
Aggiungere 10 µl di campione all’interno dell’area indicata in verde nella Fig. 2.
Contare le cellule all’interno dei 5 quadrati grandi.
Cellule/ml = N° di cellule contate nei 5 quadrati grandi/5 x Fattore di Diluizione x 104 (volume)
Conteggio degli eritrociti (diluizione 1:200)
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Diluire il sangue secondo i metodi utilizzati di routine dal laboratorio.
Aggiungere 10 µl di campione diluito all’interno dell’area indicata in verde nella Fig. 2.
Contare gli eritrociti nei 5 quadrati piccoli (i 4 quadrati agli angoli ed un quadrato piccolo nel
mezzo) al centro del quadrato grande.
RBC/ml = N° di cellule contate nei 5 quadrati piccoli x 5 x 200 (fatt. di diluiz.) x 104 (volume)
Conteggio dei leucociti (diluizione 1:20)
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Diluire il sangue secondo i metodi utilizzati di routine dal laboratorio.
Aggiungere 10 µl di campione diluito all’interno dell’area indicata in verde nella Fig. 2.
Contare i leucociti all’interno dei 4 quadrati grandi agli angoli.
WBC/ml = N° cellule contate nei 4 quadrati grandi/4 x 20 (fattore di diluizione) x 104 (volume)
NB In generale, per ottenere il numero totale di cellule, è necessario moltiplicare il numero che
definisce la concentrazione (cell/ml) x il volume iniziale del campione.
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Man_C_Chip_050712.doc
Troubleshooting
In caso di risultati scarsamente visibili:
• Aggiungere con estrema attenzione il campione all’interno della camera di conta del C-Chip
per evitare di introdurre bolle d’aria.
• Osservare il campione dopo aver accuratamente rimosso la polvere dal vetrino.
• Aggiustare il fuoco del microscopio.
INCYTO Co., Ltd - Korea
AB ANALITICA srl, via Svizzera 16 – 35127 PADOVA. Tel. +39 040 761698, Fax +39 049 8709519,
e-mail: [email protected]
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Man_C_Chip_050712.doc