Monofase Card per Test di Calprotectina (Feci)

Monofase Card per
Test di Calprotectina (Feci)
Metodica
REF C-87
10 test
Test monofase per la determinazione qualitativa della Calprotectina nelle
feci umane.
Solo per uso diagnostico professionale in vitro.
USO PREVISTO
La calprotectina è un test rapido immunocromatografico per la determinazione
qualitativa di calprotectina umana in campioni di feci che riflettono
l'infiammazione gastrointestinale causata da alcune patologie (malattie
infiammatorie intestinali, cancro del colon-retto e alcune enteropatie).
Calprotectina offre una elevata sensibilità, un dosaggio semplice e non invasivo
per stimare l'attività infiammatoria intestinale, per monitorare la risposta del
trattamento e per predire il rischio di ricaduta.
RIEPILOGO
La Calprotectina è una proteina citosolica neutrofila con proprietà
antimicrobiche, che è presente a una maggiore concentrazione nelle feci
durante l'infiammazione intestinale.
La stabilità della proteina al degrado si mantiene stabile nelle feci fino a 7
giorni a temperatura ambiente, rendendolo un analita ideale. La
Calprotectina viene rilasciata dall’ attivazione dei leucociti, dando un
aumento dei livelli nel plasma, nel liquido cerebro spinale, nel liquido
sinoviale, nelle urine o feci come conseguenza della malattia nell'organo in
questione (s). La Calprotectina inibisce i sistemi enzimatici zincodipendente, uccidendo i microbi e inducendo l’apoptosi nelle cellule normali
e tumorali.
In presenza di calcio, la calprotectina ha una notevole resistenza alla
degradazione protelolitica, e così è stabile nelle feci conservate a
temperatura ambiente per 7 giorni.
PRINCIPIO
La calprotectina è un test qualitativo immunocromatografico per la
determinazione della calprotectina umana in campioni di feci. La membrana
è pre-rivestita con anticorpi sulla banda del test (regione del risultato),
contro la calprotectina umana.
Durante il test, il campione viene fatto reagire con il coniugato colorato
(anticorpi anti calprotectina umana-microsfere rosse) pre-essiccati al test. La
miscela si sposta quindi verso l'alto sulla membrana per azione capillare.
Quando il campione fluisce attraverso la membrana del test, le particelle
colorate migrano. In caso di risultato positivo agli anticorpi specifici
presenti sulla membrana saranno catturati dal coniugato colorato. Una
banda colorata sarà visibile, banda dovuta dal contenuto calprotectina del
campione. Questa banda viene utilizzata per interpretare il risultato.
La miscela continua a muoversi attraverso la membrana per l'anticorpo
immobilizzato posto nella regione della banda di controllo; questa banda di
colore verde, appare sempre.
La presenza di questa banda verde serve:
1) verificare che il volume aggiunto è sufficiente,
2) che il flusso è corretto
3) come controllo interno per i reagenti.
PRECAUZIONI
- Per uso professionale, per un uso diagnostico in vitro.
- Non utilizzare dopo la data di scadenza.
- Tutti i campioni devono essere considerati come potenzialmente pericolosi e
manipolati come se si trattasse di agenti infettivi.
- Il test deve essere eliminato in un contenitore secondo le norme locali in
vigore.
CONSERVAZIONE E STABILITA’
Conservare nel sacchetto sigillato a 2-30 °C. Il test è stabile fino alla data di
scadenza indicata sulla confezione. Il test deve rimanere chiuso fino al
momento dell'uso.
Non congelare.
PRELIEVO E PREPARAZIONE DEL CAMPIONE
I campioni di feci devono essere raccolti in contenitori puliti e l'analisi deve
essere effettuata subito dopo la raccolta. I campioni possono essere
conservati a temperatura ambiente o in frigorifero (2-4 °C) per 7 giorni
prima del test. Per una conservazione più lunga, massimo 6 mesi, il
campione deve essere congelato a -20 °C. In questo caso, il campione sarà
completamente scongelato, e portato a temperatura ambiente prima del test.
Prelievo del campione (vedere l’illustrazione):
Raccogliere una sufficiente quantità di feci (1-2 grammi o 1-2 mL per
campioni liquidi).
Preparazione dei campione
Utilizzare un tubo con campione di estrazione per ciascun campione. Svitare
il tappo e introdurre il bastoncino del flacone in tre punti diversi del
campione di feci, in modo di raccoglierne un piccolo quantitativo, pari a un
chicco di riso (15 mg) e stemperarlo nel tubo contenente il tampone.
Chiudere il flacone e agitare per omogenare la soluzione. La soluzione può
essere conservata per 5 giorni. Per feci liquide, aspirare il campione con una
pipetta gocciolatore e aggiungere 10-20 µL nel flacone con il tampone di
estrazione.
COMPOSIZIONE DELLA CONFEZIONE
Materiale Fornito
• Test Calprotectina
• Istruzioni per l'uso
• Provette per la raccolta delle feci con diluente
Materiale Necessario Ma Non Fornito
• Timer
• Contenitori per la raccolta dei campioni
PROCEDURA
Lasciare il test, i campioni di feci e controlli a temperatura ambiente
(15-30 º C) prima dell'analisi. Non aprire gli involucri fino al momento
di eseguire il test.
