ENZIMI DENITRIFICANTI:clusters genici Nitrato Riduttasi
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ENZIMI DENITRIFICANTI:clusters genici Nitrato Riduttasi
Catena di trasporto degli elettroni e relazione con E0'. In questo esempio è raffigurata la catena di trasporto mitocondriale o di alcuni ceppi batterici come Paracoccus denitrificans . La catena di trasporto di Escherichia coli è priva dei citocromi c e aa3, e gli elettroni vanno direttamente dal citocromo b al citocromo o oppure d Le alternative metaboliche ACCETTORE DI ELETTRONI Prodotto finale NOME DEL PROCESSO O2 H2O Respirazione aerobica NO3- NO2-, NH3 or N2 Bacillus, Respirazione anaerobica: Pseudomonas denitrificazione SO42- S0 or H2S Respirazione anaerobica : riduzione dei solfati Desulfovibrio fumarato succinato E.coli respirazione anaerobica : con accettore organico di e- CO2 CH4 Metanogenesi (Archea) CHEMIOLITOTROFI Gruppo fisiologico Fonte di elettroni Prodotti finali ossidati Batteri dell’idrogeno H2 H2O Metanogeni H2 H2O Methanobacterium carbossidobatteri CO CO2 Rhodospirillum, Azotobacter batteri nitrificanti NH3 NO2- Nitrosomonas batteri nitrificanti NO2 NO3- Nitrobacter ossidanti zolfo H2S or S0 SO42- Thiobacillus, Sulfolobus Ferro-batteri Fe 2+ Fe3+ Gallionella, Thiobacillus microrganismo Alcaligenes, Pseudomonas Ossidazione del solfuro Anaerobiosi CICLO DELL’AZOTO 2. NITRIFICAZIONE 5. DENITRIFICAZIONE 3. AMMONIFICAZIONE Assimilatoria/ dissimilatoria 4.OSSIDAZIONE AMMONICA ANAEROBICA 1. FISSAZIONE Nitrosomonas: NH3 +3/2 O2 Nitrobacter può usare il nitrito prodotto HNO2 + H2O DENITRIFICAZIONE •Diminuisce la quantità di azoto disponibile nel terreno •Aumenta N2O nell’atmosfera diminuzione di ozono, effetto serra •Bilancia il ciclo dell’azoto • Una certa quantità di nitrati viene perduta per percolazione negli strati profondi del suolo(azoto nei sedimenti), entrando così in cicli geochimici di lunga durata: dai sedimenti l'azoto può ritornare disponibile attraverso le eruzioni vulcaniche (azoto "juvenile"). • Una parte dell'azoto nitrico viene trasformato in forme volatili che ritornano all'atmosfera. Tale processo avviene ad opera di batteri denitrificanti che, in carenza o assenza di O2, utilizzano NO3- come accettore finale di elettroni. • Per la riduzione del nitrato a N2 i batteri utilizzano 10 elettroni 2NO3- 4e 2NO2- 2e 2NO(g) 2e N2O (g) 2e N2 (g) MICROORGANISMI DENITRIFICANTI • Biochimicamente e tassonomicamente vari: auto/etero-trofi, fotosintetici • Possiedono enzimi capaci di ossidare nitrati a N2 •Alcuni rilasciano N2O in quanto non hanno la ossido nitroso riduttasi*. Halobacterium (Archea), Alcaligenes, Pseudomonas, Rhizobium, Thiobacillus *Fusarium oxysporum (fungo) Parametri che favoriscono il processo di denitrificazione: •Assenza di O2 •Alte concentrazioni di nitrati •5.5<pH<8.6 •Temperature > 5°C, anche se avviene anche fino a 0°C Pathway di denitrificazione • NaR risiede nel citoplasma dove arriva NO3• NO2- viene portato nel periplasma dove è ridotto da NiR • NoR risiede nella membrana citoplasmatica e rilascia N2O nel periplasma • Nel periplasma N2O viene ridotto a N2 da NoS narK NAR, Nitrato riduttasi; NIR, Nitrito riduttasi NOR, Ossido Nitrico riduttasi; N2OR, Ossido Nitroso riduttasi ENZIMI DENITRIFICANTI:clusters genici Nitrato Riduttasi Transmembrana Periplasmatica (plasmidica) narGHI: Eterotrimero narJ: chaperone-like narK: trasportatore di NOx di membrana napAB: Eterodimero napC: cyt tipo c di membrana, tetraeme napD, KEF, GH: proteine accessorie Regolatori trascrizionali: narXL: sistema a due componenti Regolazione trascrizionale : sensibile a NOx Espressa anche in presenza Fnr: anaerobiotico di O2. Anr: simile a Fnr ENZIMI DENITRIFICANTI:clusters genici Nitrito Riduttasi Cyt cd1 NIR nirS: omodimero, eme c e d1 geni per citocromi e proteine accessorie per la biosintesi dell’eme. Regolazione trascrizionale : Mediata da proteine simili a Fnr in carenza di O2 e/o presenza di NOx. Rame NIR nirK: omotrimero Non sono stati trovati altri geni nell’operone Espresso in totale anaerobiosi ENZIMI DENITRIFICANTI:clusters genici Ossido Nitrico Riduttasi norCB: Eterodimero transmembrana norQD: necessari per la crescita in anaerobiosi norEF: coinvolti nella regolazione dell’attività enzimatica Regolazione trascrizionale: mediata da proteine Fnr-like in condizioni di totale anaerobiosi ed in presenza di NO ENZIMI DENITRIFICANTI:clusters genici Ossido Nitroso Riduttasi I geni nos si trovano in 3 unità trascrizionali: nosZ: subunità catalitica nosR: regolatore trascrizionale nosDFYL: coinvolti nella regolazione dell’attività enzimatica Regolazione trascrizionale: mediata da 6 promotori in condizioni di totale anaerobiosi ed in presenza di NO