Il microRNA epatico hsa-mir-125a-5p potrebbe esercitare un ruolo

LIVER MICRORNA HSA-MIR-125A-5P MAY EXERT
AN ONCOSUPPRESSOR EFFECT ON
HEPATOCELLULAR CARCINOMA (HCC)
Nicola Coppola1, Giorgio de Stefano2, Nicola Mosca3, Valentina
Iodice2, Carmine Minichini1, Filomena Castiello3, Nunzia Farella2,
Mario Starace1, Nicoletta Potenza3, Giulia Liorre2, Lorenzo
Onorato1, Evangelista Sagnelli1, Aniello Russo3
1: Department of Mental Health and Public Medicine,
Second University of Naples
2: IX Interventional Ultrasound Unit for Infectious Diseases- AORN dei
Colli- P.O. Cotugno- Naples
3: Department of Life Sciences, Second University of Naples
HCC
L’HCC è la quinta neoplasia più
comune negli uomini e la nona nelle
donne, rappresentando la seconda
causa di morte per tumore al mondo
Si sviluppa nell’80-90% dei casi su
fegato cirrotico e l’eziologia virale è
presente in circa l’80% dei pazienti
affetti, con il solo HBV responsabile di
circa il 50% dei casi
El-Serag HB, Gastroenterology 2012; 142:1264-73
Negli ultimi venti anni si è assistito in
Italia ad un progressivo incremento
delle forme ad eziologia non virale, in
particolare correlate a steatoepatite
alcolica e non alcolica
Santi V et al. J Hepatol 2012;56:387-405
Estimated age-standardised
rates (World) per 100,000
GLOBOCAN 2012 v1.0, IARC CancerBase
I MICRORNA
Sono RNA non codificanti
della lunghezza di circa
22 nucleotidi
 Regolano l’espressione
genica a livello posttrascrizionale, causando
la degradazione
dell’mRNA target o
impedendone la
traduzione
 Sono implicati in processi
di proliferazione e
differenziazione cellulare,
apoptosi, oncogenesi

Eulalio A et al. Cell 2008;132:9-14
MICRORNA ED HCC
Come per diverse altre neoplasie, l’espressione di un gran numero di mirna
è risultata alterata nelle cellule di epatocarcinoma rispetto agli epatociti
sani, tanto in vitro quanto in vivo.
Le loro concentrazioni plasmatiche sono state poste in correlazione con la
diagnosi, la stadiazione, la prognosi e la risposta al trattamento. Inoltre
alcuni di essi potrebbero rappresentare un possibile bersaglio terapeutico.
Giordano S et al. Hepatology 2013; 57:840-847
Borel et al. J Hepatol 2012;56:1371-83
3’ UTR dell’mRNA di S
Potenza N, Nucl Acid Res 2011
2013
PlosOne 2013
HSA-MIR-125A-5P ED HCC

MicroRNA noto per il suo effetto oncosoppressore su cellule
di carcinoma polmonare e gastrico attraverso la downregulation di proteine di trasduzione del segnale attivate
dal recettore dell’EGF.
Wang G et al. FEBS J 2009; 276(19): 5571-8
Nishida N et al. Clin Cancer Res 2011; 17(9): 2725-33

Già da tempo è stata descritta l’ipoespressione del mir-125a
nel tessuto neoplastico rispetto al non neoplastico in
pazienti affetti da HCC
Murakami Y et al. Oncogene 2006; 25: 2537–2545
Meng F et al. Gastroenterology 2007;133:647–658

Il suo ruolo nell’HCC è stato più di recente posto in
correlazione al silenziamento del gene che codifica per
SIRT7, fattore di trascrizione iperespresso in cellule di
epatocarcinoma, il cui knockdown causa l’arresto del ciclo
cellulare in fase G1/S
Kim JK et al. Hepatology 2013;57:1055-1067
OBIETTIVI DELLO STUDIO
Valutare la concentrazione dell’hsa-mir-125a-5p
sul tessuto neoplastico e non neoplastico di
pazienti con HCC di diversa eziologia
 Porre in correlazione il profilo di espressione del
microRNA con le caratteristiche demografiche,
cliniche, biochimiche e virologiche dei pazienti