1. Procedere ad agitare il tubo di raccolta delle feci in modo da assicurare
una buona dispersione del campione. Tagliare le estremità del cappuccio (3).
2. Rimuovere il dispositivo calprotectina dal suo sacchetto sigillato appena
prima dell'uso.
3. Utilizzare un tubo di raccolta delle feci e un dispositivo per ogni
campione o controllo. Dispensare 4 gocce o 100 µl nella finestra circolare
contrassegnata con la freccia (4).
4. Leggere il risultato dopo 10 minuti (appaiono le bande colorate).
Non leggere il risultato del test dopo più di 10 minuti.
INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI
NEGATIVO: Appare solo una banda VERDE in tutta la finestra centrale
del sito contrassegnato con la lettera C (linea di controllo). Ciò
significherebbe che non è presente nel paziente una infiammazione
gastrointestinale.
POSITIVO: Oltre alla banda di controllo VERDE, una banda ROSSA
(calprotectina linea del test) appare nel sito contrassegnato con la lettera T (
linea del risultato). Ciò significherebbe che probabilmente, è in atto una
patologia infiammatoria gastrointestinale.
NON VALIDO: L'assenza totale della banda di controllo (VERDE)
indipendentemente dalla presenza della banda del risultato (ROSSA). I
motivi della mancata presenza della banda di controllo, potrebbero essere
legati a un volume di campione insufficiente, a tecniche di procedurali non
corrette o al deterioramento dei reagenti.Rivedere la procedura e ripetere il
test usando un nuovo test.
Se il problema persiste, non utilizzare il kit e contattare il distributore locale.
NOTE
L'intensità della banda di colore rosso nella regione del risultato (T) varia a
seconda della concentrazione di calprotectina umana nel campione.
Tuttavia, né il valore quantitativo né la percentuale di aumento della
calprotectina può essere determinato con questo test qualitativo.
VALORI ATTESI
Livelli maggiori di calprotectina nelle feci possono essere associati con
Indice dei Simboli
aumentato rischio di ricaduta in pazienti con sindrome da intestino
Attenzione, consultare
N°determinazioni
Fabbricante
infiammato (IBD). Alcuni studi stabiliscono come cut-off un valore
Solo per uso diagnostico
Usare entro
Non
uguale o superiore a 50µg hFCP/g di feci per permettere di
Conservare a 2-30°C
Numero del lotto
determinare
la
calprotectina
in
pazienti
adulti
con
problemi
infiammatori intestinali.
Rev. 0 05/2016
PERFORMANCE
CONTROLLO DI QUALITA’
I controlli interni procedurali sono inclusi nel test. Una linea verde che
compare nella zona di controllo (C) è un controllo interno. Questa banda
conferma che il volume di campione è sufficiente e che la procedura
corretta.
Sensibilità
Il test rileva campioni che contengono Calprotectina ad una
concentrazione uguale o maggiore a 50µg/g di feci. Sono state testate
differenti diluizioni di calprotectina direttamente nel tampone di
estrazione o forniti con campioni di feci negativi, in base alla metodica, in
modo da determinare il limite di sensibilità del test. La diagnosi della
calprotectina tramite questo test dimostra una sensibilità > 94%
correlata con un altro test commerciali (calprotectina Eurospital)
Specificità
La diagnosi della calprotectina umana tramite questo test dimostra una
specificità del 93% in correlazione con un altro test commerciale
(calprotectina eurospital)
LIMITI
BIBLIOGRAFIA
1. Il test deve essere effettuato entro 2 ore dall'apertura del sacchetto
sigillato.
2. Le feci dei pazienti trattati con farmaci non steroidei anti-infiammatori
(FANS) potrebbero mostrare risultato positivo.
3. I livelli neonatali di calprotectina fecale sono stati segnalati più elevati
rispetto ai bambini normali con un mediana di 167µg /g (range 22-860).
4. Un eccesso di campione di feci potrebbero dare risultati sbagliati (appare
una banda marrone o si verifica l'assenza della banda di controllo).
5. Le feci di pazienti affetti da malattie infiammatorie croniche intestinali
che di solito comportano una significativa infiammazione neutrofila delle
instestino, come il morbo di Crohn e la colite ulcerosa, sono positivi per la
calprotectina fecale. La Calprotectina potrebbe essere sensibile a questa
diagnosi nei pazienti con diarrea cronica.
6. I risultati positivi confermano la presenza di calprotectina umana in
campioni di feci; tuttavia, può essere anche dovuta a cause diverse (malattie
infiammatorie intestinali, cancro del colon-retto e alcuni enteropatie). Per
confermare la diagnosi e per stabilire l'entità dell'infiammazione un risultato
positivo dovrebbe essere seguita da ulteriori procedure diagnostiche
invasive, come la colonscopia e la biopsia
7. I risultati negativi non escludono l'infiammazione, alcune malattie
infiammatorie come la sprue celiaca e la colite microscopica coinvolgono
principalmente l’infiammazione monocucleare.
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162-169.
Fabbricante
INTERMEDICAL s.r.l.
Via A.Genovesi,13
80010 Villaricca(Na)-ITALY
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