FVIII - Werfen

COAMATIC® Factor VIII
Per la determinazione fotometrica dell’attività del fattore VIII (FVIII) nel plasma
umano citratato: per il rilevamento di un deficit di FVIII, per il monitoraggio di
pazienti in terapia sostitutiva, oppure per la valutazione dell’efficacia dei concentrati di
FVIII.
Il FVIII è una proteina plasmatica ad alto peso molecolare che agisce come co-fattore
del fattore IXa (FIXa) nell’attivazione del fattore X (FX) a fattore Xa (FXa). Una
carenza di FVIII causa un grave disturbo nella coagulazione: l’emofilia A. La gravità di
questo disturbo emorragico è inversamente correlata alla concentrazione del FVIII.
Pazienti affetti di emofilia A sono in genere classificati sulla base dell’attività del loro
FVIII in tre categorie: < 0.01 UI/mL (emofilia grave), 0.01-0.04 UI/mL (emofilia
moderata), e 0.05-0.25 UI/mL (emofilia lieve).
Il kit Coamatic Factor VIII fornisce i reattivi per determinare l’attività del Fattore VIII
nel plasma umano e nei concentrati di Fattore VIII con metodica cromogenica. In
presenza di ioni calcio e di fosfolipidi, il Fattore X viene attivato a Fattore Xa dal
Fattore IXa. Questa attivazione è fortemente stimolata dal Fattore VIII che agisce
come co-fattore. Usando quantità ottimali di ioni calcio, fosfolipidi, FIXa e FX in
eccesso, la velocità di attivazione del FX risulta correlata linearmente alla quantità di
FVIII endogeno. Il FXa idrolizza il substrato cromogenico S-2765 liberando il gruppo
cromoforo paranitroanilina (pNA) che viene letto fotometricamente a 405 nm. Il FXa
così generato, e quindi il colore prodotto, è direttamente proporzionale all’attività del
FVIII presente nel campione. L’idrolisi del substrato S-2765 ad opera della trombina
formatasi è evitata aggiungendo al substrato l’inibitore sintetico della trombina I2581.
Il kit COAMATIC® Factor VIII è composto da:
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Chromogenic substrate: 1 flacone di substrato cromogenico S-2765 (7,7 mg) e
inibitore sintetico della trombina I-2581 (0,2 mg) con mannitolo come eccipiente
•
Factor reagent: 2 flaconi di Fattore IXa bovino (0,3 U), Fattore X (2,7 IU) e
trombina (1 NIH-U) co-liofilizzati con CaCl2 (40 mmol) e fosfolipidi (0,2 mmol)
•
Buffer, stock solution: 1 flacone da 24 mL di tampone Tris concentrato contenente
NaCl e BSA. Caratteristiche del tampone diluito (1:10): Tris 0,025 mol/L pH 7,9
BSA 1% I = 0,08
I reattivi non sono intercambiabili tra differenti lotti.
Conservazione e stabilità dei reagenti
I reattivi non aperti conservati a 2-8°C rimangono stabili fino alla data di scadenza
stampata sull’etichetta. Proteggere i reattivi da contaminazioni microbiche. Stabilità
dopo ricostituzione:
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Chromogenic substrate: 1 mese a 2-8°C. Eliminare la soluzione substrato se essa
appare colorata in giallo
•
Factor reagent: 12 ore a 2-8°C, 2 settimane a -30°C o 1 mese a -70°C. Evitare
conservazione a -20°C.
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Buffer, stock solution: 1 mese a 2-8°C dopo diluizione.
Codice
00082258563
Codice nominale
Alan
Caratteristiche principali
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Co-liofizzazione dei reagenti per un più facile trattamento
•
Affidabile mezzo per la classificazione dell’emofilia
•
Nessuna interferenza da eparina fino a 1.5 IU/mL