hsa-miR-125a-5p nel
tessuto neoplastico
hsa-miR-125a-5p nel
tessuto non neoplastico
Età, sesso, parametri
biochimici, eziologia, Child
score, stadio BCLC etc.
Pazienti
56 pazienti con diagnosi di epatocarcinoma sono stati seguiti
presso l’ UO Malattie Tropicali della SUN e dalla IX Divisione di
Ecografia ed Ecointerventistica dell’ AORN dei Colli – Ospedale
Cotugno dal giugno 2013 a maggio 2014.
DEFINIZIONE DELL’EPATOCARCINOMA
CITO-ISTOLOGICA:
differenziato
scarsamente,
moderatamente,
altamente
e/o
RADIOLOGICA: il comportamento contrastografico
altamente
specifico per HCC è definito dalla presenza di ipervascolarizzazione
“wash-in” in fase arteriosa, seguita da ipovascolarizzazione “wash-out”
in fase portale e tardiva, nelle diverse metodiche contrastografiche
(CEUS/TC ed RMN)
AASLD 2011
Metodi
Di ogni paziente abbiamo raccolto campioni di
• plasma 
•sangue intero 
Tramite PCR real time sono state
valutate le concentrazioni dell’ hsa-mir125a-5p, espresse in Unità Arbitrarie
(AU) in relazione a quelle dell’RNU6B
• un campione bioptico di HCC 
• uno del restante parenchima epatico risparmiato dalla neoplasia 
RISULTATI
Caratteristiche demografiche, cliniche, biochimiche e
virologiche dei pazienti arruolati
N° patients
Mean age (+SD)
Males, n° (%)
56
69.4 (+6.5)
30 (53.6)
AST/ULN (mean ± SD)
1.52 (+ 0.9)
ALT/ULN (mean ± SD)
1.50 (+ 0.9)
ALP/ULN (mean ± SD)
3.60 (+ 16.0)
Total bilirubin, mg/dl (mean ± SD)
0.99 (+ 0.57)
PT% (mean ± SD)
90.10 (+ 12.9)
a-fetoprotein, (mean ± SD)
106.22 (+352.5)
HBsAg positive patients, n° (%)
9 (16.1)
Anti-HCV positive patients, n° (%)
41 (73.2)
-
HBsAg negative/anti-HBc positive patients, n° (%)
Patients with NAFLD, n°(%)
14 (25)
6 (10.7)
RISULTATI
Caratteristiche clinichedei pazienti arruolati
N° patients
56
Child Pugh score, n° (%) of patients with
-
A
49 (87.5)
-
B
6 (10.7)
-
C
1 (1.8)
Patients with fist diagnosis of HCC, n° (%)
39 (69.6)
Patients with a recidivate HCC, n° (%)
17 (30.4)
Patients with a single HCC, n° (%)
31 (55.4)
Patients with a multiple HCC, n° (%)
25 (44.6)
Patients with portal thrombosis, n° (%)
2 (3.6)
BCLC score, n° (%) of patients with
-
A
47 (83.9)
-
B
7 (12.5)
-
C
2 (3.6)
mir-125a expression (AU)
BOX PLOT MIR-125A EXPRESSION
IN NON CANCER vs HCC
N° of patients
p<0.000
Non-HCC
HCC
56
56
BOX PLOT MIR-125A EXPRESSION
IN NON CANCER vs HCC, PER EZIOLOGIA
mir-125a expression (AU)
14.00
p<0.036
p<0.000
p<0.02
CC
12.00
Non HCC
10.00
HCC
8.00
6.00
4.00
2.00
0.00
N° of patients
HBV
HBV
9
HCV
HCV
41
NASH
NASH
6
NON NOTO
BOX PLOT MIR-125A EXPRESSION
IN NON CANCER vs HCC, PER EZIOLOGIA
20.00
0.00
-20.00
-40.00
-60.00
-80.00
-100.00
1 9 26373866626330
5261 2 1516192021222529313235364041 5 7 6 8 1314171828565733343943444748505146106554
HCV
HBV
NASH
% Down reg. media down reg
tot
HBV
HCV
NASH
80%
89%
78%
100%
11424923
-6,29
-13,32
-4,99
-3,03
5855
RISULTATI
Concentrazioni del microRNA nel tessuto neoplastico
in relazioni ai dati clinici ed eziologici
Parameter
Number
Liver HCC hsa-miR125a-5p,
AU mean (SD)
p-value
Cirrhosis
- Child-Pugh score A
- Child-Pugh score B or C
49
7
4.67 (3.47)
7.05 (3.77)
0.099
BCLC score
-A
- B or C
47
9
4.66 (3.78)
6.31 (2.79)
0.21
CONCLUSIONI


L’ipoespressione dell’hsa-mir-125a-5p nel tessuto
neoplastico rispetto al non neoplastico sembrerebbe
confermare il suo ruolo di oncosoppressore nell’HCC
Ulteriori studi su casistiche più ampie sono
necessari per chiarire il reale significato clinico di
questo microRNA ed indagare il suo potenziale
impiego terapeutico
“L’attenzione è
la forma più
rara e più pura
della generosità”
(Simone Weil)
GRAZIE PER L’ATTENZIONE!